| 中文摘要 | 第1-10页 |
| Abstract | 第10-13页 |
| 縮略语表 | 第13-15页 |
| 1 文献综述 | 第15-37页 |
| ·弓形虫简介 | 第15-18页 |
| ·弓形虫的发现 | 第15页 |
| ·弓形虫的生活史 | 第15-16页 |
| ·弓形虫的感染性时期及形态特点 | 第16-17页 |
| ·弓形虫的流行及危害 | 第17-18页 |
| ·弓形虫致病机制的研究 | 第18-24页 |
| ·弓形虫的细胞入侵与溢出 | 第19-20页 |
| ·胞内生存及免疫逃避 | 第20-22页 |
| ·钙离子及相关蛋白在弓形虫运动中的作用 | 第22-24页 |
| ·体内诱导抗原技术(IVIAT) | 第24-32页 |
| ·体内诱导抗原技术的发展与原理 | 第24-28页 |
| ·体内诱导抗原技术的应用 | 第28-32页 |
| ·弓形虫疫苗的研究进展 | 第32-37页 |
| ·弓形虫的保护性免疫 | 第32-33页 |
| ·弓形虫全虫疫苗的研究 | 第33-34页 |
| ·弓形虫疫苗候选分子的研究 | 第34-37页 |
| 2 研究目的与意义 | 第37-38页 |
| 3 材料与方法 | 第38-64页 |
| ·实验材料 | 第38页 |
| ·主要仪器与试剂 | 第38-41页 |
| ·主要仪器 | 第38页 |
| ·主要试剂 | 第38-39页 |
| ·主要溶液的配制 | 第39-41页 |
| ·试验方法 | 第41-64页 |
| ·弓形虫的收集与纯化 | 第41-42页 |
| ·速殖子总RNA的提取 | 第42-43页 |
| ·cDNA表达文库的构建 | 第43-47页 |
| ·弓形虫抗血清的吸附 | 第47-48页 |
| ·文库的免疫筛选 | 第48-50页 |
| ·体内诱导抗原基因表达差异的验证 | 第50-51页 |
| ·体内诱导抗原的原核表达 | 第51-55页 |
| ·弓形虫CaM对速殖子表型的影响 | 第55-60页 |
| ·体内诱导抗原MIC11免疫特性的研究 | 第60-64页 |
| 4 结果与分析 | 第64-94页 |
| ·速殖子的收集与纯化 | 第64页 |
| ·速殖子cDNA表达文库的构建 | 第64-68页 |
| ·速殖子总RNA的提取 | 第64-65页 |
| ·全长双链cDNA的合成 | 第65页 |
| ·长片段双链cDNA的分离纯化 | 第65-66页 |
| ·初始文库的滴度测定 | 第66页 |
| ·初始文库重组率测定 | 第66-67页 |
| ·文库重组插入片段的鉴定 | 第67-68页 |
| ·扩增文库滴度测定 | 第68页 |
| ·阳性血清的吸附 | 第68-69页 |
| ·表达文库的免疫筛选 | 第69-70页 |
| ·阳性克隆插入片段的鉴定 | 第70-72页 |
| ·阳性克隆插入片段大小的鉴定 | 第70-71页 |
| ·阳性克隆的测序分析及功能预测 | 第71-72页 |
| ·体内诱导抗原表达差异的验证 | 第72-73页 |
| ·体内诱导抗原的原核表达 | 第73-77页 |
| ·体内诱导抗原基因ORF的获得 | 第73页 |
| ·目的片段与pMD19-T载体的连接 | 第73-75页 |
| ·重组原核表达质粒的构建 | 第75页 |
| ·重组蛋白的SDS-PAGE | 第75-76页 |
| ·重组蛋白的Western-blot | 第76-77页 |
| ·弓形虫CaM对速殖子表型的影响 | 第77-89页 |
| ·重组蛋白GST-CaM最佳表达条件的确定 | 第77-78页 |
| ·重组蛋白GST-CaM存在形式的确定 | 第78-79页 |
| ·弓形虫CaM多克隆抗体的制备 | 第79-80页 |
| ·弓形虫CaM的RNAi | 第80-84页 |
| ·弓形虫CaM的下调表达对速殖子胞内繁殖的影响 | 第84-86页 |
| ·弓形虫CaM的下调表达对细胞粘附的影响 | 第86页 |
| ·弓形虫CaM的下调表达对细胞入侵的影响 | 第86-87页 |
| ·弓形虫CaM的下调表达对细胞溢出的影响 | 第87-89页 |
| ·弓形虫CaM的下调表达对滑行运动的影响 | 第89页 |
| ·弓形虫体内诱导抗原MIC11免疫特性的研究 | 第89-94页 |
| ·真核表达质粒pcDNA3.1/MIC11的构建 | 第89-90页 |
| ·重组质粒pcDNA3.1/MIC11的体外表达 | 第90-91页 |
| ·实验动物血清抗体的检测 | 第91页 |
| ·淋巴细胞增殖实验 | 第91-92页 |
| ·细胞因子的检测 | 第92-93页 |
| ·pcDNA3.1/MIC11对BLAB/c鼠的保护力实验 | 第93-94页 |
| 5 讨论 | 第94-106页 |
| ·猪弓形虫体内诱导抗原的鉴定 | 第94-98页 |
| ·猪弓形虫体内诱导表达基因鉴定的重要性 | 第94页 |
| ·体内诱导抗原技术(IVIAT)的选择应用 | 第94-95页 |
| ·弓形虫速殖子cDNA表达文库的构建 | 第95页 |
| ·免疫筛选的优化 | 第95-96页 |
| ·体内诱导抗原基因的鉴定及部分重要抗原的功能 | 第96-98页 |
| ·体内诱导抗原基因表达差异的验证及原核表达 | 第98-99页 |
| ·体内诱导抗原基因表达差异的验证 | 第98-99页 |
| ·体内诱导抗原基因的原核表达 | 第99页 |
| ·弓形虫CaM的功能研究 | 第99-103页 |
| ·RNAi技术在弓形虫中的应用 | 第100-102页 |
| ·弓形虫CaM对速殖子表型变化的影响 | 第102-103页 |
| ·体内诱导抗原MIC11免疫学特性的研究 | 第103-106页 |
| 6 结论 | 第106-107页 |
| 参考文献 | 第107-124页 |
| 致谢 | 第124-126页 |
| 附录1 | 第126-129页 |
| 附录2 | 第129页 |