| 摘要 | 第3-5页 |
| ABSTRACT | 第5-6页 |
| 一 引言 | 第9-21页 |
| 1.1 马铃薯离体组织培养的研究概况 | 第9-11页 |
| 1.2 马铃薯的病毒病害及其抗性的研究进展 | 第11-17页 |
| 1.2.1 马铃薯抗PVY基因工程 | 第13-14页 |
| 1.2.2 马铃薯抗PLRV基因工程 | 第14-15页 |
| 1.2.3 马铃薯抗PVX基因工程 | 第15-17页 |
| 1.3 NBS-LRR类抗病基因的简介 | 第17-19页 |
| 1.4 转基因马铃薯抗病害的研究进展 | 第19-21页 |
| 二 材料、仪器与方法 | 第21-32页 |
| 2.1 实验材料与试剂 | 第21-25页 |
| 2.1.1 实验材料 | 第21页 |
| 2.1.2 植物激素与抗生素 | 第21-22页 |
| 2.1.3 实验所用试剂盒 | 第22-23页 |
| 2.1.4 实验所用仪器设备 | 第23-25页 |
| 2.2 实验方法 | 第25-32页 |
| 2.2.1 马铃薯小苗离体快繁 | 第25页 |
| 2.2.2 农杆菌菌液的制备 | 第25页 |
| 2.2.3 马铃薯叶片的遗传转化 | 第25-26页 |
| 2.2.4 基因组DNA提取 | 第26-27页 |
| 2.2.5 总RNA提取 | 第27页 |
| 2.2.6 cDNA的制备 | 第27-28页 |
| 2.2.7 目标基因扩增 | 第28-29页 |
| 2.2.8 植物蛋白质提取 | 第29页 |
| 2.2.9 Western Blot实验 | 第29-30页 |
| 2.2.10 蛋白质定量实验 | 第30页 |
| 2.2.11 摩擦侵染 | 第30-31页 |
| 2.2.12 注射侵染 | 第31-32页 |
| 三 实验结果与分析 | 第32-51页 |
| 3.1 马铃薯遗传转化体系的建立及其转化植株的获得 | 第32-36页 |
| 3.2 成功获得过表达GmNH23 的转基因马铃薯植株 | 第36-39页 |
| 3.2.1 GmNH23 已成功导入马铃薯植株中 | 第36-37页 |
| 3.2.2 GmNH23 已在马铃薯植株中成功转录 | 第37-38页 |
| 3.2.3 GmNH23 在马铃薯植株中成功表达GmNH23 蛋白 | 第38-39页 |
| 3.3 GmNH23 的表达对PVY与 PVX病毒具有抗性 | 第39-46页 |
| 3.4 过表达GmNH23基因转基因烟草的获得及其分子鉴定 | 第46-48页 |
| 3.4.1 GmNH23 已成功导入烟草植株中 | 第46页 |
| 3.4.2 GmNH23 已在烟草植株中成功转录 | 第46-47页 |
| 3.4.3 GmNH23 在烟草植株中成功表达GmNH23 蛋白 | 第47-48页 |
| 3.5 GmNH23 转基因烟草对TMV病毒具有抗性 | 第48-51页 |
| 四 讨论 | 第51-54页 |
| 4.1 马铃薯遗传转化体系的优化 | 第51-52页 |
| 4.1.1 分化与脱分化培养基的选用 | 第51页 |
| 4.1.2 农杆菌侵染过程的影响 | 第51-52页 |
| 4.1.3 抗生素浓度的选择 | 第52页 |
| 4.2 GmNH23 基因具有广谱抗病毒活性 | 第52-54页 |
| 参考文献 | 第54-57页 |
| 附录 | 第57-62页 |
| 附录1 常用培养基及试剂的配制 | 第57-61页 |
| 附录2 本论文所用载体图 | 第61-62页 |
| 致谢 | 第62页 |
