| 摘要 | 第1-9页 |
| ABSTRACT | 第9-11页 |
| 缩略词表 | 第11-12页 |
| 第一部分 文献综述 | 第12-26页 |
| 1 棉花纤维的生长发育过程 | 第12-13页 |
| 2 植物激素的种类及其在植物体中所起的作用 | 第13-15页 |
| 3.激素在棉花纤维发育中含量的变化及对其分化和发育的影响 | 第15-17页 |
| ·激素在棉花纤维发育过程中含量的变化 | 第15-16页 |
| ·激素对棉花纤维分化和发育的影响 | 第16-17页 |
| ·激素对纤维分化的影响 | 第16页 |
| ·激素对纤维伸长的影响 | 第16页 |
| ·激素对次生壁形成的影响 | 第16-17页 |
| ·激素对核仁大小的影响 | 第17页 |
| 4.生长素、细胞分裂素和乙烯的分子生物学研究进展 | 第17-20页 |
| ·生长素的分子生物学研究进展 | 第17-18页 |
| ·细胞分裂素的分子生物学研究进展 | 第18-19页 |
| ·乙烯的分子生物学研究进展 | 第19-20页 |
| 5.植物激素与植物抗逆性的关系 | 第20-22页 |
| ·ABA与植物逆境的关系 | 第20-21页 |
| ·乙烯与植物抗逆性的关系 | 第21-22页 |
| ·细胞分裂素在植物抗逆性中的作用 | 第22页 |
| 6.RACE技术在植物基因克隆上的应用 | 第22-24页 |
| 7.水分胁迫对棉花的影响 | 第24-25页 |
| ·水分胁迫条件下的棉花的生理变化 | 第24-25页 |
| ·水分胁迫对棉花叶面积指数的影响 | 第24页 |
| ·水分胁迫对棉花叶绿素含量的影响 | 第24页 |
| ·水分胁迫对棉花叶片全氮(TN)含量的影响 | 第24页 |
| ·不同生育阶段水分胁迫对棉花产量的影响 | 第24-25页 |
| 8.本研究的目的和意义 | 第25-26页 |
| 第二部分 研究报告 | 第26-74页 |
| 1.实验材料 | 第26-28页 |
| ·植物材料 | 第26页 |
| ·菌种和质粒 | 第26页 |
| ·基因来源 | 第26页 |
| ·试剂 | 第26-27页 |
| ·引物合成 | 第27-28页 |
| 2.实验方法 | 第28-42页 |
| ·棉花RNA的提取 | 第28-30页 |
| ·改进的热硼酸法(提取除叶片外的棉花各组织) | 第28-30页 |
| ·实验前准备 | 第28-29页 |
| ·实验步骤 | 第29-30页 |
| ·CTAB法提取总RNA(用于棉花叶片的总RNA的提取)具体步骤如下: | 第30页 |
| ·甲醛-琼脂糖凝胶电泳 | 第30-32页 |
| ·准备工作 | 第30-31页 |
| ·实验步骤 | 第31-32页 |
| ·5’RACE步骤 | 第32页 |
| ·扩增产物的电泳,回收,克隆及测序 | 第32-33页 |
| ·RT-PCR | 第33-34页 |
| ·DNA的消化 | 第33-34页 |
| ·CDNA第一链的合成 | 第34页 |
| ·RT-PCR | 第34页 |
| ·棉花基因组DNA的提取 | 第34-36页 |
| ·SOUTHERN杂交分析 | 第36-38页 |
| ·基因组DNA酶切反应体系 | 第36页 |
| ·试剂及其配制 | 第36-37页 |
| ·SOUTHERN印迹 | 第37-38页 |
| ·DIG标记探针 | 第38页 |
| ·杂交 | 第38页 |
| ·洗膜与显色 | 第38页 |
| ·定位分析 | 第38-39页 |
| ·植物表达载体的构建 | 第39-40页 |
| ·UNIGENE文库的获得及序列分析 | 第40-41页 |
| ·水分胁迫下所克隆基因在棉花叶片中表达量的变化 | 第41-42页 |
| 3 结果与讨论 | 第42-74页 |
| ·EST序列的获得及初步分析 | 第42-43页 |
| ·GHSAHH基因的克隆和鉴定 | 第43-54页 |
| ·棉花腺苷高半胱氨酸水解酶(S-ADENOSYLHOMOCYSTEINE HYDROLASE)基因的克隆 | 第43-45页 |
| ·氨基酸序列的分析结果 | 第45-46页 |
| ·GHSAHH与其它植物SAHH蛋白的同源性比较 | 第46-47页 |
| ·GHSAHH的RT-PCR分析 | 第47-48页 |
| ·GHSAHH的SOUTHERN杂交分析 | 第48-49页 |
| ·GHSAHH基因的染色体定位 | 第49-51页 |
| ·GHSAHH基因全长序列的获得 | 第51页 |
| ·水分胁迫下GHSAHH基因在棉花叶片中表达量的变化 | 第51-52页 |
| ·讨论 | 第52-54页 |
| ·GHARP基因的克隆和鉴定 | 第54-62页 |
| ·棉花生长素应答蛋白(IAA/AUXIN-RESPONSIVE PROTEIN)基因的克隆 | 第54-55页 |
| ·氨基酸序列的分析结果 | 第55-57页 |
| ·GHARP与其它植物ARP蛋白的同源性比较 | 第57-58页 |
| ·GHARP的RT-PCR分析 | 第58-59页 |
| ·GHARP的SOUTHERN杂交分析 | 第59页 |
| ·GHARP植物表达载体的构建 | 第59-61页 |
| ·水分胁迫下GHARP基因在棉花叶片中表达量的变化 | 第61页 |
| ·讨论 | 第61-62页 |
| ·GHEREBP基因的克隆和鉴定 | 第62-73页 |
| ·棉花乙烯应答元件结合蛋白(ETHYLENE RESPONSIVE ELEMENT BINDING PROTEIN)基因的克隆 | 第62-64页 |
| ·氨基酸序列的分析结果 | 第64-67页 |
| ·GHEREBP与其它植物EREBP蛋白的同源性比较 | 第67-68页 |
| ·GHEREBP的RT-PCR分析 | 第68页 |
| ·GHEREBP的SOUTHERN杂交分析 | 第68-69页 |
| ·GHEREBP植物表达载体的构建 | 第69-70页 |
| ·水分胁迫下GHEREBP基因在棉花叶片中表达量的变化 | 第70页 |
| ·讨论 | 第70-73页 |
| ·其他克隆的表达谱分析 | 第73-74页 |
| 全文结论 | 第74-76页 |
| 参考文献 | 第76-82页 |
| 致谢 | 第82页 |
