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食品中苏丹红Ⅰ的免疫学快速检测方法研究

摘要第1-6页
英文摘要第6-12页
第1章 绪论第12-20页
   ·食品中苏丹红检测方法的研究进展第12-16页
     ·苏丹红染料的性质及危害第12-13页
     ·食品中苏丹红的检测方法第13-16页
   ·免疫学检测技术及其应用第16-18页
     ·免疫胶体金技术第16-17页
     ·酶联免疫技术第17-18页
   ·本研究的目的和意义第18-20页
第2章 苏丹红I 多克隆抗体的制备及鉴定第20-38页
   ·实验材料与仪器第20页
   ·苏丹红I 多克隆抗体的制备第20-23页
     ·苏丹红I 衍生物- 明胶全抗原的合成第20-22页
     ·抗苏丹红I 多克隆抗体的制备第22-23页
   ·苏丹红I 多克隆抗体的纯化第23-25页
     ·辛酸硫酸铵法粗纯化苏丹红I 多克隆抗体第23-24页
     ·亲和层析法纯化苏丹红I 多克隆抗体第24-25页
   ·SDS- PAGE 测定IgG 纯度第25-27页
     ·样品的制备第25页
     ·分离胶及浓缩胶的制备第25-27页
 2. 5 抗苏丹红I抗体浓度的测定第27-28页
     ·BCA 法测定蛋白质浓度第27页
     ·紫外分光光度计法测定IgG 浓度第27-28页
   ·结果与讨论第28-37页
     ·苏丹红I 衍生物及完全抗原的制备第28-33页
     ·苏丹红I- 明胶完全抗原的合成结果第33-34页
     ·苏丹红I- 明胶抗体亲和层析纯化第34-35页
     ·SDS- PAGE 测定IgG 的纯度第35-36页
     ·抗体浓度的测定第36-37页
   ·讨论第37-38页
第3章 苏丹红I 竞争ELISA 检测方法的建立第38-54页
   ·抗苏丹红I 抗体效价的测定第38-40页
     ·包被抗原最佳浓度的选择第38-39页
     ·最佳封闭液的选择第39页
     ·抗原、抗体最佳作用时间的选择第39页
     ·最佳底物反应时间的选择第39页
     ·特异性抗体效价测定第39-40页
   ·抗苏丹红I 抗体亲和力的测定第40-41页
   ·苏丹红染料交叉反应率的测定第41-42页
   ·间接竞争ELIS A 检测方法的建立第42-45页
     ·酶标记苏丹红I 抗原的制备第42-43页
     ·间接竞争ELIS A 标准曲线的绘制第43页
     ·待测样品的处理及加标回收率测定第43-45页
   ·结果与分析第45-51页
     ·ELIS A 法测定抗体效价第45-48页
     ·抗苏丹红I 特异性抗体亲和力的测定第48-49页
     ·苏丹红I 抗体的交叉反应率测定第49-50页
     ·苏丹红ELISA检测方法的建立第50-51页
   ·讨论第51-54页
     ·固相载体的选择第51-52页
     ·包被和封闭操作要点第52页
     ·洗涤第52-53页
     ·待测样品的处理第53页
     ·酶、酶结合物及底物对ELIS A 的影响第53-54页
第4章 胶体金免疫层析试纸的制备及检测第54-73页
   ·主要材料与仪器第54页
   ·胶体金溶液的制备第54-56页
     ·玻璃器皿的清洗第54-55页
     ·胶体金溶液的制备第55-56页
     ·胶体金质量的鉴定第56页
   ·苏丹红I –BSA 金标抗原的制备第56-59页
     ·胶体金溶液和待标记抗原的准备第57页
     ·最佳标记抗体用量的选择第57-58页
     ·胶体金标记苏丹红I-BSA抗原第58页
     ·胶体金蛋白结合物的质量鉴定第58-59页
   ·免疫金试纸条的制备第59-61页
     ·硝酸纤维素膜的选择第59页
     ·NC 膜上包被抗体的浓度选择第59页
     ·金标抗原用量的选择第59-60页
     ·试纸条的组装第60-61页
   ·免疫层析试纸的测试第61-62页
   ·试纸条稳定性及重复性试验第62页
   ·试纸条交叉反应试验第62-63页
   ·ELIS A 、免疫层析试纸、HPLC 三种方法的比较第63页
   ·结果与分析第63-71页
     ·稳定胶体金最适抗原标记量的选择第63页
     ·硝酸纤维素膜的选择第63-64页
     ·NC 膜上T、C 抗体浓度的选择第64-65页
     ·金标抗原用量的选择第65-66页
     ·试纸条测试与分析第66-67页
     ·稳定性与重复性实验第67-68页
     ·试纸条交叉反应试验第68页
     ·ELIS A 、试纸条与HPLC 测定结果比较第68-70页
     ·实际样品测定第70-71页
   ·讨论第71-73页
第5章 结论第73-74页
参考文献第74-80页
致谢第80-81页
攻读学位期间的研究成果第81-82页

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