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阿尔茨海默病基因关联性分析及APOE缺陷小鼠脑组织中异常表达miRNA的鉴定和初步功能研究

第一部分 叶酸和同型半胱氨酸代谢相关基因多态性与阿尔茨海默病的关联性研究第1-50页
 摘要第5-7页
 ABSTRACT第7-9页
 前言第9-13页
 研究对象与方法第13-25页
  1.研究对象第13页
  2.主要试剂和仪器第13-14页
  3.基因组DNA提取第14页
  4.APOE、MTHFR677 C/T、RFCl 80 A/G、CβS 844ins 68、MTHFD1 1958G/A和PEMT 523G/A多态性检测第14-22页
   ·APOE基因多态性检测第14-16页
   ·MTHFR 677 C/T多态性检测第16-17页
   ·RFC1 80 A/G多态性检测第17-18页
   ·CβS 844ins68多态性检测第18-20页
   ·MTHFD1 1958A/G多态性检测第20-21页
   ·PEMT 523G/A多态性检测第21-22页
  5.血浆叶酸水平检测第22-23页
  6.血浆同型半胱氨酸水平检测第23-24页
  7.统计学分析第24-25页
 结果第25-39页
  1.基因多态性与AD的关联性分析第25-35页
   ·APOE基因多态性与AD的相关性分析第25-26页
     ·MTHFR 677C/T多态性检测及其与AD相关性分析第26-29页
   ·RFC1 80 A/G多态性与AD相关性分析第29-31页
   ·CβS 844ins68多态性与AD相关性分析第31-33页
     ·MTHFD1 1958 A/G多态性与AD相关性分析第33-34页
   ·PEMT 523 G/A多态性与AD相关性分析第34-35页
  2.血浆叶酸和同型半胱氨酸水平第35页
  3.基因多态性对血浆叶酸和同型半胱氨酸水平的影响第35-39页
   ·RFC1 80A/G基因多态性对血浆叶酸和同型半胱氨酸水平的影响第35-37页
   ·MTHFR 677C/T基因多态性对血浆叶酸和同型半胱氨酸水平的影响第37-39页
 讨论第39-43页
 小结第43-44页
 参考文献第44-50页
第二部分 APOE缺陷小鼠大脑额叶皮层和海马异常表达MIRNA的鉴定和初步功能分析第50-94页
 摘要第50-52页
 ABSTRACT第52-54页
 前言第54-57页
 研究方法第57-78页
  1.主要仪器和试剂第57-58页
  2.生物分析软件第58页
  3.动物饲养第58页
  4.RNA提取第58-59页
   ·总RNA提取第58-59页
   ·miRNAs富集第59页
  5.cDNA第一链合成第59-67页
   ·DNasel去除RNA中痕量DNA第59-60页
   ·M—MLV合成mRNA的cDNA第一链第60页
   ·合成miRNAs的cDNA第一链第60-67页
  6.Real-time PCR鉴定miRNAs表达第67-70页
  7.靶基因鉴定第70-77页
   ·靶基因3'UTR区克隆第70-73页
   ·萤光素酶报告基因载体构建第73-74页
   ·mmu-miR-143前体扩增及成熟miR-143互补链获得第74-76页
   ·靶基因鉴定第76-77页
  8.统计学分析第77-78页
 结果第78-84页
   ·月龄C57BL/6J小鼠和apoE~(-/-)小鼠大脑额叶皮层和海马部分miRNAs的表达差异第78-80页
     ·月龄C57BL/6J小鼠和apoE~(-/-)小鼠大脑额叶皮层内部分miRNAs的表达差异第78-79页
     ·月龄C57BL/6J小鼠和apoE~(-/-)小鼠海马内部分miRNAs的表达第79-80页
  2.mmu-miR-143在2月龄,7月龄和13月龄C557BL/6J小鼠与apoE~(-/-)小鼠大脑额叶皮层和海马的表达第80-81页
  3.mmu-miR-143靶基因预测及鉴定第81-84页
 讨论第84-87页
 小结第87-88页
 参考文献第88-94页
综述 Alzheimer病中的血管性因素第94-110页
 参考文献第102-110页
攻读博士期间发表和待发表的文章第110-111页
致谢第111-113页

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