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苹果(Malus pumila)NAD-山梨醇脱氢酶(NAD-SDH)基因cDNA片段的克隆及其反义表达载体的构建

第一章 文献综述第1-26页
   ·蔷薇科植物山梨醇的研究第10-13页
     ·山梨醇的含量及分布第10-11页
       ·山梨醇在科属中的分布第10页
       ·山梨醇在种类和品种中的分布第10页
       ·山梨醇在组织器官中的分布第10-11页
       ·山梨醇在细胞中的定位第11页
     ·山梨醇的功能第11-13页
       ·作为光合作用的产物第11页
       ·作为运输物质第11页
       ·作为贮藏物质第11-12页
       ·提高抗逆性第12页
       ·在组织培养中的应用第12-13页
       ·对植物生长发育的作用第13页
   ·山梨醇的代谢及其相关酶的研究进展第13-19页
     ·山梨醇的代谢研究第13-14页
     ·山梨醇代谢相关酶的研究第14-19页
       ·6-磷酸山梨醇脱氢酶第14-16页
       ·醛糖-6-磷酸还原酶第16页
       ·山梨醇-6-磷酸磷酸脂酶第16页
       ·山梨醇脱氢酶第16-18页
       ·山梨醇氧化酶第18-19页
   ·苹果基因克隆研究第19-21页
     ·基因分离与克隆常用方法第19-20页
       ·PCR 扩增第19页
       ·mRNA 差异显示技术第19页
       ·图位克隆、转座子标签技术第19-20页
       ·插入突变分离和克隆目的基因第20页
       ·功能基因组技术分离目的基因第20页
       ·文库筛选法第20页
     ·目前苹果已分离和克隆的基因第20-21页
   ·园艺植物反义RNA 应用研究第21-26页
     ·反义RNA 作用机理第22页
     ·反义RNA 技术在园艺植物中的应用第22-26页
       ·鉴定园艺植物基因功能和研究其在生理代谢途径中的作用第22-24页
       ·观赏植物的保鲜及花色的改变第24页
       ·提高园艺植物的抗逆性第24-25页
       ·控制淀粉合成第25页
       ·控制雄性不育及育性恢复第25页
       ·改善果蔬鲜食或加工品质第25-26页
第二章 试验部分第26-43页
   ·材料与方法第26-34页
     ·材料第26-27页
       ·总RNA 的提取第26页
       ·RT-PCR 扩增第26-27页
       ·基因克隆第27页
       ·表达载体构建及转化农杆菌第27页
     ·方法第27-34页
       ·总RNA 的提取方法第27-29页
       ·总RNA 检测第29-30页
       ·PCR 产物的克隆第30-31页
       ·序列测定与分析第31页
       ·表达载体构建第31-32页
       ·表达载体转化农杆菌第32-34页
   ·结果与分析第34-39页
     ·苹果果实总RNA 的提取第34页
     ·CDNA 第一链的合成及PCR 扩增第34页
     ·扩增产物的cDNA 克隆第34-36页
     ·序列测定与分析第36-37页
     ·NAD-SDH 植物反义表达载体的构建第37页
     ·NAD-SDH 反义表达载体质粒导入农杆菌第37-39页
   ·讨论第39-42页
     ·关于山梨醇代谢及其代谢酶的深入研究第39页
     ·关于基因的克隆及分析第39-41页
       ·关于苹果果实总RNA 的提取第39-40页
       ·关于RT-PCR 体系第40-41页
       ·关于基因克隆第41页
       ·关于序列分析第41页
     ·关于植物反义表达载体构建及其转化农杆菌第41-42页
   ·结论第42-43页
参考文献第43-52页
附录1:GENBANK 登录的苹果中已经克隆的基因第52-55页
附录2:蔷薇科植物中NAD-SDH 核苷酸同源性比较第55-60页
附录3:蔷薇科植物中NAD-SDH 氨基酸同源性比较第60-62页
致谢第62-63页
作者简介第63页

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