中文摘要 | 第1-8页 |
英文摘要 | 第8-10页 |
前言 | 第10-11页 |
文献综述 | 第11-34页 |
1 作物杂种优势及其遗传学基础 | 第11-12页 |
1.1 显性假说 | 第11页 |
1.2 超显性假说 | 第11-12页 |
1.3 基因网络系统与杂种优势 | 第12页 |
2 植物雄性不育的遗传机制 | 第12-14页 |
3 水稻杂种优势的利用 | 第14-18页 |
3.1 我国水稻杂种优势的利用 | 第14-17页 |
3.1.1 三系法杂交水稻 | 第14-15页 |
3.1.2 两系法杂交水稻 | 第15-17页 |
3.2 国外杂交水稻杂种优势的利用 | 第17-18页 |
3.2.1 三系法杂交水稻 | 第17页 |
3.2.2 两系法杂交水稻 | 第17-18页 |
4 水稻雄性不育系的分类 | 第18-20页 |
4.1 核质互作不育系 | 第18页 |
4.2 光、温敏核不育系 | 第18-20页 |
4.2.1 光敏型核不育系 | 第18-19页 |
4.2.2 温敏型核不育系 | 第19页 |
4.2.3 光温互作型不育系 | 第19-20页 |
5 光、温敏核雄性不育水稻的育性转换特征 | 第20-21页 |
5.1 光敏核雄性不育水稻的育性转换 | 第20页 |
5.2 温敏核雄性不育水稻的育性转换 | 第20-21页 |
6 植物雄性不育的分子生物学研究进展 | 第21-23页 |
6.1 植物细胞质雄性不育的分子生物学研究进展 | 第21-22页 |
6.2 植物细核雄性不育的分子生物学研究进展 | 第22-23页 |
7 水稻光、温敏核雄性不育的分子生物学研究进展 | 第23-25页 |
7.1 水稻光敏核雄性不育分子生物学研究进展 | 第23-24页 |
7.2 水稻温敏核雄性不育分子生物学研究进展 | 第24-25页 |
8 基因工程创造植物雄性不育系的研究进展 | 第25-28页 |
8.1 破坏绒毡层和降解胼底质创造植物雄性不育性状 | 第25-26页 |
8.2 利用RNA酶创造植物雄性不育性状 | 第26页 |
8.3 利用职权反义基因技术创造植物雄性不育性状 | 第26-28页 |
9 差异基因克隆的主要方法 | 第28-30页 |
10 SSH技术的基本原理及其应用 | 第30-34页 |
10.1 SSH技术的基本原理和基本流程 | 第30-31页 |
10.2 SSH技术的应用研究进展 | 第31-34页 |
Ⅰ 利用SSH技术克隆温敏核雄性不育水稻育性转换相关基因 | 第34-46页 |
1 材料与方法 | 第34-42页 |
1.1 材料与试剂 | 第34页 |
1.2 方法 | 第34-42页 |
1.2.1 水稻幼穗总RNA的提取 | 第34-35页 |
1.2.2 mRNA的纯化 | 第35页 |
1.2.3 抑制消减杂交 | 第35-40页 |
1.2.4 消减eDNA文库的构建 | 第40-41页 |
1.2.5 质粒DNA的微量提取 | 第41页 |
1.2.6 重组子的酶切鉴定 | 第41-42页 |
1.2.7 DNA序列测定与分析 | 第42页 |
2 结果与分析 | 第42-46页 |
2.1 Tb7s在两种温度条件下育性差别比较 | 第42页 |
2.2 抑制消减杂交后PCR扩增cDNA片段结果 | 第42-43页 |
2.3 消减效率的鉴定 | 第43页 |
2.4 cDNA消减文库的构建 | 第43-44页 |
2.5 cDNA消减文库重组子酶切鉴定 | 第44页 |
2.6 阳性克隆的DNA序列分析 | 第44-46页 |
Ⅱ 候选cDNA片段在可育幼穗和不育幼穗中的差异表达分析 | 第46-49页 |
1 材料与方法 | 第47-48页 |
1.1 材料与试剂 | 第47页 |
1.2 方法 | 第47-48页 |
1.2.1 水稻幼穗总RNA的提取 | 第47页 |
1.2.2 cDNA的合成 | 第47页 |
1.2.3 PCR扩增反应 | 第47-48页 |
2 结果与分析 | 第48-49页 |
2.1 参照物(水稻ubiquitin基因)的RT-PCR定量分析 | 第48-49页 |
2.2 候选cDNA片段差异表达的检测分析结果 | 第49页 |
Ⅲ RACE克隆S2全长cDNA和水稻基因组Southern杂交 | 第49-59页 |
1 材料与方法 | 第49-57页 |
1.1 材料与试剂 | 第49-50页 |
1.2 方法 | 第50-57页 |
1.2.1 用RACE技术克隆S2全长cDNA。 | 第50-54页 |
1.2.2 Tb7S基因组DNA的Southern杂交 | 第54-57页 |
2 结果与分析 | 第57-59页 |
2.1 5’-RACE扩增结果 | 第57页 |
2.2 3’-RACE扩增结果 | 第57页 |
2.3 5’-RACE和3’-RACE扩增片段序列测定 | 第57页 |
2.4 S2全长cDNA结构分析 | 第57-58页 |
2.5 水稻基因组DNA的Southern杂交结果 | 第58-59页 |
Ⅳ 遗传转化水稻的RNAi植物表达载体的构建 | 第59-65页 |
1 材料与方法 | 第59-64页 |
1.1 材料 | 第59页 |
1.2 方法 | 第59-64页 |
1.2.1 pCAMBIA2301的改造 | 第59-60页 |
1.2.2 中间载体pCAMBIA1301A的构建 | 第60页 |
1.2.3 中间载体pCAMBIA1301A-A的构建 | 第60-61页 |
1.2.4 中间载体pCAMBIA1301A-A-S的构建 | 第61页 |
1.2.5 植物表达载体pCAMBIA1301A-P-A-S的构建 | 第61-64页 |
2 结果与分析 | 第64-65页 |
Ⅴ 农杆菌EHA105介导的水稻遗传转化 | 第65-67页 |
1 材料与方法 | 第65-66页 |
1.1 材料与试剂 | 第65页 |
1.2 方法 | 第65-66页 |
1.2.1 质粒pCAMBIA1301A-P-A-S导入农杆菌EHA105 | 第65-66页 |
1.2.2 农杆菌EHA105介导的水稻遗传转化 | 第66页 |
2 结果与分析 | 第66-67页 |
Ⅵ 讨论 | 第67-68页 |
Ⅶ 结论 | 第68-69页 |
参考文献 | 第69-76页 |
致谢 | 第76页 |