| 摘要 | 第1-7页 |
| ABSTRACT | 第7-9页 |
| 第一部分：CaP与MLCK的结合实验 | 第9-43页 |
| 前言 | 第9-11页 |
| 第一章 文献综述 | 第11-20页 |
| 第二章 实验研究 | 第20-36页 |
| 一 主要材料 | 第20-23页 |
| ·主要试剂及材料： | 第20-21页 |
| ·主要设备 | 第21页 |
| ·主要溶液的配制 | 第21-23页 |
| 二 实验方法 | 第23-27页 |
| (一) 2Ig蛋白和Calponin蛋白的结合实验 | 第23-26页 |
| ·重组质粒的构建 | 第23-24页 |
| ·重组蛋白的表达： | 第24页 |
| ·重组蛋白的纯化(His-Tag层析柱纯化)： | 第24-25页 |
| ·Western Blotting检测蛋白表达情况 | 第25页 |
| ·Overlap检测肌丝中能与2Ig蛋白相结合的蛋白 | 第25页 |
| ·Calponin蛋白的纯化(所有步骤都在4℃操作) | 第25-26页 |
| ·Overlap检测纯化后的CaP与2Ig的结合 | 第26页 |
| ·免疫共沉淀实验 | 第26页 |
| (二) 2Ig和Calponin蛋白结合后的功能性实验 | 第26-27页 |
| ·新鲜分离单个的平滑肌细胞 | 第26-27页 |
| ·2Ig和Calponin蛋白结合后对平滑肌收缩功能的影响 | 第27页 |
| 三 实验结果 | 第27-34页 |
| ·重组蛋白的表达与纯化结果： | 第27-29页 |
| ·Overlap检测肌丝中能与2I蛋白相结合的蛋白 | 第29-30页 |
| ·CaP蛋白的纯化 | 第30-31页 |
| ·纯化后的CaP和2Ig的Overlap实验结果 | 第31-33页 |
| ·免疫共沉淀结果 | 第33页 |
| ·2Ig重组蛋白和Calponin蛋白结合后对平滑肌收缩功能的影响 | 第33-34页 |
| 四 讨论与分析 | 第34-36页 |
| 参考文献 | 第36-43页 |
| 第二部分 原核表达的重组内抑素多聚体的分离及抗血管生成活性 | 第43-61页 |
| 前言 | 第43-44页 |
| 第一章 文献综述 | 第44-48页 |
| 第二章 实验研究 | 第48-58页 |
| 1 实验材料 | 第48-49页 |
| ·主要试剂及材料： | 第48页 |
| ·主要设备 | 第48-49页 |
| ·主要溶液的配制 | 第49页 |
| 2 实验方法 | 第49-51页 |
| ·重组人内皮抑素的诱导表达 | 第49-50页 |
| ·重组蛋白的纯化 | 第50页 |
| ·单体和多聚体的分离及检测 | 第50-51页 |
| ·抗血管生成活性的检验：鸡胚尿囊膜(CAM)实验 | 第51页 |
| 3 实验结果 | 第51-56页 |
| ·Rh／Endostatin的表达和纯化 | 第51-53页 |
| ·RP-HPLC系统分离单体和多聚体 | 第53-54页 |
| ·分离的单体和多聚体抑制鸡胚尿囊膜血管生成的活性分析 | 第54-56页 |
| 4 讨论和分析 | 第56-58页 |
| 参考文献 | 第58-61页 |
| 致谢 | 第61-62页 |
| 作者简介 | 第62页 |
