摘要 | 第1-8页 |
Abstract | 第8-11页 |
第一章 文献综述 | 第11-19页 |
1 体细胞重编程的方法 | 第11-18页 |
·体细胞核移植 | 第11-12页 |
·细胞融合 | 第12-13页 |
·限定性因子诱导 | 第13-14页 |
·细胞提取液诱导 | 第14-18页 |
2 体细胞重编程的前景与展望 | 第18-19页 |
·应用前景 | 第18页 |
·展望 | 第18-19页 |
第二章 试验研究 | 第19-41页 |
引言 | 第19-20页 |
试验一:不同性别的MEFs分离培养 | 第20-26页 |
1 材料 | 第20-22页 |
·实验动物 | 第20页 |
·实验仪器与设备 | 第20-21页 |
·药品与试剂 | 第21页 |
·主要溶液配制 | 第21-22页 |
2 方法 | 第22-23页 |
·不同性别13.5天小鼠胚胎的选取 | 第22页 |
·MEFs的分离培养 | 第22-23页 |
·细胞DNA的提取 | 第23页 |
·PCR反应的引物序列及反应体系 | 第23页 |
3 结果与分析 | 第23-25页 |
·不同性别胚胎的分离 | 第23页 |
·MEFs性别的验证 | 第23-24页 |
·不同性别MEFs的生长情况 | 第24-25页 |
4 讨论 | 第25页 |
5 小结 | 第25-26页 |
试验二:ESCs的分离培养与性别鉴定 | 第26-33页 |
1 材料 | 第26-27页 |
·实验动物 | 第26页 |
·实验仪器与设备 | 第26页 |
·药品与试剂 | 第26页 |
·溶液配制 | 第26-27页 |
2 方法 | 第27-30页 |
·囊胚的收集与培养 | 第27页 |
·ESCs的分离培养与性别鉴定 | 第27-28页 |
·小鼠ESCs的鉴定 | 第28-30页 |
3 结果与分析 | 第30-32页 |
·囊胚的培养 | 第30页 |
·内细胞团的分离与性别鉴定 | 第30-31页 |
·ESCs的鉴定 | 第31-32页 |
4 讨论 | 第32页 |
5 小结 | 第32-33页 |
试验三:共孵育重编程逆转体系中MEFs的优化选择和渗透化处理方式研究 | 第33-41页 |
1 材料 | 第33-34页 |
·实验动物 | 第33页 |
·实验仪器与设备 | 第33页 |
·药品与试剂 | 第33-34页 |
·溶液配制 | 第34页 |
2 方法 | 第34-36页 |
·雄性ESCs提取液的制备 | 第34页 |
·雌性MEFs的渗透化处理 | 第34-35页 |
·雌性MEFs与雄性ESCs提取液共孵育 | 第35页 |
·重编程所得多能干细胞的鉴定 | 第35-36页 |
3 结果与分析 | 第36-37页 |
·雄性ESCs提取液的制备 | 第36页 |
·雌性MEFs的渗透化处理 | 第36页 |
·雌性MEFs与雄性ESCs提取液共孵育 | 第36页 |
·重编程所得多能干细胞的鉴定 | 第36-37页 |
4 讨论 | 第37-39页 |
·雄性ESCs提取液的制备 | 第37页 |
·雌性MEFs的渗透化处理 | 第37-38页 |
·ESCs提取液介导的体细胞重编程 | 第38页 |
·TSA和5-Aza-dC对体细胞重编程效率的影响 | 第38页 |
·重编程所得多能干细胞的来源鉴定 | 第38-39页 |
5 小结 | 第39-41页 |
结论 | 第41-43页 |
参考文献 | 第43-51页 |
附录1 几种细胞培养液的成分表 | 第51-52页 |
附录2 縮略词表 | 第52-53页 |
致谢 | 第53页 |