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猪新型细小病毒PHoV和PBoV诊断方法的建立、分子流行病学调查及基因组序列分析

摘要第1-8页
Abstract第8-11页
缩略语表第11-12页
第1章 文献综述第12-19页
   ·细小病毒病的流行现状第12页
   ·PPV的研究进展第12-14页
     ·PPV基因组结构第12-13页
     ·PPV的病原学研究第13页
     ·PPV的流行病学研究第13-14页
   ·PHoV的研究进展第14-15页
   ·猪博卡样病毒的研究进展第15-19页
     ·BPV基因组与分子结构第15-16页
     ·BPV的临床症状与致病机制第16页
     ·BPV的流行病学研究第16-17页
     ·CnMV的基因组与分子结构第17页
     ·CnMV的临床症状与致病机制第17-18页
     ·CnMV的诊断第18页
     ·CnMV的流行病学研究第18-19页
第2章 研究目的与意义第19-20页
第3章 材料与方法第20-28页
   ·试验材料第20-22页
     ·病料第20页
     ·毒株与菌株第20页
     ·载体第20页
     ·工具酶及主要试剂第20-21页
     ·培养基与抗生素及其配制第21页
     ·主要缓冲液与相关试剂及其配制第21页
     ·分子生物学分析软件第21-22页
   ·试验方法第22-28页
     ·病料采集与处理第22页
     ·病毒基因组的提取第22页
     ·PHoV PCR检测第22-23页
     ·PHoV的分段克隆第23页
     ·猪博卡样病毒的PCR检测第23-24页
     ·猪博卡样病毒的分段克隆第24-25页
     ·PCR产物的电泳检测第25页
     ·PCR产物或酶切产物回收与纯化第25页
     ·DNA片段与载体的连接第25页
     ·大肠杆菌感受态细胞的制备(氯化钙法)第25-26页
     ·连接产物的转化第26页
     ·质粒的制备与鉴定第26页
     ·重组质粒的测序第26-27页
     ·PHoV基因组序列分析第27页
     ·猪博卡样病毒基因组序列分析第27-28页
第4章 结果与分析第28-53页
   ·PHoV分子流行病学调查及基因组序列分析第28-40页
     ·PHoV引物设计第28页
     ·PCR扩增条件的优化第28页
     ·PCR的特异性试验第28-29页
     ·PCR的敏感性试验第29-30页
     ·临床样品中PHoV检测结果第30页
     ·PHoV阳性样品的分布第30-31页
     ·PHoV扩增产物序列测定和比较分析第31页
     ·PHoV基因组各片段的扩增结果第31-32页
     ·PHoV各克隆片段重组质粒的酶切鉴定结果第32-33页
     ·PHoV各阳性克隆的测序及拼接结果第33-34页
     ·PHoV基因组序列分析第34-40页
   ·猪博卡样病毒分子流行病学调查及基因组序列分析第40-53页
     ·猪博卡样病毒PCR检测方法的建立及临床检测第40-41页
     ·猪博卡样病毒阳性样品的分布第41页
     ·猪博卡样病毒扩增产物序列测定和比较分析第41页
     ·猪博卡样病毒基因组各片段的扩增第41-44页
     ·猪博卡样病毒各扩增片段的克隆鉴定、测序及序列拼接第44-45页
     ·猪博卡样病毒WH1株基因组分析第45-51页
     ·PBoV与其它猪博卡病毒的对比分析第51-53页
第5章 讨论与结论第53-58页
   ·讨论第53-57页
     ·PHoV诊断方法的建立第53页
     ·PHoV的流行病学调查及致病性第53-54页
     ·PHoV的基因组进化第54页
     ·猪博卡样病毒的流行病学调查及致病性第54-55页
     ·猪博卡样病毒全基因组的测定第55-56页
     ·猪博卡样病毒的分类第56-57页
     ·PBoV基因组结构分析第57页
   ·结论第57-58页
参考文献第58-66页
致谢第66-67页
附录第67页

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