摘要 | 第1-7页 |
Abstract | 第7-12页 |
第一章 绪论 | 第12-21页 |
·猪瘟病毒 | 第12-13页 |
·猪瘟病毒简介 | 第12页 |
·猪瘟病毒结构蛋白及功能 | 第12-13页 |
·ERK 信号通路及 MEK2 的结构和功能 | 第13-16页 |
·ERK 信号通路 | 第13-15页 |
·ERK 信号通路与免疫应答 | 第15页 |
·ERK 信号通路与病毒复制 | 第15-16页 |
·丝裂原激活的蛋白激酶激酶 2 | 第16页 |
·蛋白质相互作用的研究方法 | 第16-19页 |
·双杂交技术 | 第16-17页 |
·噬菌体展示技术 | 第17页 |
·双分子荧光互补 | 第17-18页 |
·荧光共振能量转移 | 第18页 |
·免疫共沉淀 | 第18页 |
·Pulldown 试验 | 第18页 |
·表面等离子共振 | 第18-19页 |
·激光共聚焦成像 | 第19页 |
·研究目的和意义 | 第19-21页 |
第二章 MEK2 与猪瘟病毒 E2 蛋白相互作用及其对猪瘟病毒复制的调控作用 | 第21-38页 |
·材料和方法 | 第21-29页 |
·细胞、菌株、文库、质粒和毒株 | 第21页 |
·主要试剂 | 第21页 |
·基因扩增与克隆 | 第21-22页 |
·酵母双杂交筛选 | 第22-23页 |
·酵母共转化试验 | 第23页 |
·MEK2 的原核表达 | 第23-24页 |
·抗 MEK2 多克隆抗体的制备 | 第24页 |
·电洗脱法纯化蛋白质 | 第24-25页 |
·GST pulldown 试验 | 第25-26页 |
·双分子荧光互补试验 | 第26页 |
·激光共聚焦试验 | 第26页 |
·Western blot | 第26-27页 |
·细胞毒性试验 | 第27页 |
·MEK1/2 抑制试验 | 第27-28页 |
·荧光定量 RT-PCR | 第28页 |
·CSFV 滴度测定 | 第28页 |
·IFN-β双荧光素酶报告系统试验 | 第28-29页 |
·数据分析 | 第29页 |
·结果 | 第29-36页 |
·MEK2 与 E2 存在相互作用 | 第29-31页 |
·C 端为 MEK2 与 E2 相互作用的关键区域 | 第31-32页 |
·CSFV 激活 MEK/ERK 通路并促进 MEK2 表达 | 第32-33页 |
·阻断 MEK/ERK 通路抑制 CSFV 复制 | 第33-35页 |
·过表达 MEK2 抑制 IFN-β表达 | 第35-36页 |
·讨论 | 第36-38页 |
第三章 结论 | 第38-39页 |
参考文献 | 第39-46页 |
致谢 | 第46-47页 |
作者简历 | 第47页 |