摘要 | 第1-5页 |
Abstract | 第5-9页 |
英文缩略表 | 第9-10页 |
第一章 文献综述 | 第10-32页 |
·转位酶Ⅰ(MRAY)的生物化学 | 第11-20页 |
·转位酶Ⅰ(MRAY)作用的发现 | 第11-12页 |
·MRAY 基因的鉴定 | 第12页 |
·MRAY 一级和二级结构的分析 | 第12-14页 |
·MRAY 的酶学特性 | 第14-20页 |
·MRAY 的天然抑制剂 | 第20-27页 |
·转移酶Ⅰ的核苷酸类抑制剂 | 第20-26页 |
·转移酶 I 的环肽类抑制 | 第26-27页 |
·转移酶 I 的其他小分子抑制剂 | 第27页 |
·噬菌体 PHI X174 裂解蛋白 E 对转移酶 I 的抑制 | 第27-28页 |
·MRAY 的高通量分析的发展 | 第28-32页 |
第二章 抗 MRAY-AB 蛋白单克隆抗体的制备与纯化 | 第32-46页 |
·材料 | 第32页 |
·菌株、质粒、细胞和实验动物 | 第32页 |
·主要仪器 | 第32页 |
·主要试剂和药品 | 第32页 |
·方法 | 第32-39页 |
·蛋白纯化 | 第32-34页 |
·动物免疫 | 第34-35页 |
·ELISA 方法检测血清效价 | 第35页 |
·SP2/0 细胞的制备 | 第35-36页 |
·饲养层细胞的制备 | 第36页 |
·免疫脾细胞的制备 | 第36页 |
·细胞融合 | 第36-37页 |
·杂交瘤细胞的筛选 | 第37页 |
·杂交瘤细胞的亚克隆 | 第37-38页 |
·杂交瘤细胞的冻存与复苏 | 第38页 |
·单克隆抗体的大量制备 | 第38页 |
·单克隆抗体的纯化 | 第38-39页 |
·结果 | 第39-43页 |
·重组质粒转化的 PCR 鉴定 | 第39-40页 |
·MRAY-AB 蛋白的表达 | 第40页 |
·MRAY-AB 蛋白的纯化 | 第40-41页 |
·免疫血清效价检测 | 第41-42页 |
·M-H11 单克隆细胞株腹水效价的检测 | 第42页 |
·纯化单抗 M-H11 的 SDS-PAGE 检测 | 第42-43页 |
·单克隆抗体的 WESTERN-BLOT 检测 | 第43页 |
·讨论 | 第43-46页 |
·动物的免疫 | 第43-44页 |
·筛选体系的建立 | 第44页 |
·融合细胞的制备 | 第44-46页 |
第三章 抗 MRAY 单抗的特性研究 | 第46-70页 |
·材料 | 第46-47页 |
·菌株和质粒 | 第46页 |
·单抗和实验动物 | 第46页 |
·主要仪器 | 第46页 |
·主要试剂药品 | 第46-47页 |
·引物设计 | 第47页 |
·方法 | 第47-59页 |
·M-H11 的亚类鉴定 | 第47页 |
·M-H11 的表位筛选 | 第47-51页 |
·表位多肽的合成 | 第51-52页 |
·单抗 M-H11 抑制 E.COLI BL21(DE3)PLYSS 生长的试验 | 第52-53页 |
·单抗 M-H11 体外抑制野生型 E.COLI 耐药菌株生长的试验 | 第53-54页 |
·单抗 M-H11 体外抑制 E.COLI DH5Α生长的试验 | 第54页 |
·单抗 M-H11 体外抑制 DH5Α(△OMPT)生长的试验 | 第54-58页 |
·单抗 M-H11 体外抑制 E.COLI BL21(DE3)生长的试验 | 第58页 |
·单抗体外抑制 PLYSS/E.COLI BL21(DE3)实验 | 第58-59页 |
·结果 | 第59-67页 |
·M-H11 单抗的亚类鉴定结果 | 第59页 |
·扩增噬菌体储液对 M-H11 结合的 ELISA 检测结果 | 第59-60页 |
·阳性噬菌体克隆测序及同源性比对结果 | 第60页 |
·蛋白 MRAY 表位多肽与 M-H11 单抗的反应 | 第60-61页 |
·蛋白 MRAY 表位多肽对 MRAY-AB 蛋白的竞争抑制 | 第61页 |
·M-H11 单抗对 E.COLI BL21(DE3)PLYSS 的体外抑制结果 | 第61-62页 |
·M-H11 单抗对 E.COLI BL21(DE3)PLYSS 的体内抑制结果 | 第62-63页 |
·M-H11 单抗对野生型耐药 E.COLI 的体外抑制结果 | 第63页 |
·M-H11 单抗对 E.COLI DH5Α的体外抑制结果 | 第63-64页 |
·M-H11 单抗对 E.COLI DH5Α(△OMPT)的体外抑制结果 | 第64-66页 |
·M-H11 单抗对 E.COLI BL21(DE3)的体外抑制结果 | 第66-67页 |
·M-H11 单抗对 PLYSS/E.COLI BL21(DE3)的体外抑制结果 | 第67页 |
·讨论 | 第67-70页 |
第四章 结论 | 第70-72页 |
参考文献 | 第72-78页 |
致谢 | 第78-80页 |
附录 | 第80-82页 |
个人简历 | 第82页 |