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毒杀松墨天牛虫生真菌蛋白的研究

第一章 文献综述第1-23页
   ·天牛及松墨天牛第12-14页
     ·天牛的生物学特性第12页
     ·天牛的危害第12-13页
     ·松墨天牛的生物学特性第13-14页
     ·松墨天牛的危害与防治第14页
   ·虫生真菌第14-16页
     ·主要的虫生真菌第15-16页
     ·虫生真菌的侵染机制第16页
   ·虫生真菌毒素第16-19页
     ·低分子量毒素第17-18页
       ·环缩肽类第17页
       ·色素类第17-18页
       ·有机酸类第18页
       ·其它类毒素第18页
     ·高分子蛋白毒素第18-19页
       ·酶类毒素第18-19页
       ·非酶类蛋白毒素第19页
   ·虫生真菌产毒素的适宜培养条件第19-20页
   ·虫生真菌毒素的提取纯化第20-21页
     ·破坏素的提纯第20页
     ·白僵菌素的提纯第20页
     ·高分子蛋白毒素的分离第20-21页
   ·虫生真菌毒素的生物测定第21页
   ·虫生真菌毒素的致病机理第21页
   ·虫生真菌毒素研究中存在的问题及前景展望第21-22页
     ·存在的问题第21-22页
     ·前景展望第22页
   ·论文的目的和思路第22-23页
第二章 从虫生真菌中分离纯化蛋白第23-33页
   ·材料与方法第23-27页
     ·材料第23页
       ·菌种第23页
       ·培养基第23页
       ·主要试剂第23页
       ·主要设备及材料第23页
     ·试剂的配制第23-25页
       ·聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)所需试剂的配制第23-25页
         ·凝胶液配制第23-24页
         ·4×电泳缓冲液的配制第24页
         ·5×样品缓冲液配制第24-25页
         ·染色液的配制第25页
         ·脱色液的配制第25页
       ·PB的配制第25页
       ·透析袋的预处理第25页
     ·方法第25-27页
       ·接种母液的制备第25-26页
       ·胞外全蛋白提取液的制备第26页
         ·发酵培养及胞外全蛋白粗提液的制备第26页
         ·胞外全蛋白粗提液的浓缩第26页
         ·胞外全蛋白提取液的获得第26页
       ·菌丝内蛋白的制备第26页
         ·发酵培养及菌丝体的收获第26页
         ·菌丝体内全蛋白的提取第26页
       ·全蛋白提取液中单一蛋白的分离纯化第26-27页
         ·制备PAGE电泳第26-27页
         ·蛋白带相对迁移率的计算第27页
         ·洗脱法分离纯化单一蛋白第27页
   ·结果与分析第27-32页
     ·蛋白相对迁移率的计算第27-29页
     ·单一蛋白的分离纯化第29-32页
   ·讨论第32-33页
第三章 有杀虫活性毒蛋白的筛选第33-42页
   ·材料与方法第33-35页
     ·材料第33页
       ·供试幼虫第33页
       ·试剂及其它材料第33页
       ·设备第33页
     ·方法第33-35页
       ·Bradford法测蛋白提耿液中蛋白的含量第33-34页
         ·配制试剂第33页
         ·拟合标准曲线方程第33页
         ·测样品的蛋白含量第33-34页
       ·筛选有杀虫活性的毒蛋白的生物测定第34-35页
         ·试虫的预处理第34页
         ·初筛的生物测定第34页
         ·复筛的生物测定第34-35页
   ·结果与分析第35-41页
     ·提取的蛋白样品中的蛋白含量第35页
     ·全蛋白提取液的初筛生测结果第35页
     ·单一蛋白的初筛生测结果第35-40页
     ·高毒性蛋白的复筛生测结果第40页
     ·试虫经毒蛋白处理后表现的症状第40-41页
   ·讨论第41-42页
第四章 毒蛋白Bb36W-D的性质及作用于天牛后的酯酶同工酶分析第42-52页
   ·材料与方法第42-47页
     ·材料第42页
       ·主要试剂第42页
       ·其它材料第42页
       ·主要设备第42页
     ·方法第42-47页
       ·蛋白分子量的测定第42-43页
         ·SDS-PAGE凝胶液配制第42-43页
         ·过程第43页
       ·蛋白等电点的测定第43-46页
         ·等电聚焦电泳凝胶液配制第44页
         ·过程第44-46页
       ·毒蛋白Bb36W-D氨基酸成份及含量分析第46页
       ·毒蛋白Bb36W-D的N-末端氨基酸序列分析第46-47页
         ·蛋白的PAGE电泳第46页
         ·蛋白转膜第46-47页
         ·N-末端氨基酸序列测定第47页
       ·Bb36W-D作用天牛后的酯酶同工酶分析第47页
         ·酯酶的提取第47页
         ·电泳第47页
         ·染色第47页
   ·结果与分析第47-50页
     ·分子量的测定第47-48页
     ·等电点的测定第48页
     ·氨基酸组分及含量分析第48-49页
     ·N-末端起始的氨基酸序列分析第49页
     ·作用于松墨天牛幼虫后的酯酶同工酶分析第49-50页
   ·讨论第50-52页
结论第52-53页
参考文献第53-59页
附件第59-67页
 附件1 论文缩略词及部分中英对照词第59-60页
 附件2 部分实验图片第60-67页
作者简介第67页

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