| 摘要 | 第1-6页 |
| ABSTRACT | 第6-8页 |
| 目录 | 第8-12页 |
| 第一章 文献综述 | 第12-19页 |
| ·金黄色葡萄球菌乳腺炎 | 第12-13页 |
| ·金黄色葡萄球菌病原学 | 第12页 |
| ·金黄色葡萄球菌乳腺炎研究进展 | 第12-13页 |
| ·乳腺的免疫防御系统 | 第13-15页 |
| ·乳腺组织结构 | 第13页 |
| ·非特异性免疫应答 | 第13-14页 |
| ·细胞介导的免疫应答 | 第14-15页 |
| ·抗体介导的免疫应答 | 第15页 |
| ·小鼠乳腺炎模型在乳腺炎研究中的应用 | 第15-16页 |
| ·Th17细胞以及IL-17的研究进展 | 第16-19页 |
| ·Th17细胞的发现与发生 | 第16页 |
| ·Th17细胞的生物学功能 | 第16-17页 |
| ·IL-17在病原感染中的作用 | 第17-19页 |
| 第二章 金黄色葡萄球菌诱导小鼠乳腺炎模型的建立 | 第19-30页 |
| ·材料 | 第19-20页 |
| ·动物 | 第19页 |
| ·菌株 | 第19页 |
| ·主要试剂耗材 | 第19-20页 |
| ·溶液配制 | 第20页 |
| ·主要仪器设备 | 第20页 |
| ·方法 | 第20-25页 |
| ·金黄色葡萄球菌诱导小鼠乳腺炎模型的建立 | 第20-22页 |
| ·金黄色葡萄球菌S56菌株的培养 | 第20-21页 |
| ·BALB/c小鼠的分组与处理 | 第21页 |
| ·金黄色葡萄球菌S56感染方法 | 第21页 |
| ·处理后标本收集 | 第21-22页 |
| ·金黄色葡萄球菌诱导小鼠乳腺炎模型的鉴定 | 第22页 |
| ·表观症状检测 | 第22页 |
| ·组织学检测 | 第22页 |
| ·小鼠乳腺炎模型中乳腺组织炎性因子的检测 | 第22-25页 |
| ·小鼠乳腺组织总RNA的提取与第一链cDNA的合成 | 第22-23页 |
| ·Real-time PCR检测小鼠乳腺组织中炎性因子表达 | 第23-25页 |
| ·统计学分析方法 | 第25页 |
| ·结果 | 第25-29页 |
| ·金黄色葡萄球菌生长曲线的测定 | 第25页 |
| ·小鼠乳腺炎模型临床观察与病理切片鉴定 | 第25-28页 |
| ·Real-time PCR检测小鼠乳腺组织炎性因子表达 | 第28-29页 |
| ·讨论 | 第29-30页 |
| 第三章 Th17/IL-17在金黄色葡萄球菌乳腺感染中的变化以及IL-17功能初探 | 第30-43页 |
| ·材料 | 第30-32页 |
| ·动物 | 第30页 |
| ·菌株 | 第30-31页 |
| ·主要试剂及耗材 | 第31页 |
| ·主要溶液配制 | 第31页 |
| ·主要仪器设备 | 第31-32页 |
| ·方法 | 第32-35页 |
| ·流式细胞仪检测小鼠乳腺炎模型中脾脏Th细胞亚群动态变化 | 第32-33页 |
| ·小鼠脾脏淋巴细胞的分离培养 | 第32页 |
| ·小鼠脾脏T细胞表面分子与胞内因子染色 | 第32-33页 |
| ·Real-time PCR检测小鼠乳腺组织中Th细胞相关细胞因子表达 | 第33-34页 |
| ·ELISA检测小鼠乳腺组织中IL17/23表达量 | 第34页 |
| ·金黄色葡萄球菌在小鼠乳腺组织中定植量检测 | 第34页 |
| ·统计学分析方法 | 第34-35页 |
| ·结果 | 第35-41页 |
| ·金黄色葡萄球菌感染小鼠乳腺炎中脾脏Th细胞亚群变化 | 第35-37页 |
| ·小鼠乳腺组织中Th细胞相关细胞因子检测 | 第37-39页 |
| ·ELISA检测IL-17/23在小鼠金黄色葡萄球菌乳腺炎中的动态变化 | 第39-40页 |
| ·金黄色葡萄球菌在小鼠乳腺组织中定植量检测 | 第40-41页 |
| ·讨论 | 第41-43页 |
| 第四章 牛IL-17真核表达载体的构建及体外表达IL-17对炎性因子的作用初探 | 第43-57页 |
| ·材料 | 第43-45页 |
| ·动物 | 第43页 |
| ·细胞 | 第43-44页 |
| ·菌株 | 第44页 |
| ·主要试剂及耗材 | 第44页 |
| ·主要溶液配制 | 第44-45页 |
| ·主要仪器设备 | 第45页 |
| ·方法 | 第45-50页 |
| ·牛IL-17真核表达载体的构建 | 第45-47页 |
| ·牛IL-17基因引物设计 | 第45-46页 |
| ·牛IL-17基因克隆 | 第46页 |
| ·PCR扩增产物的克隆和鉴定 | 第46页 |
| ·pEGFP-N3-bIL-17重组真核表达载体的构建 | 第46-47页 |
| ·pEGFP-N3-bIL-17重组真核表达载体的鉴定 | 第47页 |
| ·真核表达载体pEGFP-N3-bIL-17转染牛乳腺上皮细胞 | 第47页 |
| ·RT-PCR法检测重组质粒转染牛乳腺上皮细胞后IL-17基因的表达 | 第47页 |
| ·ELISA检测重组质粒转染牛乳腺上皮细胞后IL-17基因的表达 | 第47-48页 |
| ·Realtime-PCR检测转染前后金黄色葡萄球菌侵染牛乳腺上皮细胞中的炎性因子表达 | 第48-50页 |
| ·细胞培养 | 第48页 |
| ·金黄色葡萄球菌侵染细胞试验 | 第48页 |
| ·金黄色葡萄球菌侵染牛乳腺上皮细胞总RNA提取与cDNA的合成 | 第48页 |
| ·Real-time PCR检测金黄色葡萄球菌侵染细胞模型中炎性因子表达 | 第48-50页 |
| ·统计学分析方法 | 第50页 |
| ·结果 | 第50-56页 |
| ·bIL-17基因片段扩增 | 第50-51页 |
| ·bIL-17基因片段与PMD19-T质粒连接和重组质粒的鉴定 | 第51页 |
| ·重组质粒pEGFP-N3-bIL-17酶切鉴定 | 第51-52页 |
| ·真核表达载体pEGFP-N3-bIL-17转染牛乳腺上皮细胞 | 第52-53页 |
| ·RT-PCR鉴定重组质粒pEGFP-N3-bIL-17在牛乳腺上皮细胞中的表达 | 第53页 |
| ·ELISA鉴定重组质粒pEGFP-N3-bIL-17在牛乳腺上皮细胞中的表达 | 第53-54页 |
| ·金黄色葡萄球菌侵染牛乳腺上皮细胞模型的建立 | 第54-55页 |
| ·Realtime-PCR检测转染前后金黄色葡萄球菌侵染牛乳腺上皮细胞中的炎性因子表达 | 第55-56页 |
| ·讨论 | 第56-57页 |
| 结论 | 第57-58页 |
| 致谢 | 第58-59页 |
| 硕士期间发表学术论文 | 第59-60页 |
| 参考文献 | 第60-66页 |
