酿酒酵母乙醇发酵工业菌株的RAPD分析与基因工程改造
| 摘要 | 第1-6页 |
| ABSTRACT | 第6-12页 |
| 第一章 前言 | 第12-25页 |
| ·乙醇 | 第12页 |
| ·乙醇的生产方法 | 第12-13页 |
| ·化学合成法 | 第12-13页 |
| ·发酵法 | 第13页 |
| ·乙醇发酵的微生物菌种及乙醇发酵原料 | 第13-16页 |
| ·乙醇发酵的微生物菌种 | 第13-14页 |
| ·乙醇发酵原料 | 第14-15页 |
| ·甘蔗糖蜜发酵生产乙醇 | 第15-16页 |
| ·酿酒酵母分子鉴定 | 第16-19页 |
| ·基于保守基因序列的鉴定 | 第16-17页 |
| ·基于分子标记技术的鉴定 | 第17-19页 |
| ·酿酒酵母基因组学研究 | 第19-20页 |
| ·酿酒酵母基因工程改造 | 第20页 |
| ·酿酒酵母分子鉴定与基因工程改造的技术基础 | 第20-22页 |
| ·选题依据 | 第22页 |
| ·技术路线 | 第22-25页 |
| ·建立酿酒酵母PCR模板高通量制备法并进行验证 | 第22-23页 |
| ·系列酿酒酵母工业菌株的RAPD分析 | 第23页 |
| ·基因工程改造 | 第23-25页 |
| 第二章 方法与步骤 | 第25-37页 |
| ·实验材料 | 第25页 |
| ·酵母菌株 | 第25页 |
| ·培养基与溶液配制 | 第25页 |
| ·主要仪器设备 | 第25页 |
| ·酶与试剂 | 第25页 |
| ·PCR模板高通量制备法的建立与验证 | 第25-30页 |
| ·利用PCR模板高通量制备法制备模板,扩增ITS | 第25-26页 |
| ·不同长度核基因扩增 | 第26-28页 |
| ·CTAB法制备PCR模板,扩增不同长度核基因 | 第28-29页 |
| ·2种方法RAPD扩增验证 | 第29-30页 |
| ·酿酒酵母RAPD分析的方法与步骤 | 第30-33页 |
| ·RAPD分析对象选择 | 第30页 |
| ·RAPD引物 | 第30-32页 |
| ·RAPD分析 | 第32-33页 |
| ·高产菌株基因工程改造的方法与步骤 | 第33-37页 |
| ·YFR034C基因的克隆验证 | 第33-34页 |
| ·原生质体感受态制备 | 第34页 |
| ·电转化及原生质体再生 | 第34页 |
| ·菌株初步筛选 | 第34-35页 |
| ·分子鉴定 | 第35页 |
| ·突变子与对照发酵性状的初级比较 | 第35页 |
| ·突变子发酵性状检测 | 第35-37页 |
| 第三章 结果与分析 | 第37-66页 |
| ·PCR模板高通量制备法可行性对比验证 | 第37-39页 |
| ·ITS序列扩增 | 第37页 |
| ·不同长度核基因扩增 | 第37-38页 |
| ·CTAB提基因组法扩增不同长度核基因 | 第38页 |
| ·2种方法RAPD扩增验证 | 第38-39页 |
| ·系列酿酒酵母菌株的RAPD分析 | 第39-57页 |
| ·RAPD分析对象选择依据 | 第39-42页 |
| ·引物筛选 | 第42页 |
| ·RAPD分析图谱选择 | 第42-46页 |
| ·RAPD图谱统计 | 第46-54页 |
| ·RAPD聚类分析 | 第54-57页 |
| ·高产菌株基因工程改造 | 第57-66页 |
| ·YFR034C基因扩增 | 第57-58页 |
| ·菌株筛选及分子鉴定 | 第58-59页 |
| ·突变子与对照发酵性状的初级比较 | 第59-61页 |
| ·突变子发酵性状检测 | 第61-66页 |
| 第四章 讨论 | 第66-70页 |
| ·酿酒酵母RAPD分析 | 第66-67页 |
| ·酿酒酵母基因工程改造 | 第67-68页 |
| ·PCR模板高通量制备法的建立 | 第68-70页 |
| 第五章 结论与展望 | 第70-72页 |
| ·结论 | 第70-71页 |
| ·展望 | 第71-72页 |
| 参考文献 | 第72-79页 |
| 附录Ⅰ | 第79-81页 |
| 培养基与溶液配制 | 第79-80页 |
| 主要仪器设备 | 第80-81页 |
| 附录Ⅱ | 第81-86页 |
| ITS序列 | 第81-83页 |
| YFR034C基因 | 第83-85页 |
| YFR034C基因编码的氨基酸序列 | 第85-86页 |
| 致谢 | 第86-87页 |
| 攻读学位期间发表的学术论文 | 第87页 |
