Alkalimonas amylolytica碱性淀粉酶的高效表达与发酵优化
| 摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-9页 |
| 第一章 绪论 | 第9-15页 |
| ·碱性淀粉酶概述 | 第9-10页 |
| ·碱性淀粉酶简介 | 第9页 |
| ·碱性淀粉酶的酶学性质 | 第9-10页 |
| ·碱性淀粉酶的应用 | 第10页 |
| ·碱性淀粉酶的生产 | 第10-11页 |
| ·野生菌产碱性淀粉酶 | 第10-11页 |
| ·重组菌产碱性淀粉酶 | 第11页 |
| ·枯草芽孢杆菌表达系统 | 第11-13页 |
| ·枯草芽孢杆菌表达体系简介 | 第11-12页 |
| ·枯草芽孢杆菌的信号肽和蛋白质分泌途径 | 第12-13页 |
| ·立题依据 | 第13页 |
| ·本论文主要研究内容 | 第13-15页 |
| 第二章 材料与方法 | 第15-22页 |
| ·材料 | 第15-17页 |
| ·仪器与试剂 | 第15页 |
| ·菌株与质粒 | 第15-17页 |
| ·培养基 | 第17页 |
| ·操作方法 | 第17-20页 |
| ·分子生物学操作方法 | 第17-19页 |
| ·培养方法 | 第19页 |
| ·等离子诱变方法 | 第19页 |
| ·高通量筛选方法 | 第19-20页 |
| ·分析方法 | 第20-22页 |
| ·重组质粒稳定性的测定 | 第20页 |
| ·菌体生物量测定 | 第20页 |
| ·糊精浓度的测定 | 第20页 |
| ·重组AmyK的定位 | 第20页 |
| ·SDS-PAGE凝胶电泳分析 | 第20页 |
| ·碱性淀粉酶酶活力测定 | 第20-22页 |
| 第三章 结果与讨论 | 第22-40页 |
| ·高效分泌信号肽筛选 | 第22-26页 |
| ·AmyK分泌信号肽的比较 | 第22-23页 |
| ·带有不同信号肽的重组表达载体的构建 | 第23-24页 |
| ·不同重组菌的表达分析 | 第24-26页 |
| ·重组质粒pMA0911M1 稳定性的研究 | 第26页 |
| ·等离子诱变重组菌WB11M1 | 第26-28页 |
| ·ARTP诱变条件优化 | 第26-27页 |
| ·筛选碱性淀粉酶高产突变株 | 第27-28页 |
| ·诱变菌株遗传稳定性的研究 | 第28页 |
| ·重组菌产AmyK摇瓶发酵优化 | 第28-35页 |
| ·初始发酵培养基的选择 | 第29页 |
| ·碳源对重组菌生长和AmyK产量的影响 | 第29-31页 |
| ·氮源对重组菌生长和AmyK产量的影响 | 第31-32页 |
| ·碳酸钠对重组菌生长和AmyK产量的影响 | 第32-33页 |
| ·接种量对重组菌生长和AmyK产量的影响 | 第33-34页 |
| ·摇瓶发酵过程分析 | 第34-35页 |
| ·重组菌 3 L罐发酵优化 | 第35-40页 |
| ·溶解氧控制 | 第35-36页 |
| ·pH条件控制 | 第36-37页 |
| ·流加发酵优化 | 第37-40页 |
| 主要结论与展望 | 第40-42页 |
| 主要结论 | 第40-41页 |
| 展望 | 第41-42页 |
| 致谢 | 第42-43页 |
| 参考文献 | 第43-48页 |
| 附录: 作者在攻读硕士学位期间发表的论文 | 第48页 |
