| 摘要 | 第1-7页 |
| Abstract | 第7-9页 |
| 缩略语表 | 第9-10页 |
| 第1章 文献综述 | 第10-18页 |
| ·病毒形态学和理化特性 | 第10页 |
| ·基因组结构 | 第10-12页 |
| ·ORF1 | 第11页 |
| ·ORF2 | 第11-12页 |
| ·ORF3 | 第12页 |
| ·HEV基因型 | 第12页 |
| ·HEV流行病学 | 第12-14页 |
| ·HEV基因型的地理分布 | 第12-13页 |
| ·国外HEV的流行情况 | 第13页 |
| ·我国HEV的流行状况 | 第13-14页 |
| ·传染源 | 第14页 |
| ·传播途径 | 第14-15页 |
| ·易感人群 | 第15页 |
| ·猪HEV的诊断 | 第15-16页 |
| ·酶联免疫吸附实验(ELISA) | 第15-16页 |
| ·反转录套式聚合酶链反应(RT-nPCR) | 第16页 |
| ·免疫电镜法 | 第16页 |
| ·免疫荧光法 | 第16页 |
| ·猪HEV疫苗研究进展 | 第16-18页 |
| 第2章 研究目的与意义 | 第18-19页 |
| 第3章 材料与方法 | 第19-39页 |
| ·实验材料 | 第19-24页 |
| ·病料 | 第19页 |
| ·菌株 | 第19页 |
| ·载体 | 第19-20页 |
| ·工具酶及主要试剂 | 第20-21页 |
| ·培养基及抗生素的配制 | 第21页 |
| ·主要缓冲液与相关试剂及其配制 | 第21-23页 |
| ·分子生物学分析软件 | 第23-24页 |
| ·试验方法 | 第24-39页 |
| ·病料采集与处理 | 第24页 |
| ·病毒RNA的提取 | 第24页 |
| ·反转录(RT) | 第24-25页 |
| ·HEV阳性样品的检测 | 第25页 |
| ·HEV的分段克隆 | 第25-28页 |
| ·扩增产物或酶切产物的回收与纯化 | 第28页 |
| ·外源DNA片段与质粒载体的连接反应 | 第28-29页 |
| ·大肠杆菌DH5α感受态细胞的制备 | 第29页 |
| ·连接产物的转化 | 第29页 |
| ·质粒的小量制备 | 第29-30页 |
| ·重组质粒的鉴定 | 第30页 |
| ·HEV WH09株基因组序列分析 | 第30-31页 |
| ·ORF2的原核表达 | 第31-33页 |
| ·可溶性表达产物的提取 | 第33-34页 |
| ·表达产物的Western blot检测 | 第34-35页 |
| ·猪戊型肝炎病毒WH09株ORF2蛋白单克隆抗体的制备 | 第35-39页 |
| 第4章 结果与分析 | 第39-54页 |
| ·HEV WH09株全基因组序列分析 | 第39-47页 |
| ·HEV WH09株的发现 | 第39页 |
| ·HEV WH09株基因组各片段的克隆、测序及序列拼接 | 第39-42页 |
| ·HEV WH09株全基因组的结构分析 | 第42-47页 |
| ·HEV WH09株ORF2单克隆抗体的制备 | 第47-54页 |
| ·ORF2基因PCR扩增 | 第47-48页 |
| ·重组质粒pET28a-sORF2的鉴定 | 第48页 |
| ·重组蛋白的SDS-PAGE分析 | 第48-50页 |
| ·重组蛋白的Western blot检测 | 第50页 |
| ·间接ELISA筛选方法的建立 | 第50-51页 |
| ·杂交瘤细胞株的获得 | 第51页 |
| ·单抗特异性鉴定 | 第51-54页 |
| 第5章 讨论与结论 | 第54-57页 |
| ·讨论 | 第54-56页 |
| ·HEV阳性样品的选择 | 第54页 |
| ·HEV WH09株全基因组的扩增 | 第54页 |
| ·HEV WH09株全基因组的分析 | 第54-55页 |
| ·猪戊型肝炎病毒WH09株ORF2部分片段的原核表达 | 第55页 |
| ·猪戊型肝炎病毒WH09株ORF2部分片段单克隆抗体的制备 | 第55-56页 |
| ·结论 | 第56-57页 |
| 参考文献 | 第57-62页 |
| 致谢 | 第62页 |
