中文摘要 | 第1-4页 |
ABSTRACT | 第4-7页 |
图表目录 | 第7-8页 |
中英文缩略词对照表 | 第8-9页 |
第一部分 综述 | 第9-20页 |
·铜绿假单胞菌 | 第9-11页 |
·铜绿假单胞菌的致病性 | 第9-10页 |
·铜绿假单胞菌的抗药性 | 第10-11页 |
·抗生素的基本特性及其生物活性 | 第11-13页 |
·细菌的群体感应系统 | 第13-16页 |
·细菌群体感应系统的信号分子 | 第13页 |
·铜绿假单胞菌的QS系统 | 第13-16页 |
(1)铜绿假单胞菌中QS系统组成 | 第13-14页 |
(2)QscR与las和rhl系统的作用 | 第14页 |
(3)QS系统在感染机制中的作用 | 第14-15页 |
(4)研究铜绿假单胞菌QS系统的意义 | 第15-16页 |
·吩嗪的活性及其合成调节途径 | 第16-18页 |
·吩嗪的致病性研究 | 第17页 |
·吩嗪类抗生素 | 第17-18页 |
·吩嗪的合成及调节 | 第18页 |
·研究的内容和目的 | 第18-20页 |
第二部分 实验材料和方法 | 第20-33页 |
·试验材料 | 第20-23页 |
·菌株和质粒 | 第20-21页 |
·培养基的配置 | 第21-22页 |
·试剂 | 第22-23页 |
·仪器 | 第23页 |
·实验方法 | 第23-33页 |
·质粒的小量提取 | 第23-24页 |
·质粒或DNA片断的酶切和连接 | 第24-25页 |
(1)DNA酶切反应 | 第24-25页 |
(2)粘性末端连接 | 第25页 |
·感受态细胞的制备 | 第25页 |
·电转化 | 第25-26页 |
·细菌基因组DNA的提取 | 第26页 |
·启动子-报道子载体的构建 | 第26-28页 |
·次抑制浓度四环素条件下phzA1在野生型PAO1、突变体中的发光值测定 | 第28页 |
·绿脓菌素含量的测定 | 第28页 |
·随机PCR及基因测序确定转座子插入位点 | 第28-29页 |
·次抑制浓度的不同抗生素条件下报道子的发光值测定 | 第29-30页 |
·突变体PAK0207的构建 | 第30-32页 |
(1)三亲株杂交供体菌质粒pEX18Tc-0207lacz的构建 | 第30页 |
(2)三亲株杂交构建突变体 | 第30-32页 |
·次抑制浓度四环素条件下QS相关基因在野生型和突变体中的发光值测定 | 第32-33页 |
第三部分 实验结果 | 第33-42页 |
·次抑制浓度抗生素对phzA1基因表达的调节作用 | 第33-34页 |
·次抑制浓度四环素条件下phzA1操纵子在转座突变体中的表达 | 第34-36页 |
·突变基因确定 | 第36页 |
·野生型及突变体中绿脓菌素含量的测定 | 第36-37页 |
·突变体PAK0207的构建 | 第37-38页 |
·次抑制浓度四环素条件下phzA1操纵子在PAK0207中的表达 | 第38页 |
·PA0487基因与QS的关系 | 第38-42页 |
第四部分 讨论 | 第42-44页 |
参考文献 | 第44-49页 |
附录 | 第49-57页 |
致谢 | 第57页 |