| 中文摘要 | 第1-5页 |
| ABSTRACT | 第5-12页 |
| 第一章 动物黏膜免疫的研究进展 | 第12-23页 |
| 1 动物黏膜免疫系统研究进展 | 第12-18页 |
| ·黏膜免疫系统的构成 | 第12-17页 |
| ·特异性黏膜免疫的机制 | 第17-18页 |
| 2 以减毒沙门氏菌为载体的基因疫苗黏膜免疫的研究进展 | 第18-21页 |
| ·减毒沙门氏菌作为基因疫苗载体的优势 | 第18-19页 |
| ·减毒沙门氏菌的侵入机制 | 第19-20页 |
| ·携带基因疫苗的减毒沙门氏菌诱发机体免疫应答的机制 | 第20页 |
| ·减毒沙门氏菌作为基因疫苗载体的应用 | 第20-21页 |
| 3 选题目的及意义 | 第21-23页 |
| 第二章 携带真核质粒的减毒沙门氏菌的构建及其生物学特性的研究 | 第23-44页 |
| 1 材料 | 第24页 |
| ·细菌及主要试剂 | 第24页 |
| ·主要仪器 | 第24页 |
| 2 方法 | 第24-32页 |
| ·pMD-T18/LTB的构建 | 第24-26页 |
| ·真核表达质粒的构建与鉴定 | 第26-30页 |
| ·携带真核表达质粒的减毒沙门氏菌的构建 | 第30页 |
| ·重组沙门氏菌的生长特性 | 第30-31页 |
| ·重组沙门氏菌的体外稳定性试验 | 第31页 |
| ·E. coli LTB基因核苷酸序列分析 | 第31页 |
| ·鸭胚成纤维细胞的制备与体外感染 | 第31-32页 |
| 3 结果 | 第32-40页 |
| ·E. coli LTB基因的PCR结果 | 第32-33页 |
| ·E.coli LTB基因的测序结果 | 第33页 |
| ·重组真核表达质粒鉴定结果 | 第33-35页 |
| ·携带真核表达质粒的减毒沙门氏菌的鉴定 | 第35-36页 |
| ·重组沙门氏菌的革兰氏染色镜检结果 | 第36页 |
| ·SL7207与重组减毒沙门氏菌生化特性的比较 | 第36-37页 |
| ·重组沙门氏菌的生长曲线 | 第37-38页 |
| ·体外重组沙门氏菌中质粒的稳定性 | 第38页 |
| ·LTB基因和LTB-UL24基因的生物信息学分析 | 第38-39页 |
| ·沙门氏菌传递的质粒在鸭胚成纤维细胞中的表达 | 第39-40页 |
| 4 讨论 | 第40-42页 |
| ·双基因融合真核表达载体的构建 | 第40页 |
| ·重组菌的生物学特性 | 第40-41页 |
| ·重组菌的质粒稳定性 | 第41-42页 |
| ·减毒沙门氏菌SL7207的优越性 | 第42页 |
| 5 小结 | 第42-44页 |
| 第三章 DPV UL24基因疫苗肌注免疫组免疫原性研究 | 第44-53页 |
| 1 材料 | 第44-45页 |
| ·病毒、试验动物和主要试剂 | 第44页 |
| ·主要溶液的配制 | 第44页 |
| ·主要仪器 | 第44-45页 |
| 2 方法 | 第45-47页 |
| ·免疫动物处理 | 第45-46页 |
| ·RT-PCR检测LTB、UL24和LTB-UL24基因在体内的转录 | 第46页 |
| ·鸭瘟病毒包被抗原的制备 | 第46页 |
| ·特异性DPV IgG、IgA和IgM的检测 | 第46-47页 |
| 3 结果 | 第47-51页 |
| ·RT-PCR检测LTB、UL24和LTB-UL24基因在体内的转录 | 第47页 |
| ·肌注免疫组各器官抗体动态变化 | 第47-48页 |
| ·肌注免疫组免疫鸭血清中特异性DPV IgA与IgM的检测 | 第48-49页 |
| ·肌注免疫组免疫鸭在气管和十二指肠中特异DPV IgA、IgG与IgM的检测 | 第49-51页 |
| 4 讨论 | 第51-52页 |
| ·DPV UL24基因表达蛋白的抗原性 | 第51页 |
| ·蛋白定位对免疫效果的影响 | 第51-52页 |
| 5 小结 | 第52-53页 |
| 第四章 DPV UL24基因疫苗口服免疫组免疫原性研究 | 第53-76页 |
| 1 材料 | 第53-54页 |
| ·病毒、试验动物和主要试剂 | 第53页 |
| ·主要溶液的配制 | 第53-54页 |
| ·主要仪器 | 第54页 |
| 2 方法 | 第54-57页 |
| ·免疫动物处理 | 第54-55页 |
| ·重组沙门氏菌对鸭安全性试验 | 第55页 |
| ·RT-PCR检测LTB、UL24和LTB-UL24基因在体内的转录 | 第55-56页 |
| ·鸭瘟病毒包被抗原的制备 | 第56页 |
| ·沙门氏菌包被抗原的制备 | 第56页 |
| ·特异性DPV IgG、IgA和IgM的检测 | 第56页 |
| ·特异性沙门氏菌IgG、IgA和IgM含量测定 | 第56-57页 |
| 3 结果 | 第57-73页 |
| ·重组沙门氏菌对鸭的安全性试验 | 第57-58页 |
| ·RT-PCR检测LTB、UL24和LTB-UL24基因在体内的转录 | 第58-59页 |
| ·抗DPV特异性IgA、IgG和IgM在免疫鸭各器官中的检测 | 第59-60页 |
| ·口服免疫组血清中特异性DPV IgA与IgM的检测 | 第60-61页 |
| ·口服免疫组气管中特异性DPV IgG、IgA与IgM的检测 | 第61-63页 |
| ·口服免疫组十二指肠中特异性DPV IgG、IgA与IgM的检测 | 第63-65页 |
| ·不同剂量口服免疫SL7207(LTB-UL24)组血清中特异性DPV IgA与IgM的检测 | 第65-66页 |
| ·不同剂量口服免疫SL7207(LTB-UL24)组气管中特异性DPV IgG、IgA与IgM的检测 | 第66-68页 |
| ·不同剂量口服免疫SL7207(LTB-UL24)组十二指肠中特异性DPV IgG、IgA与IgM的检测 | 第68-70页 |
| ·免疫鸭血清中特异性沙门氏菌IgG、IgA和IgM的ELISA检测 | 第70-71页 |
| ·免疫鸭肠道中特异性沙门氏菌IgG、IgA和IgM的ELISA检测 | 第71-73页 |
| 4 讨论 | 第73-75页 |
| ·免疫途径对基因疫苗免疫效果的影响 | 第73-74页 |
| ·LTB的黏膜免疫佐剂效果 | 第74页 |
| ·免疫剂量对以沙门氏菌为载体的基因疫苗免疫效果的影响 | 第74-75页 |
| 5 小结 | 第75-76页 |
| 第五章 鸭瘟病毒UL24基因疫苗免疫保护效果研究 | 第76-81页 |
| 1 材料 | 第76页 |
| ·病毒 | 第76页 |
| ·试验动物 | 第76页 |
| 2 方法 | 第76-77页 |
| ·半数致死量(LD_(50))的确定 | 第76页 |
| ·攻毒保护试验 | 第76-77页 |
| 3 结果 | 第77-78页 |
| ·半数致死量(LD_(50))的确定 | 第77页 |
| ·免疫鸭保护效果 | 第77-78页 |
| 4 讨论 | 第78-79页 |
| 5 小结 | 第79-81页 |
| 参考文献 | 第81-96页 |
| 附表 | 第96-110页 |
| 附图 | 第110-117页 |
| 致谢 | 第117-118页 |
| 作者简介 | 第118页 |
