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草鱼(Ctenopharyngodon idella)白细胞介素-8的克隆与鉴定

中文摘要第1-6页
Abstract第6-13页
前言第13-15页
文献综述第15-28页
 一 鱼类免疫系统的研究进展第15-22页
  1 鱼类的免疫器官第15-16页
  2 鱼类的免疫细胞第16-17页
  3 鱼类的体液免疫因子第17-22页
   ·鱼类的溶菌酶第17页
   ·鱼类的补体第17-18页
   ·鱼类的免疫球蛋白第18页
   ·鱼类的 C 反应蛋白第18页
   ·鱼类的细胞因子第18-22页
     ·白细胞介素第18-20页
     ·趋化性细胞因子第20页
     ·肿瘤坏死因子第20页
     ·干扰素第20-22页
 二 鱼类白细胞介素 8 的研究进展第22-28页
  1 IL-8 的产生及其分子结构第22-23页
   ·人类的 IL-8第22页
   ·鱼类的 IL-8第22-23页
  2 IL-8 的信号转导第23-24页
   ·人类的 CXC 受体第23-24页
   ·鱼类的 IL-8 受体第24页
  3 生物学功能与机理第24-26页
   ·人类 IL-8第24-26页
     ·趋化中性粒细胞第25-26页
     ·趋化碱性粒细胞第26页
     ·趋化 T 细胞第26页
   ·鱼类 IL-8第26页
  4 本研究的目的与意义第26-28页
第一章 草鱼白细胞介素-8 的分子克隆和原核表达第28-50页
 1 材料与方法第28-40页
   ·材料第28-30页
     ·实验鱼第28页
     ·菌株与质粒第28页
     ·试剂和耗材第28-30页
     ·引物与序列测定第30页
     ·仪器设备第30页
   ·方法第30-39页
     ·实验器具的准备第30-31页
     ·RNA 抽提第31页
     ·用于做 RACE 和 IL-8 完整编码区克隆的 cDNA 的合成 ..第31-32页
     ·草鱼 DNA 的提取第32页
     ·草鱼 IL-8 的分子克隆第32-36页
     ·IL-8 的原核表达第36-39页
   ·结果分析第39-40页
     ·IL-8 cDNA 全长的分析第39页
     ·IL-8 基因全长的分析第39-40页
     ·原核表达结果的分析第40页
 2 结果第40-47页
   ·IL-8 完整 cDNA第40-45页
     ·’RACE 和 5’RACE第40页
     ·序列拼接与分析第40-45页
   ·IL-8 全基因序列第45-46页
     ·IL-8 全基因序列的分析第45页
     ·IL-8 全基因序列的分析第45-46页
   ·IL-8 原核表达第46-47页
     ·原核表达质粒的构建第46-47页
     ·pET32a+-IL-8 的诱导表达第47页
 3 讨论第47-50页
第二章 草鱼白细胞介素-8 功能的初步鉴定第50-66页
 第一节 草鱼 IL-8 的表达模式研究第50-57页
  1 材料与方法第50-53页
   ·材料第50-51页
     ·实验动物和细菌第50页
     ·试剂和耗材第50-51页
     ·引物第51页
     ·仪器设备第51页
   ·方法第51-53页
     ·草鱼的实验处理第51-52页
     ·提取 RNA、去除 DNA 并逆转录第52-53页
     ·实时荧光定量 PCR第53页
   ·结果分析第53页
  2 结果第53-54页
   ·IL-8 和β-actin 产物单一性的检测第53页
   ·IL-8 和β-actin 扩增效率的检测第53-54页
   ·各组织及实验处理后 IL-8 的表达差异第54页
  3 讨论第54-57页
 第二节 嗜水气单胞菌感染后草鱼肠道炎症反应第57-66页
  1 材料与方法第57-61页
   ·材料第57-58页
     ·实验鱼第57页
     ·试剂和耗材第57页
     ·药品配制第57-58页
     ·仪器设备第58页
   ·方法第58-61页
     ·石蜡切片的取材与制作第58-61页
     ·电镜样品的取材与制作第61页
   ·结果分析第61页
  2 结果第61-62页
   ·扫描电镜的结果第61-62页
   ·肠道切片的结果第62页
  3 讨论第62-66页
全文结论第66-67页
参考文献第67-79页
攻读学位期间本人公开发表的论著、论文第79-80页
致谢第80-81页

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