| 摘要 | 第1-7页 |
| Abstract | 第7-13页 |
| 第一章 绪论 | 第13-19页 |
| ·黄萎病及其危害 | 第13页 |
| ·黄萎病菌侵染过程与致病机制 | 第13-14页 |
| ·大丽轮枝菌致病机理研究 | 第14-18页 |
| ·大丽轮枝菌致病相关基因 | 第14-15页 |
| ·分泌蛋白与黄萎病致病机理 | 第15-17页 |
| ·碳水化合物酶类与黄萎病致病机理 | 第17-18页 |
| ·本研究的目的和意义 | 第18-19页 |
| 第二章 高毒力大丽轮枝菌 VDG1 特异基因组区段 SCF73 的鉴定与分析 | 第19-27页 |
| ·实验材料 | 第19页 |
| ·实验方法 | 第19-21页 |
| ·特异基因组区段 SCF73 的分析 | 第19页 |
| ·大丽轮枝菌的培养 | 第19页 |
| ·大丽轮枝菌基因组提取 | 第19-20页 |
| ·特异基因组区段 SCF73 的 PCR 验证 | 第20-21页 |
| ·特异基因组区段 SCF73 上编码基因分析 | 第21页 |
| ·特异基因组区段 SCF73 上编码基因的功能注释 | 第21页 |
| ·特异基因组区段 SCF73 上基因编码蛋白的分泌特性预测 | 第21页 |
| ·实验结果 | 第21-26页 |
| ·高毒力菌株 VDG1 特异基因组区段 SCF73 的筛选与 PCR 验证 | 第21-22页 |
| ·特异基因组区段 SCF73 上编码基因分析 | 第22-24页 |
| ·特异基因组区段 SCF73 上编码基因功能注释 | 第24页 |
| ·特异基因组区段 SCF73 上特异基因编码蛋白的分泌特性预测 | 第24-26页 |
| ·讨论 | 第26-27页 |
| 第三章 大丽轮枝菌 VDG1 特异分泌蛋白基因 VdSSP1 的克隆与表达分析 | 第27-42页 |
| ·实验材料 | 第27页 |
| ·菌株与棉花材料 | 第27页 |
| ·实验试剂与仪器 | 第27页 |
| ·实验方法 | 第27-37页 |
| ·大丽轮枝菌培养与诱导 | 第27-28页 |
| ·大丽轮枝菌侵染寄主棉花 | 第28页 |
| ·大丽轮枝菌 DNA 提取 | 第28页 |
| ·RNA 提取 | 第28-29页 |
| ·cDNA 合成与表达检测 | 第29-31页 |
| ·cDNA 末端快速克隆 | 第31-34页 |
| ·PCR 产物回收、克隆、转化、筛选和测序 | 第34-35页 |
| ·VdSSP1 全长基因扩增 | 第35-36页 |
| ·VdSSP1 基因生物信息学分析 | 第36-37页 |
| ·实验结果 | 第37-40页 |
| ·VdSSP1 表达分析 | 第37-38页 |
| ·VdSSP1 基因克隆 | 第38-39页 |
| ·VdSSP1 基因基本特性分析 | 第39-40页 |
| ·讨论 | 第40-42页 |
| 第四章 大丽轮枝菌 VdSSP1 基因功能初步研究 | 第42-73页 |
| ·实验材料 | 第42-44页 |
| ·质粒和菌株 | 第42页 |
| ·抗生素及使用浓度 | 第42-43页 |
| ·培养基及培养条件 | 第43-44页 |
| ·实验方法 | 第44-60页 |
| ·VdSSP1 信号肽重组载体的构建 | 第44-45页 |
| ·重组载体的酵母转化 | 第45-46页 |
| ·信号肽活性测定 | 第46-47页 |
| ·基因敲除载体的构建 | 第47-50页 |
| ·重组质粒导入农杆菌 | 第50-51页 |
| ·农杆菌介导的大丽轮枝菌遗传转化 | 第51页 |
| ·大丽轮枝菌遗传转化子单孢纯化与分子鉴定 | 第51-53页 |
| ·功能互补载体构建 | 第53-58页 |
| ·大丽轮枝菌功能互补转化子筛选与鉴定 | 第58页 |
| ·生长表型鉴定 | 第58-59页 |
| ·致病力测定 | 第59-60页 |
| ·实验结果 | 第60-70页 |
| ·VdSSP1 信号肽活性测定 | 第60-61页 |
| ·基因敲除质粒的构建 | 第61-62页 |
| ·基因敲除转化子的筛选鉴定 | 第62-64页 |
| ·功能互补载体的构建 | 第64-67页 |
| ·功能互补转化子的筛选鉴定 | 第67页 |
| ·突变株与互补转化子生长表型鉴定 | 第67-69页 |
| ·突变株致病力测定 | 第69-70页 |
| ·讨论 | 第70-73页 |
| 第五章 全文结论 | 第73-74页 |
| 参考文献 | 第74-82页 |
| 附录Ⅰ | 第82-84页 |
| 附录Ⅱ | 第84-85页 |
| 致谢 | 第85-86页 |
| 作者简历 | 第86页 |
