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昆虫病原线虫共生菌YL001的分子鉴定及杀虫毒性基因的克隆

摘要第1-5页
ABSTRACT第5-8页
第一章 文献综述第8-24页
   ·昆虫病原线虫共生菌的概述第8-9页
   ·共生菌与昆虫病原线虫的关系第9-12页
     ·阶段Ⅰ第9页
     ·阶段Ⅱ(早期)第9-10页
     ·阶段Ⅱ(后期)第10-11页
     ·阶段Ⅲ第11页
     ·细菌-线虫相互作用中所涉及的基因第11-12页
   ·昆虫病原线虫共生菌的特性第12-16页
     ·共生菌Xenorhabdus 的生理生化特性第12-14页
     ·昆虫病原线虫共生细菌型态变异第14-16页
   ·共生菌的分类研究进展第16-18页
   ·昆虫病原线虫共生菌杀虫毒素蛋白研究进展第18-22页
     ·昆虫病原线虫共生菌杀虫蛋白及其目标害虫第18-20页
     ·昆虫病原线虫共生菌杀虫蛋白基因及来源第20-22页
     ·昆虫病原线虫共生菌杀虫蛋白的杀虫作用机制第22页
   ·昆虫病原线虫共生菌分子鉴定和基因克隆的意义第22-24页
     ·昆虫病原线虫共生菌分子鉴定的意义第22页
     ·克隆昆虫病原线虫共生菌杀虫毒性基因的意义第22-24页
第二章 材料和方法第24-32页
   ·材料第24-26页
     ·菌株与质粒第24页
     ·培养基第24页
     ·试剂第24-26页
   ·试验方法第26-32页
     ·昆虫病原线虫共生菌基因组DNA 模板的制备第26页
     ·DNA 的PCR 扩增第26-28页
     ·PCR 产物与T 载体的连接第28页
     ·感受态细胞的制备(CaCl_2法)第28页
     ·转化第28-29页
     ·重组质粒的筛选与鉴定第29页
     ·序列测定及分析第29页
     ·E.coli 质粒的提取第29页
     ·BamH I,Hind III 双酶切第29页
     ·琼脂糖凝胶电泳回收第29-30页
     ·T4 DNA-lignase 连接第30页
     ·BL21-pET28a-PSYL001 表达载体的鉴定第30页
     ·目的基因的诱导表达第30-31页
     ·蛋白质的SDS-PAGE 凝胶电泳第31-32页
第三章 结果与分析第32-44页
   ·昆虫病原线虫共生菌YL001 基因组DNA 的检测第32页
   ·昆虫病原线虫共生菌YL001 的分子鉴定第32-37页
     ·利用P_1P_2分子鉴定引物对进行PCR 扩增及其产物的克隆第32-33页
     ·昆虫病原线虫共生菌YL001 的分子鉴定16S rDNA 基因片段的序列第33-34页
     ·分子鉴定16S rDNA 片段序列的同源性分析第34-37页
   ·菌毛蛋白亚基的克隆与序列分析第37-40页
     ·PSYL001 基因PCR 扩增及其产物的克隆第37-39页
     ·PSYL001 基因的序列分析第39-40页
   ·PSYL001 基因在大肠杆菌BL21 中的表达第40-44页
     ·pET28a(+)-PSYL001 重组体的构建和鉴定第40页
     ·PSYL001 基因的诱导表达第40-42页
     ·PSYL001 基因不表达的原因第42-44页
第四章 讨论第44-46页
   ·昆虫病原线虫共生菌YL001 的分子鉴定第44页
   ·PSYL001 基因的扩增第44页
   ·PSYL001 基因的克隆和序列分析第44-45页
   ·研究展望第45-46页
参考文献第46-53页
致谢第53-54页
作者简介第54页

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