| 摘要 | 第1-8页 |
| Abstract | 第8-9页 |
| 1 前言 | 第9-17页 |
| ·研究意义 | 第9页 |
| ·水稻籽粒灌浆的研究进展 | 第9-11页 |
| ·水稻籽粒灌浆特性 | 第9页 |
| ·水稻籽粒灌浆的生理生态研究 | 第9-10页 |
| ·水稻籽粒灌浆过程中起关键作用的酶 | 第9-10页 |
| ·激素对水稻籽粒灌浆的影响 | 第10页 |
| ·水稻籽粒灌浆分子机制的研究 | 第10-11页 |
| ·电压依赖性离子通道蛋白(VDAC)的研究进展 | 第11-13页 |
| ·VDAC蛋白的结构特点 | 第11-12页 |
| ·VDAC蛋白的定位及功能 | 第12-13页 |
| ·VDAC蛋白定位在线粒体中的运输功能 | 第12页 |
| ·VDAC蛋白定位在线粒体中参与细胞凋亡及对病原体的防御功能 | 第12页 |
| ·定位在其它细胞器上VDAC蛋白的功能 | 第12-13页 |
| ·蛋白质-蛋白质相互作用的研究进展 | 第13-16页 |
| ·蛋白质-蛋白质相互作用的研究背景 | 第13页 |
| ·蛋白质-蛋白质相互作用的研究方法与技术 | 第13-16页 |
| ·酵母双杂交技术 | 第13-14页 |
| ·免疫共沉淀技术 | 第14页 |
| ·GST pull down技术 | 第14-15页 |
| ·Far Western技术 | 第15-16页 |
| ·计算机预测蛋白质-蛋白质相互作用技术 | 第16页 |
| ·本课题研究内容和意义 | 第16-17页 |
| 2 材料与方法 | 第17-27页 |
| ·材料 | 第17页 |
| ·供试材料 | 第17页 |
| ·菌株与质粒 | 第17页 |
| ·主要试剂及试剂盒 | 第17页 |
| ·PCR 引物 | 第17页 |
| ·试验方法 | 第17-27页 |
| ·Os vdac基因的克隆 | 第17-21页 |
| ·Os vdac基因表达载体的构建 | 第21-23页 |
| ·pET32a-vdac基因表达载体的构建 | 第21-23页 |
| ·PGEX-6p-1-vdac基因表达载体的构建 | 第23页 |
| ·VDAC融合蛋白在大肠杆菌中的可溶性高效表达与纯化 | 第23-24页 |
| ·VDAC融合蛋白(pET32a-VDAC)的表达与纯化 | 第23页 |
| ·VDAC融合蛋白(PGEX-6p-1-VDAC)的表达与纯化 | 第23-24页 |
| ·抗 VDAC蛋白的多克隆抗体的制备 | 第24-25页 |
| ·VDAC相互作用蛋白的获得与质谱鉴定 | 第25-27页 |
| ·免疫共沉淀（Co-Ip）捕捉与 VDAC相互作用的蛋白 | 第25页 |
| ·GST pull down 钓取与 VDAC相互作用的蛋白 | 第25-26页 |
| ·VDAC互作蛋白的胰蛋白酶消化和蛋白质谱鉴定 | 第26-27页 |
| 3 结果与分析 | 第27-41页 |
| ·Os vdac 基因的克隆和表达载体的构建 | 第27-32页 |
| ·Os vdac 基因片段的克隆 | 第27-30页 |
| ·表达载体pET32a-vdac和PGEX-6p-1-vdac的构建 | 第30-32页 |
| ·表达载体pET32a-vdac的构建 | 第30-31页 |
| ·表达载体PGEX-6p-1-vdac的构建 | 第31-32页 |
| ·VDAC融合蛋白在大肠杆菌中的可溶性高效表达与纯化 | 第32-34页 |
| ·His-VDAC融合蛋白的高效表达与纯化 | 第32-33页 |
| ·GST-VDAC融合蛋白的高效表达与纯化 | 第33-34页 |
| ·抗 VDAC蛋白的多克隆抗体的制备与验证 | 第34-35页 |
| ·小鼠的免疫和血清效价的测定 | 第34-35页 |
| ·Western blot验证抗VDAC蛋白的多克隆抗体 | 第35页 |
| ·VDAC相互作用蛋白的获得与质谱鉴定 | 第35-41页 |
| ·运用免疫共沉淀技术（Co-Ip）捕捉与VDAC相互作用的蛋白质 | 第35-38页 |
| ·运用 GST pull-down 技术钓取与VDAC相互作用的蛋白质 | 第38-41页 |
| 4 讨论 | 第41-44页 |
| 5 展望 | 第44-45页 |
| 参考文献 | 第45-50页 |
| 附录 | 第50-53页 |
| 致谢 | 第53页 |
