摘要 | 第1-6页 |
英文摘要 | 第6-12页 |
第1章 绪论 | 第12-20页 |
·食品中苏丹红检测方法的研究进展 | 第12-16页 |
·苏丹红染料的性质及危害 | 第12-13页 |
·食品中苏丹红的检测方法 | 第13-16页 |
·免疫学检测技术及其应用 | 第16-18页 |
·免疫胶体金技术 | 第16-17页 |
·酶联免疫技术 | 第17-18页 |
·本研究的目的和意义 | 第18-20页 |
第2章 苏丹红I 多克隆抗体的制备及鉴定 | 第20-38页 |
·实验材料与仪器 | 第20页 |
·苏丹红I 多克隆抗体的制备 | 第20-23页 |
·苏丹红I 衍生物- 明胶全抗原的合成 | 第20-22页 |
·抗苏丹红I 多克隆抗体的制备 | 第22-23页 |
·苏丹红I 多克隆抗体的纯化 | 第23-25页 |
·辛酸硫酸铵法粗纯化苏丹红I 多克隆抗体 | 第23-24页 |
·亲和层析法纯化苏丹红I 多克隆抗体 | 第24-25页 |
·SDS- PAGE 测定IgG 纯度 | 第25-27页 |
·样品的制备 | 第25页 |
·分离胶及浓缩胶的制备 | 第25-27页 |
2. 5 抗苏丹红I抗体浓度的测定 | 第27-28页 |
·BCA 法测定蛋白质浓度 | 第27页 |
·紫外分光光度计法测定IgG 浓度 | 第27-28页 |
·结果与讨论 | 第28-37页 |
·苏丹红I 衍生物及完全抗原的制备 | 第28-33页 |
·苏丹红I- 明胶完全抗原的合成结果 | 第33-34页 |
·苏丹红I- 明胶抗体亲和层析纯化 | 第34-35页 |
·SDS- PAGE 测定IgG 的纯度 | 第35-36页 |
·抗体浓度的测定 | 第36-37页 |
·讨论 | 第37-38页 |
第3章 苏丹红I 竞争ELISA 检测方法的建立 | 第38-54页 |
·抗苏丹红I 抗体效价的测定 | 第38-40页 |
·包被抗原最佳浓度的选择 | 第38-39页 |
·最佳封闭液的选择 | 第39页 |
·抗原、抗体最佳作用时间的选择 | 第39页 |
·最佳底物反应时间的选择 | 第39页 |
·特异性抗体效价测定 | 第39-40页 |
·抗苏丹红I 抗体亲和力的测定 | 第40-41页 |
·苏丹红染料交叉反应率的测定 | 第41-42页 |
·间接竞争ELIS A 检测方法的建立 | 第42-45页 |
·酶标记苏丹红I 抗原的制备 | 第42-43页 |
·间接竞争ELIS A 标准曲线的绘制 | 第43页 |
·待测样品的处理及加标回收率测定 | 第43-45页 |
·结果与分析 | 第45-51页 |
·ELIS A 法测定抗体效价 | 第45-48页 |
·抗苏丹红I 特异性抗体亲和力的测定 | 第48-49页 |
·苏丹红I 抗体的交叉反应率测定 | 第49-50页 |
·苏丹红ELISA检测方法的建立 | 第50-51页 |
·讨论 | 第51-54页 |
·固相载体的选择 | 第51-52页 |
·包被和封闭操作要点 | 第52页 |
·洗涤 | 第52-53页 |
·待测样品的处理 | 第53页 |
·酶、酶结合物及底物对ELIS A 的影响 | 第53-54页 |
第4章 胶体金免疫层析试纸的制备及检测 | 第54-73页 |
·主要材料与仪器 | 第54页 |
·胶体金溶液的制备 | 第54-56页 |
·玻璃器皿的清洗 | 第54-55页 |
·胶体金溶液的制备 | 第55-56页 |
·胶体金质量的鉴定 | 第56页 |
·苏丹红I –BSA 金标抗原的制备 | 第56-59页 |
·胶体金溶液和待标记抗原的准备 | 第57页 |
·最佳标记抗体用量的选择 | 第57-58页 |
·胶体金标记苏丹红I-BSA抗原 | 第58页 |
·胶体金蛋白结合物的质量鉴定 | 第58-59页 |
·免疫金试纸条的制备 | 第59-61页 |
·硝酸纤维素膜的选择 | 第59页 |
·NC 膜上包被抗体的浓度选择 | 第59页 |
·金标抗原用量的选择 | 第59-60页 |
·试纸条的组装 | 第60-61页 |
·免疫层析试纸的测试 | 第61-62页 |
·试纸条稳定性及重复性试验 | 第62页 |
·试纸条交叉反应试验 | 第62-63页 |
·ELIS A 、免疫层析试纸、HPLC 三种方法的比较 | 第63页 |
·结果与分析 | 第63-71页 |
·稳定胶体金最适抗原标记量的选择 | 第63页 |
·硝酸纤维素膜的选择 | 第63-64页 |
·NC 膜上T、C 抗体浓度的选择 | 第64-65页 |
·金标抗原用量的选择 | 第65-66页 |
·试纸条测试与分析 | 第66-67页 |
·稳定性与重复性实验 | 第67-68页 |
·试纸条交叉反应试验 | 第68页 |
·ELIS A 、试纸条与HPLC 测定结果比较 | 第68-70页 |
·实际样品测定 | 第70-71页 |
·讨论 | 第71-73页 |
第5章 结论 | 第73-74页 |
参考文献 | 第74-80页 |
致谢 | 第80-81页 |
攻读学位期间的研究成果 | 第81-82页 |