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长叶红砂RtF3H1和RtF3H2基因的克隆及原核表达分析

摘要第1-10页
ABSTRACT第10-12页
第一章 文献综述第12-20页
   ·黄酮类化合物的研究进展第12-14页
     ·植物黄酮类化合物的基本合成途径第12页
     ·植物黄酮类化合物的功能第12-14页
     ·黄酮类化合物在植物抵抗非生物胁迫中的作用第14页
   ·黄烷酮-3-羟基转移酶(F3H)的研究进展第14-16页
     ·F3H的生物学功能第14-15页
     ·F3H与植物抵抗生物及非生物胁迫的关系第15页
     ·F3H基因的表达调控第15-16页
   ·长叶红砂的研究进展第16-18页
     ·长叶红砂的分布区概况第16-17页
     ·长叶红砂的形态结构特征第17页
     ·长叶红砂的生理特征第17-18页
     ·长叶红砂的耐盐机理研究第18页
   ·研究背景及意义第18-20页
第二章 长叶红砂RtF3H1和RtF3H2基因的克隆及序列分析第20-31页
   ·实验材料第20-21页
     ·植物材料第20页
     ·实验试剂第20页
     ·引物第20-21页
   ·实验方法第21-24页
     ·长叶红砂幼苗的培养第21页
     ·长叶红砂RNA的提取第21页
     ·长叶红砂RNA的纯化第21-22页
     ·长叶红砂cDNA第一链合成第22页
     ·长叶红砂F3H1和F3H2 cDNA片段扩增第22-23页
     ·RtF3H1和RtF3H2 cDNA的3'RACE扩增第23页
     ·RtF3H1和RtF3H2 cDNA的5'RACE扩增第23页
     ·RtF3H1和RtF3H2蛋白序列与结构分析第23-24页
   ·实验结果与分析第24-29页
     ·RtF3H1和RtF3H2 cDNA片段扩增第24页
     ·RtF3H1和RtF3H2 cDNA的3'RACE扩增第24-25页
     ·RtF3H1和RtF3H2 cDNA的5'RACE扩增第25-26页
     ·RtF3H1和RtF3H2 cDNA全长序列扩增第26-27页
     ·RtF3H1和RtF3H2蛋白的序列分析第27-28页
     ·RtF3H1和RtF3H2蛋白结构分析第28-29页
   ·讨论第29-30页
   ·小结第30-31页
第三章 长叶红砂RtF3H1和RtF3H2基因表达分析第31-36页
   ·实验材料第31-32页
     ·植物材料第31页
     ·实验试剂第31页
     ·实验试剂的配制第31页
     ·引物第31-32页
   ·实验方法第32-33页
     ·长叶红砂非生物胁迫处理第32页
     ·长叶红砂RNA提取和纯化第32页
     ·长叶红砂cDNA第一链合成第32页
     ·RtF3H1和RtF3H2半定量RT-PCR分析第32-33页
   ·实验结果和分析第33-34页
     ·长叶红砂RNA的提取第33页
     ·RtF3H1和RtF3H2基因表达的组织特异性分析第33-34页
     ·RtF3H1和RtF3H2基因在非生物胁迫下的半定量RT-PCR分析第34页
   ·讨论第34-35页
   ·小结第35-36页
第四章 长叶红砂RtF3H1和RtF3H2基因的原核表达分析第36-47页
   ·实验材料第36-37页
     ·菌种和质粒第36页
     ·实验试剂及配制第36-37页
     ·引物第37页
   ·实验方法第37-40页
     ·RtF3H1和RtF3H2基因的TA克隆第37-38页
     ·RtF3H1和RtF3H2目的基因片段的双酶切第38页
     ·pGEX-4T1表达载体的双酶切第38-39页
     ·RtF3H1和RtF3H2基因表达载体的构建第39页
     ·RtF3H1和R-3H2蛋白的诱导表达第39-40页
     ·RtF3H1和RtF3H2基因表达影响大肠杆菌在非生物胁迫下的存活率第40页
   ·实验结果和分析第40-45页
     ·RtF3H1和RtF3H2编码区的克隆第40-41页
     ·RtF3H1和RtF3H2基因原核表达载体的构建第41页
     ·pGEX-4T1-RtF3H1和pGEX-4T1-RtF3H2重组载体的鉴定第41-42页
     ·RtF3H1和RtF3H2蛋白的诱导表达第42-43页
     ·RtF3H1和RtF3H2基因影响大肠杆菌在盐胁迫下的存活率第43页
     ·RtF3H1和RtF3H2基因影响大肠杆菌在干旱胁迫下的存活率第43-44页
     ·RtF3H1和RtF3H2基因影响大肠杆菌在紫外和激素胁迫下的存活率第44-45页
   ·讨论第45-46页
   ·小结第46-47页
第五章 结论第47-48页
参考文献第48-57页
致谢第57页

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