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铜绿假单胞菌吩嗪合成新调节基因的研究

中文摘要第1-4页
ABSTRACT第4-7页
图表目录第7-8页
中英文缩略词对照表第8-9页
第一部分 综述第9-20页
   ·铜绿假单胞菌第9-11页
     ·铜绿假单胞菌的致病性第9-10页
     ·铜绿假单胞菌的抗药性第10-11页
   ·抗生素的基本特性及其生物活性第11-13页
   ·细菌的群体感应系统第13-16页
     ·细菌群体感应系统的信号分子第13页
     ·铜绿假单胞菌的QS系统第13-16页
   (1)铜绿假单胞菌中QS系统组成第13-14页
   (2)QscR与las和rhl系统的作用第14页
   (3)QS系统在感染机制中的作用第14-15页
   (4)研究铜绿假单胞菌QS系统的意义第15-16页
   ·吩嗪的活性及其合成调节途径第16-18页
     ·吩嗪的致病性研究第17页
     ·吩嗪类抗生素第17-18页
     ·吩嗪的合成及调节第18页
   ·研究的内容和目的第18-20页
第二部分 实验材料和方法第20-33页
   ·试验材料第20-23页
     ·菌株和质粒第20-21页
     ·培养基的配置第21-22页
     ·试剂第22-23页
     ·仪器第23页
   ·实验方法第23-33页
     ·质粒的小量提取第23-24页
     ·质粒或DNA片断的酶切和连接第24-25页
   (1)DNA酶切反应第24-25页
   (2)粘性末端连接第25页
     ·感受态细胞的制备第25页
     ·电转化第25-26页
     ·细菌基因组DNA的提取第26页
     ·启动子-报道子载体的构建第26-28页
     ·次抑制浓度四环素条件下phzA1在野生型PAO1、突变体中的发光值测定第28页
     ·绿脓菌素含量的测定第28页
     ·随机PCR及基因测序确定转座子插入位点第28-29页
     ·次抑制浓度的不同抗生素条件下报道子的发光值测定第29-30页
     ·突变体PAK0207的构建第30-32页
   (1)三亲株杂交供体菌质粒pEX18Tc-0207lacz的构建第30页
   (2)三亲株杂交构建突变体第30-32页
     ·次抑制浓度四环素条件下QS相关基因在野生型和突变体中的发光值测定第32-33页
第三部分 实验结果第33-42页
   ·次抑制浓度抗生素对phzA1基因表达的调节作用第33-34页
   ·次抑制浓度四环素条件下phzA1操纵子在转座突变体中的表达第34-36页
   ·突变基因确定第36页
   ·野生型及突变体中绿脓菌素含量的测定第36-37页
   ·突变体PAK0207的构建第37-38页
   ·次抑制浓度四环素条件下phzA1操纵子在PAK0207中的表达第38页
   ·PA0487基因与QS的关系第38-42页
第四部分 讨论第42-44页
参考文献第44-49页
附录第49-57页
致谢第57页

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