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铜绿假单胞菌耐药性相关基因的筛选鉴定及群体感应系统相关研究

中文摘要第1-7页
Abstract第7-9页
图表目录第9-10页
缩写与简称第10-11页
第一部分 前言第11-25页
   ·铜绿假单胞菌及其致病性第11-12页
   ·铜绿假单胞菌的耐药性第12-16页
     ·耐药性的获得途径第12-13页
     ·铜绿假单胞菌的耐药机制第13-16页
   ·抗生素的分类及生物学作用第16-17页
     ·抗生素的分类第16-17页
     ·抗生素的生物学作用第17页
   ·细菌群体感应系统第17-21页
     ·群体感应系统的定义及发现第17-18页
     ·群体感应系统的调控机制第18-20页
     ·铜绿假单胞菌的群体感应系统第20-21页
   ·铜绿假单胞菌中溶血素基因的表达第21-24页
     ·溶血素第21-22页
     ·磷脂酶第22-24页
   ·研究目的和意义第24-25页
第二部分 实验材料和方法第25-40页
   ·实验材料第25-28页
     ·菌株和质粒第25-26页
     ·培养基的配置第26-27页
     ·试剂第27页
     ·仪器第27-28页
   ·基本实验方法第28-30页
     ·质粒的小量提取第28-29页
     ·细菌基因组DNA的提取第29-30页
     ·感受态细胞的制备第30页
     ·电转化第30页
   ·耐药性相关基因的筛选及鉴定第30-36页
     ·转座突变第30-32页
     ·各种抗生素对铜绿假单胞菌最小抑制浓度(MIC)的测定第32-33页
       ·LB固体培养基中铜绿假单胞菌MIC的测定第32页
       ·LB液体培养基中铜绿假单胞菌MIC的测定第32-33页
     ·与抗生素耐药性有关的转座突变体的筛选第33-34页
       ·固体培养基中突变体的初步筛选第33-34页
       ·液体培养基中突变体的复筛及突变体MIC的测定第34页
     ·随机PCR及测序第34-36页
       ·随机PCR原理第34-35页
       ·随机PCR反应程序第35-36页
       ·转座子插入位点的确定第36页
   ·PA4350基因的研究方法第36-38页
     ·PA4350基因对毒性因子表达的调节第36-38页
     ·PA4350基因对QS系统的调节第38页
     ·PA4350基因对溶血素表达的影响第38页
   ·溶血素与QS系统关系的研究方法第38-40页
     ·QS系统对溶血素表达的影响第38-39页
     ·QS系统对plcH基因表达的影响第39-40页
第三部分 抗生素耐药性相关基因的筛选及鉴定第40-53页
   ·实验结果第40-51页
     ·转座突变体文库的构建第40页
     ·抗生素的选择及对铜绿假单胞菌最小抑制浓度(MIC)的测定第40-41页
     ·抗生素敏感突变体和抗性突变体的筛选第41-43页
       ·抗生素敏感突变体的筛选第42页
       ·抗生素抗性突变体的筛选第42-43页
     ·突变体中转座子插入位点的确定第43-51页
   ·讨论第51-53页
第四部分 PA4350和溶血素与群体感应系统关系的研究第53-63页
   ·PA4350实验结果第53-59页
     ·PA4350基因对毒性因子表达的调节第55-58页
     ·PA4350基因对QS系统的调节第58-59页
     ·PA4350基因对溶血素表达的影响第59页
   ·溶血素与群体感应系统关系的实验结果第59-62页
     ·QS系统对溶血素表达的影响第59-61页
     ·QS系统对plcH基因表达的影响第61-62页
   ·讨论第62-63页
参考文献第63-69页
致谢第69页

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