| 摘要 | 第1-9页 |
| ABSTRACT | 第9-11页 |
| 英文缩写词表 | 第11-12页 |
| 第一部分 文献综述 | 第12-48页 |
| 第一章 Mx蛋白的研究进展 | 第12-26页 |
| 1 Mx蛋白的发现和命名 | 第12页 |
| 2 Mx蛋白家族成员 | 第12-13页 |
| 3 Mx蛋白的结构 | 第13-15页 |
| 4 Mx蛋白的抗病毒活性 | 第15-17页 |
| 5 Mx蛋白的细胞内定位与抗病机理 | 第17-18页 |
| ·主要Mx蛋白的细胞内定位 | 第17页 |
| ·Mx蛋白的抗病毒机理 | 第17-18页 |
| 6 Mx蛋白的应用前景 | 第18-20页 |
| 参考文献 | 第20-26页 |
| 第二章 猪繁殖与呼吸综合征病毒的研究进展 | 第26-48页 |
| 1 PRRS病原的分类地位及理化特性 | 第26-27页 |
| 2 病毒的基因组结构和复制 | 第27-28页 |
| 3. 病毒基因组编码的蛋白 | 第28-33页 |
| ·主要结构蛋白 | 第29-32页 |
| ·次要结构蛋白 | 第32-33页 |
| 4 PRRS诊断方法研究进展 | 第33-39页 |
| ·病毒分离 | 第34页 |
| ·抗原检测 | 第34-35页 |
| ·血清学试验检测抗体 | 第35-36页 |
| ·酶联免疫吸附试验(ELISA) | 第35页 |
| ·血清中和试验(SN) | 第35-36页 |
| ·免疫过氧化物酶单层试验(IPMA) | 第36页 |
| ·间接荧光抗体试验(IFA) | 第36页 |
| ·分子生物学诊断 | 第36-39页 |
| ·原位杂交技术(ISH) | 第37页 |
| ·RT-PCR技术 | 第37-39页 |
| 参考文献 | 第39-48页 |
| 第二部分课题研究 | 第48-80页 |
| 第三章 猪Mx1基因及人MxA基因的克隆和表达 | 第48-66页 |
| 摘要 | 第48-50页 |
| 1 材料与方法 | 第50-56页 |
| ·材料 | 第50-52页 |
| ·菌株、质粒和细胞 | 第50页 |
| ·主要试剂 | 第50页 |
| ·主要仪器 | 第50页 |
| ·试剂和培养基 | 第50-52页 |
| ·方法 | 第52页 |
| ·猪外周血单核淋巴细胞的分离和培养 | 第52页 |
| ·猪外周血单核淋巴细胞总RNA的提取 | 第52页 |
| ·真核表达载体pCDNA3.1-HA-Mx1的构建 | 第52-54页 |
| ·真核表达质粒的构建 | 第54页 |
| ·引物设计与合成 | 第54页 |
| ·PCR扩增 | 第54页 |
| ·真核表达 | 第54-56页 |
| ·质粒抽提 | 第55页 |
| ·细胞培养 | 第55页 |
| ·质粒转染细胞 | 第55页 |
| ·选择最佳转染DNA与转染试剂PEI比例 | 第55-56页 |
| ·Western Blotting检测Mx蛋白在细胞中的表达 | 第56页 |
| 2 结果和分析 | 第56-60页 |
| ·PCR扩增产物 | 第56-57页 |
| ·重组质粒酶切鉴定结果 | 第57-59页 |
| ·Western Blotting鉴定Mx蛋白在细胞内的表达 | 第59-60页 |
| 3 讨论 | 第60-63页 |
| 参考文献 | 第63-64页 |
| ABSTRACT | 第64-66页 |
| 第四章 Mx的抗PRRSV活性测定 | 第66-80页 |
| 摘要 | 第66页 |
| 1. 材料 | 第66-67页 |
| ·细胞和病毒 | 第66页 |
| ·培养基 | 第66页 |
| ·主要试剂、材料和仪器 | 第66-67页 |
| 2 实验方法 | 第67-73页 |
| ·Marc145细胞的培养 | 第67页 |
| ·PRRSV的培养增殖 | 第67页 |
| ·Karber法测定PRRSV半数组织感染量(TCID_(50)) | 第67-68页 |
| ·24 孔细胞板质粒转染方案 | 第68-69页 |
| ·24 孔细胞板质粒转染,感染PRRSV实验方案 | 第69页 |
| ·转染后PRRSV TCID_(50)的测定 | 第69-70页 |
| ·病毒滴度测定 | 第70页 |
| ·间接免疫荧光试验(IFA) | 第70-71页 |
| ·实时定量PCR检测PRRSV病毒mRNA水平 | 第71-73页 |
| ·PCR引物的设计 | 第71页 |
| ·RNA提取 | 第71页 |
| ·cDNA合成 | 第71-72页 |
| ·SYBR Green实时定量PCR检测 | 第72-73页 |
| 3. 实验结果 | 第73-75页 |
| ·转染后PRRSV TCID_(50)的测定 | 第73页 |
| ·间接免疫荧光试验(IFA) | 第73-74页 |
| ·荧光实时定量PCR检测PRRSV病毒mRNA水平 | 第74-75页 |
| 4. 讨论 | 第75-77页 |
| 参考文献 | 第77-78页 |
| ABSTRACT | 第78-80页 |
| 全文总结 | 第80-82页 |
| 致谢 | 第82页 |
