| 摘要 | 第1-4页 |
| Abstract | 第4-7页 |
| 第一章 绪论 | 第7-13页 |
| ·1,2,4-丁三醇 | 第7-10页 |
| ·1,2,4-丁三醇的理化性质 | 第7页 |
| ·1,2,4-丁三醇的用途 | 第7页 |
| ·1,2,4-丁三醇的化学法合成 | 第7-8页 |
| ·1,2,4-丁三醇的生物法合成 | 第8-10页 |
| ·代谢工程 | 第10页 |
| ·研究意义及主要研究内容 | 第10-13页 |
| ·研究意义 | 第10-11页 |
| ·研究内容 | 第11-13页 |
| 第二章 大肠杆菌中 1,2,4-丁三醇合成途径的初步构建和表达 | 第13-35页 |
| ·实验材料 | 第14-16页 |
| ·质粒和菌株 | 第14页 |
| ·引物 | 第14-15页 |
| ·培养基 | 第15-16页 |
| ·酶与试剂 | 第16页 |
| ·实验方法 | 第16-27页 |
| ·常规分子实验操作 | 第16-20页 |
| ·BW-004的构建 | 第20-22页 |
| ·BW-010的构建 | 第22-25页 |
| ·重组大肠杆菌BW-011的构建 | 第25-26页 |
| ·菌株的培养和转化 | 第26-27页 |
| ·代谢产物的检测分析 | 第27页 |
| ·实验结果 | 第27-33页 |
| ·BW-004的构建 | 第27-30页 |
| ·BW-010的构建 | 第30-31页 |
| ·BW-011的构建 | 第31-32页 |
| ·BW-011的摇瓶转化 | 第32-33页 |
| ·本章小结 | 第33-35页 |
| 第三章 大肠杆菌合成 1,2,4-丁三醇的途径优化 | 第35-53页 |
| ·实验材料 | 第35-37页 |
| ·质粒和菌株 | 第35页 |
| ·引物 | 第35-36页 |
| ·培养基 | 第36-37页 |
| ·酶与试剂 | 第37页 |
| ·实验方法 | 第37-43页 |
| ·对新 2-酮酸脱羧酶的筛选 | 第37页 |
| ·KivD的理性设计 | 第37页 |
| ·重组质粒的构建 | 第37-42页 |
| ·重组菌株的构建 | 第42页 |
| ·质粒的化学转化 | 第42页 |
| ·菌株的培养和转化 | 第42-43页 |
| ·实验结果 | 第43-50页 |
| ·对新 2-酮酸脱羧酶的筛选 | 第43页 |
| ·KivD的理性设计 | 第43-49页 |
| ·1,2,4-丁三醇合成途径中各步酶的表达量的精确调节 | 第49-50页 |
| ·本章小结 | 第50-53页 |
| 第四章 转化条件对 1,2,4-丁三醇合成的影响 | 第53-64页 |
| ·实验材料 | 第53页 |
| ·菌株 | 第53页 |
| ·培养基 | 第53页 |
| ·试剂 | 第53页 |
| ·实验方法 | 第53-55页 |
| ·菌株的培养和转化 | 第53-54页 |
| ·代谢产物的检测分析 | 第54页 |
| ·菌株生长情况分析 | 第54页 |
| ·SDS-PAGE | 第54-55页 |
| ·实验结果 | 第55-63页 |
| ·不同转化体系对 1,2,4-丁三醇合成的影响 | 第55-57页 |
| ·不同转化条件对 1,2,4-丁三醇合成的影响 | 第57-62页 |
| ·优化条件下的 1,2,4-丁三醇合成情况 | 第62-63页 |
| ·本章小结 | 第63-64页 |
| 主要结论与展望 | 第64-66页 |
| 主要结论 | 第64-65页 |
| 展望 | 第65-66页 |
| 致谢 | 第66-68页 |
| 参考文献 | 第68-72页 |
| 附录: 作者在攻读硕士学位期间发表的论文 | 第72-73页 |
| 附录: 论文中主要基因序列 | 第73-81页 |
