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基于酶循环放大的表面增强拉曼光谱技术在肿瘤标志物检测中的应用研究

摘要第1-6页
ABSTRACT第6-11页
第一章 绪论第11-31页
 1 DNA 生物传感器第11-16页
   ·DNA 及 ssDNA 简介第11-12页
   ·DNA 及 ssDNA 结构和性质第12-13页
   ·ssDNA 的检测及分析方法第13-15页
   ·适体 DNA 生物传感器的应用前景第15-16页
 2 溶菌酶第16-18页
   ·溶菌酶简介第16-17页
   ·溶菌酶的化学性质第17页
   ·溶菌酶的应用第17-18页
   ·溶菌酶的优点第18页
 3 拉曼散射第18-26页
   ·拉曼散射简介第18-19页
   ·拉曼散射的原理及特点第19-21页
   ·拉曼分析技术前沿第21-22页
   ·表面增强拉曼散射第22-26页
     ·SERS 的发现第22页
     ·SERS 的机理第22页
     ·SERS 标记物第22-25页
     ·SERS 的其他应用第25-26页
 4 金纳米颗粒在 SERS 中的应用第26-30页
   ·纳米金颗粒简介第26-27页
   ·金纳米粒子的性质第27-28页
   ·金胶在免疫检测中的应用第28-29页
   ·在细胞和细菌检测中的应用第29-30页
 5 本论文的意义及研究内容第30-31页
第二章 基于酶循环放大 SERS 检测 DNA 的研究第31-46页
 1 前言第31页
 2 实验部分第31-34页
   ·仪器与试剂第31-33页
     ·主要试剂第31-33页
     ·仪器设备第33页
   ·实验方法第33-34页
     ·Au 纳米粒子的制备第33页
     ·生物条码的制备第33-34页
     ·Au 片预处理第34页
     ·自组装 Au 片第34页
     ·准备磁珠 Mb第34页
     ·剪切循环(A)与指数放大循环(B)第34页
     ·目标 DNA 的 SERS 检测试验第34页
 3 结果与讨论第34-45页
   ·循环放大检测 DNA 工作原理第34-35页
   ·可行性验证实验第35-37页
   ·自制金胶溶液中纳米金颗粒电镜表征第37页
   ·生物条码紫外表征第37-38页
   ·生物条码中 DNA 比例的优化第38-39页
   ·反应的温度的优化第39-40页
   ·DNA 传感器体系最佳条件的选择第40-43页
     ·加入聚合酶和剪切酶的用量优化第40-42页
     ·链替换循环放大和剪切酶循环放大反应时间的优化第42-43页
   ·SERS 检测 DNA 的灵敏度第43-45页
 4 小结第45-46页
第三章 基于适体识别和循环放大技术的 SERS 检测溶菌酶的研究第46-60页
 1 引言第46-47页
 2 实验部分第47-50页
   ·仪器与试剂第47-48页
     ·仪器装置第47页
     ·主要试剂第47-48页
   ·实验步骤第48-50页
     ·金纳米粒子的制备第48页
     ·生物条码的制备第48-49页
     ·适体 DNA 修饰的磁珠 MB 的制备第49页
     ·溶菌酶的制备第49页
     ·酶切循环反应过程第49页
     ·溶菌酶的 SERS 检测第49-50页
 3 实验结果与讨论第50-59页
   ·工作原理第50-51页
   ·自制金胶溶液中纳米金颗粒电镜表征第51-52页
   ·体系反应的温度的优化第52-53页
   ·反应时间的优化第53-54页
   ·切刻内切酶的用量的优化第54-55页
   ·聚合酶的用量的优化第55-56页
   ·在最优条件下不同浓度的溶菌酶第56-58页
   ·溶菌酶的选择性研究第58-59页
 4 结论第59-60页
第四章 基于工具酶循环放大 SERS 检测 Romas 细胞的研究第60-74页
 1 前言第60-61页
 2 实验部分第61-64页
   ·仪器与试剂第61-62页
     ·主要试剂第61-62页
     ·仪器设备第62页
   ·实验方法第62-64页
     ·金胶的制备第62页
     ·生物条码的制备第62页
     ·适体 DNA 修饰的 MB 的制备第62-63页
     ·Ramos 细胞的培养第63页
     ·聚合酶切循环放大反应步骤第63页
     ·SERS 检测 Ramos 细胞第63-64页
 3 结果与讨论第64-73页
   ·设计方案及工作原理第64-65页
   ·生物条码中拉曼信号标记的 DNA 的用量优化第65-66页
   ·聚合酶用量优化第66-67页
   ·剪切酶用量第67-68页
   ·温度优化第68-69页
   ·反应时间优化第69-70页
   ·DNA 工作曲线第70-71页
   ·Ramos 细胞工作曲线第71-72页
   ·Ramos 细胞的选择性研究第72-73页
 4 小结第73-74页
结论第74-76页
参考文献第76-83页
致谢第83-84页
附录:攻读硕士学位期间已发表和待发表的学术论文目录第84-85页

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