| 中文摘要 | 第1-7页 |
| ABSTRACT | 第7-9页 |
| 第一章 、 文献综述 | 第9-25页 |
| ·植酸酶分子生物学研究进展 | 第9-16页 |
| ·毕赤酵母表达系统研究进展 | 第16-25页 |
| 第二章 、 引言 | 第25-27页 |
| ·研究意义 | 第25-26页 |
| ·技术路线 | 第26-27页 |
| 第三章 、 材料与方法 | 第27-35页 |
| ·菌种和质粒载体 | 第27页 |
| ·主要试剂 | 第27页 |
| ·主要仪器设备 | 第27页 |
| ·主要溶液及其配制 | 第27-28页 |
| ·引物来源 | 第28页 |
| ·转化DNA样品的制备 | 第28-29页 |
| ·毕赤酵母感受态细胞的制备 | 第29页 |
| ·毕赤酵母的电穿孔转化 | 第29页 |
| ·阳性转化子的筛选及鉴定 | 第29-30页 |
| ·表达产物的部分酶学性质初步研究 | 第30-32页 |
| ·重组植酸酶粗酶比活力的测定 | 第32-33页 |
| ·重组酵母植酸酶表达量与诱导培养时间的关系 | 第33页 |
| ·重组酵母的遗传稳定性研究 | 第33页 |
| ·重组酵母的甲醇营养表型研究 | 第33页 |
| ·均匀设计法优化工程菌培养基 | 第33-35页 |
| 第四章 、 结果与分析 | 第35-44页 |
| ·毕赤酵母的电穿孔转化与筛选 | 第35页 |
| ·酵母菌落PCR的电泳结果 | 第35页 |
| ·标准磷曲线的绘制 | 第35-36页 |
| ·重组酶最适作用pH值 | 第36-37页 |
| ·重组酶最适作用温度 | 第37页 |
| ·重组酶热稳定性研究 | 第37-38页 |
| ·重组酵母植酸酶表达量与诱导培养时间的关系 | 第38-39页 |
| ·重组酶SDS-PAGE分析 | 第39-40页 |
| ·重组植酸酶粗酶比活力的测定 | 第40-41页 |
| ·重组酵母的遗传稳定性 | 第41页 |
| ·重组酵母的甲醇营养表型 | 第41-42页 |
| ·工程菌培养基的初步优化 | 第42-44页 |
| 第五章 、 讨论 | 第44-47页 |
| ·毕赤酵母细胞的电穿孔转化 | 第44页 |
| ·表达载体选择 | 第44页 |
| ·表达载体的线性化及整合方式 | 第44-45页 |
| ·重组酶与天然植酸酶部分酶学性质有所改变的可能原因 | 第45页 |
| ·工程菌株培养特性的探讨 | 第45-46页 |
| ·工程菌发酵工艺条件的优化 | 第46-47页 |
| 第六章 、 小结 | 第47-48页 |
| 参考文献 | 第48-54页 |
| 缩略词表 | 第54-55页 |
| 致谢 | 第55页 |