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油菜细胞核雄性不育基因Bnms3的克隆及功能标记开发

摘要第1-9页
Abstract第9-12页
縮写名词表第12-13页
1 文献综述第13-36页
   ·油菜杂种优势利用途径第13-15页
     ·细胞质雄性不育第13-14页
     ·细胞核雄性不育第14页
     ·生态型雄性不育第14页
     ·细胞核+细胞质雄性不育第14-15页
   ·油菜隐性上位互作型细胞核雄性不育的研究第15-19页
     ·隐性上位互作型细胞核雄性不育的遗传第15页
     ·隐性上位互作型细胞核雄性不育的机理研究第15-18页
     ·隐性上位互作型细胞核雄性不育的应用研究第18-19页
   ·图位克隆在甘蓝型油菜中的应用第19-25页
     ·甘蓝型油菜中应用图位克隆策略的复杂性第19-22页
     ·甘蓝型油菜中应用图位克隆策略的解决措施第22-25页
   ·候选基因的确定及功能验证第25-29页
     ·候选基因的确定方法第26-28页
     ·候选基因的功能验证方法第28-29页
   ·叶绿体蛋白的转运第29-36页
     ·叶绿体的结构第30页
     ·叶绿体蛋白转运的装置第30-33页
     ·Tic40的研究进展第33-36页
2 本研究的目的与意义第36-37页
3 材料和方法第37-47页
   ·实验材料第37页
   ·群体的构建第37-38页
   ·分子标记开发和分析第38页
   ·BAC克隆文库的筛选及阳性克隆的鉴定第38-39页
     ·BAC文库第38页
     ·BAC文库筛选第38页
     ·阳性克隆的鉴定第38-39页
   ·BAC阳性克隆重叠群的构建第39页
   ·候选BAC克隆测序第39页
   ·候选基因预测与比较测序第39-41页
     ·候选基因的预测第39页
     ·候选基因区间的比较测序第39-41页
   ·农杆菌介导的遗传转化第41-43页
     ·载体与菌株第41页
     ·转基因受体材料第41页
     ·植物表达载体的构建第41-42页
     ·甘蓝型油菜的遗传转化第42-43页
   ·转基因植株的检测第43-44页
     ·转基因植株的PCR检测第43-44页
     ·转基因植株的育性观察第44页
   ·ORF1的比较测序第44-45页
   ·ORF1的表达分析第45-47页
     ·RNA的提取及cDNA的合成第45页
     ·RT-PCR第45-46页
     ·不育基因bnaC9.tic40.a的表达第46-47页
4 结果与分析第47-84页
   ·定位群体单株的育性调查第47-48页
   ·群体分析第48-50页
   ·分子标记的开发与重组单株的检测第50页
   ·Tapidor BAC文库筛选、阳性克隆鉴定及重叠群构建第50-53页
   ·两个BAC克隆序列的比对第53页
   ·新标记开发与重组单株检测第53-55页
   ·候选基因的预测及区间比较测序第55-58页
     ·候选基因的预测第55-56页
     ·候选基因区间比较测序第56-58页
   ·遗传转化第58-62页
     ·ORF2功能互补表达载体的构建及遗传转化第58-60页
     ·ORF1功能互补表达载体的构建及遗传转化第60-62页
   ·BnaC9.TIC40.a的结构与功能预测第62-63页
   ·BnaC9.TIC40.a的比较测序第63-72页
     ·BnaC9.TIC40.a基因组水平的比较测序第63-68页
     ·BnaC9.TIC40.acDNA水平的比较测序第68-70页
     ·BnaC9.TIC40.a蛋白质水平的比较分析第70-72页
   ·BnaC9.TIC40.a的表达模式第72-76页
   ·T45及9012A中Bnms3突变位点的标记开发第76-84页
     ·基于T45中Bnms3突变位点的标记开发第76-78页
     ·基于9012A中Bnms3突变位点标记的开发第78-81页
     ·9012AB隐性核不育系统分子标记辅助选育体系的构建第81-84页
5 讨论第84-93页
   ·不同群体中重组频率的差异第84-85页
   ·甘蓝型油菜图位克隆过程中的复杂性第85-87页
     ·同源克隆的干扰第85-86页
     ·标记的开发第86-87页
     ·候选基因的确定第87页
   ·BnMs3两个突变体的进化机制第87-88页
     ·9012A中Bnms3的突变第87-88页
     ·T45中Bnms3的突变第88页
   ·BnaC9.TIC40.a的功能第88-91页
   ·不同的GMS系统的整合及BnMs3标记的应用第91-93页
参考文献第93-110页
附录1 本实验中所用到的相关引物第110-112页
附录2 BnMs3精细定位过程中用到的主要标记第112-113页
附录3 作者简介和在读期间发表论文第113-114页
致谢第114-115页

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