中文摘要 | 第1-7页 |
Abstract | 第7-9页 |
图表目录 | 第9-10页 |
缩写与简称 | 第10-11页 |
第一部分 前言 | 第11-25页 |
·铜绿假单胞菌及其致病性 | 第11-12页 |
·铜绿假单胞菌的耐药性 | 第12-16页 |
·耐药性的获得途径 | 第12-13页 |
·铜绿假单胞菌的耐药机制 | 第13-16页 |
·抗生素的分类及生物学作用 | 第16-17页 |
·抗生素的分类 | 第16-17页 |
·抗生素的生物学作用 | 第17页 |
·细菌群体感应系统 | 第17-21页 |
·群体感应系统的定义及发现 | 第17-18页 |
·群体感应系统的调控机制 | 第18-20页 |
·铜绿假单胞菌的群体感应系统 | 第20-21页 |
·铜绿假单胞菌中溶血素基因的表达 | 第21-24页 |
·溶血素 | 第21-22页 |
·磷脂酶 | 第22-24页 |
·研究目的和意义 | 第24-25页 |
第二部分 实验材料和方法 | 第25-40页 |
·实验材料 | 第25-28页 |
·菌株和质粒 | 第25-26页 |
·培养基的配置 | 第26-27页 |
·试剂 | 第27页 |
·仪器 | 第27-28页 |
·基本实验方法 | 第28-30页 |
·质粒的小量提取 | 第28-29页 |
·细菌基因组DNA的提取 | 第29-30页 |
·感受态细胞的制备 | 第30页 |
·电转化 | 第30页 |
·耐药性相关基因的筛选及鉴定 | 第30-36页 |
·转座突变 | 第30-32页 |
·各种抗生素对铜绿假单胞菌最小抑制浓度(MIC)的测定 | 第32-33页 |
·LB固体培养基中铜绿假单胞菌MIC的测定 | 第32页 |
·LB液体培养基中铜绿假单胞菌MIC的测定 | 第32-33页 |
·与抗生素耐药性有关的转座突变体的筛选 | 第33-34页 |
·固体培养基中突变体的初步筛选 | 第33-34页 |
·液体培养基中突变体的复筛及突变体MIC的测定 | 第34页 |
·随机PCR及测序 | 第34-36页 |
·随机PCR原理 | 第34-35页 |
·随机PCR反应程序 | 第35-36页 |
·转座子插入位点的确定 | 第36页 |
·PA4350基因的研究方法 | 第36-38页 |
·PA4350基因对毒性因子表达的调节 | 第36-38页 |
·PA4350基因对QS系统的调节 | 第38页 |
·PA4350基因对溶血素表达的影响 | 第38页 |
·溶血素与QS系统关系的研究方法 | 第38-40页 |
·QS系统对溶血素表达的影响 | 第38-39页 |
·QS系统对plcH基因表达的影响 | 第39-40页 |
第三部分 抗生素耐药性相关基因的筛选及鉴定 | 第40-53页 |
·实验结果 | 第40-51页 |
·转座突变体文库的构建 | 第40页 |
·抗生素的选择及对铜绿假单胞菌最小抑制浓度(MIC)的测定 | 第40-41页 |
·抗生素敏感突变体和抗性突变体的筛选 | 第41-43页 |
·抗生素敏感突变体的筛选 | 第42页 |
·抗生素抗性突变体的筛选 | 第42-43页 |
·突变体中转座子插入位点的确定 | 第43-51页 |
·讨论 | 第51-53页 |
第四部分 PA4350和溶血素与群体感应系统关系的研究 | 第53-63页 |
·PA4350实验结果 | 第53-59页 |
·PA4350基因对毒性因子表达的调节 | 第55-58页 |
·PA4350基因对QS系统的调节 | 第58-59页 |
·PA4350基因对溶血素表达的影响 | 第59页 |
·溶血素与群体感应系统关系的实验结果 | 第59-62页 |
·QS系统对溶血素表达的影响 | 第59-61页 |
·QS系统对plcH基因表达的影响 | 第61-62页 |
·讨论 | 第62-63页 |
参考文献 | 第63-69页 |
致谢 | 第69页 |