摘要 | 第1-9页 |
Abstract | 第9-12页 |
缩略语表 | 第12-13页 |
1 文献综述 | 第13-38页 |
·植物细胞质雄性不育研究的理论和实际意义 | 第13-14页 |
·植物胞质雄性不育发生机理及创制 | 第14-17页 |
·植物线粒体基因组的重组 | 第14-15页 |
·远缘杂交及核置换 | 第15-16页 |
·体细胞融合 | 第16-17页 |
·植物细胞质雄性不育相关基因的克隆 | 第17-25页 |
·水稻 | 第17-18页 |
·玉米 | 第18-20页 |
·油菜 | 第20-23页 |
·其他植物 | 第23-25页 |
·胞质不育基因的作用机理 | 第25-31页 |
·对植物线粒体的影响 | 第25-28页 |
·相关基因的表达差异 | 第28页 |
·形态学及细胞学特征 | 第28-31页 |
·恢复基因的作用机理 | 第31-34页 |
·水稻 | 第31-32页 |
·米 | 第32页 |
·油菜 | 第32-33页 |
·矮牵牛 | 第33-34页 |
·芥菜型油菜hau CMS不育系的特征 | 第34-37页 |
·形态学及细胞学特征 | 第34页 |
·恢保关系 | 第34-35页 |
·线粒体DNA特征 | 第35-37页 |
·本研究的目的和意义 | 第37-38页 |
2 材料和方法 | 第38-52页 |
·实验材料 | 第38页 |
·植物材料 | 第38页 |
·载体和菌株 | 第38页 |
·实验方法 | 第38-52页 |
·油菜DNA提取 | 第38-39页 |
·染色体步移 | 第39-41页 |
·油菜各组织总RNA的抽提及检测 | 第41页 |
·RT-PCR及CR-RT-PCR | 第41-43页 |
·Northern杂交 | 第43-45页 |
·Western杂交 | 第45-46页 |
·原核表达 | 第46页 |
·植物遗传转化 | 第46-49页 |
·亚细胞定位实验 | 第49-51页 |
·序列分析 | 第51-52页 |
3 结果与分析 | 第52-81页 |
·hau CMS胞质线粒体基因组特异序列的克隆及分析 | 第52-57页 |
·线粒体基因侧翼序列的克隆 | 第52-53页 |
·atp6基因下游序列结构及特异性分析 | 第53-54页 |
·atp6-orf288与其在芸薹属中的同源序列的对比分析 | 第54-57页 |
·不育相关基因的表达分析 | 第57-63页 |
·Northern杂交检测线粒体基因转录本差异 | 第57-58页 |
·atp6/orf288的转录模式分析 | 第58-60页 |
·atp6/orf288转录本末端序列分析 | 第60-62页 |
·atp6/orf288转录本的编辑及其表达的组织特异性分析 | 第62-63页 |
·不育胞质异常开放读码框(orf288)编码蛋白产物的分析 | 第63-69页 |
·异常开放读码框orf288编码蛋白的结构分析 | 第63-67页 |
·orf288编码蛋白产物的western杂交检测 | 第67-69页 |
·orf288的原核表达分析 | 第69-72页 |
·原核表达载体的构建 | 第69-70页 |
·IPTG诱导表达 | 第70-72页 |
·拟南芥和油菜的遗传转化 | 第72-78页 |
·植物转化载体的构建 | 第72-73页 |
·转化植株的育性鉴定 | 第73-75页 |
·转化植株其他器官发育的异常 | 第75-77页 |
·甘蓝型油菜的遗传转化 | 第77-78页 |
·ORF288的亚细胞定位 | 第78-81页 |
·ORF288亚细胞定位预测 | 第78-79页 |
·瞬时表达载体的构建 | 第79-80页 |
·ORF288的瞬时表达 | 第80-81页 |
4 讨论 | 第81-90页 |
·油菜hau CMS不育胞质的特异性分析 | 第81页 |
·atp6/orf288转录模式分析 | 第81-83页 |
·ORF288对大肠杆菌的毒害作用 | 第83-84页 |
·orf288对遗传转化植株生长发育的影响 | 第84-88页 |
·ORF288的亚细胞定位分析 | 第88页 |
·总结与展望 | 第88-90页 |
参考文献 | 第90-104页 |
致谢 | 第104-106页 |
附录1 | 第106-109页 |
附录2 | 第109-112页 |
附录3 | 第112页 |