| 中文摘要 | 第1-4页 |
| 英文摘要 | 第4-6页 |
| 中英文缩写词简表 | 第6-11页 |
| 第一章 引言和文献综述 | 第11-25页 |
| ·心脏发育研究简述 | 第11-12页 |
| ·心脏发育与转录因子 | 第12-16页 |
| ·GATA | 第12-13页 |
| ·Nkx2.5 | 第13-14页 |
| ·MEF-2家族 | 第14页 |
| ·bHLH家族 | 第14-15页 |
| ·BMP家族 | 第15-16页 |
| ·MAPK信号途径与心脏发育的关系 | 第16-23页 |
| ·本文的研究意义 | 第23-25页 |
| 第二章 人类新基因hole的克隆、序列分析及其功能研究 | 第25-36页 |
| ·hole基因ORF的克隆和序列分析 | 第25-29页 |
| ·hole基因的人类组织Northern杂交结果 | 第29-30页 |
| ·hole蛋白的亚细胞定位分析 | 第30-32页 |
| ·hole蛋白抑制MAPK信号途径 | 第32-36页 |
| 第三章 人类新基因DAND5的克隆及其功能研究 | 第36-45页 |
| ·DAND5基因ORF的克隆和序列分析 | 第36-39页 |
| ·RT-PCR分析DAND5基因在组织中的表达 | 第39-40页 |
| ·DAND5基因在原核细胞中的表达 | 第40-42页 |
| ·DAND5蛋白的亚细胞定位 | 第42-43页 |
| ·DAND5蛋白抑制MAPK信号途径 | 第43-44页 |
| ·DAND5转基因稳定表达细胞系的建立 | 第44-45页 |
| 第四章 材料与方法 | 第45-65页 |
| ·材料 | 第45-50页 |
| ·方法 | 第50-65页 |
| ·总RNA的抽提 | 第50-51页 |
| ·人类胚胎心脏PCR cDNA文库的构建 | 第51页 |
| ·巢式PCR(nest PCR)扩增开放阅读框 | 第51-52页 |
| ·PCR产物的纯化回收 | 第52-53页 |
| ·PCR产物与T-载体的连接 | 第53页 |
| ·转化(热休克法) | 第53页 |
| ·质粒的小量制备 | 第53-54页 |
| ·阳性克隆的筛选与鉴定 | 第54-55页 |
| ·测序 | 第55页 |
| ·Northern blot | 第55页 |
| ·反转录 RT-PCR- | 第55-56页 |
| ·原核表达重组质粒的制备 | 第56-57页 |
| ·真核表达重组质粒的构建 | 第57-58页 |
| ·真核表达重组质粒的大量制备 | 第58-59页 |
| ·原核细胞的蛋白表达及纯化 | 第59-60页 |
| ·常规细胞培养及转染 | 第60-61页 |
| ·亚细胞定位观察 | 第61页 |
| ·基因信号途径的report assay | 第61-62页 |
| ·转基因稳定表达细胞系的建立 | 第62-65页 |
| 结语 | 第65-66页 |
| 参考文献 | 第66-73页 |
| 致谢 | 第73-74页 |
| 附录 | 第74-75页 |
| 附录1 | 第74-75页 |
| 附录2 | 第75页 |