| 摘要 | 第1-4页 |
| Abstract | 第4-7页 |
| 第一章 引言 | 第7-12页 |
| ·谷氨酸棒状杆菌遗传操作工具 | 第7-8页 |
| ·基因敲除 | 第8-9页 |
| ·同源重组 | 第8页 |
| ·特异位点重组 | 第8-9页 |
| ·转座重组 | 第9页 |
| ·谷氨酸棒状杆菌中敲除载体研究现状 | 第9-10页 |
| ·立题背景与意义 | 第10-11页 |
| ·课题研究内容 | 第11-12页 |
| 第二章 材料与方法 | 第12-28页 |
| ·实验材料 | 第12-16页 |
| ·菌株、质粒引物及培养条件 | 第12-15页 |
| ·工具酶和试剂 | 第15页 |
| ·主要仪器 | 第15-16页 |
| ·基本操作 | 第16-18页 |
| ·基因组DNA 及质粒提取 | 第16页 |
| ·PCR 反应体系及条件 | 第16页 |
| ·定点突变 | 第16-17页 |
| ·重叠PCR | 第17页 |
| ·寡核苷酸退火连接 | 第17页 |
| ·质粒和PCR 产物的酶切连接 | 第17页 |
| ·感受态细胞的制备及质粒转化 | 第17-18页 |
| ·果聚糖蔗糖酶活性测定 | 第18页 |
| ·整合型载体敲除方法的建立 | 第18-20页 |
| ·果聚糖蔗糖酶活性检测质粒的构建 | 第18-19页 |
| ·谷氨酸棒状杆菌中果聚糖蔗糖酶活性检测 | 第19页 |
| ·敲除质粒pDXW-3-LRaceE 的构建 | 第19页 |
| ·敲除质粒pDXW-3-LRaceE 的应用 | 第19-20页 |
| ·同源重组-特异位点重组敲除系统的构建 | 第20-28页 |
| ·Cre 温敏表达质粒pDTW109 的构建 | 第20-24页 |
| ·pDTW201/pDTW202 的构建 | 第24-25页 |
| ·敲除质粒pDTW301/pDTW302 的构建 | 第25-26页 |
| ·同源重组-特异位点重组敲除系统的的应用 | 第26-28页 |
| 第三章 结果与讨论 | 第28-46页 |
| ·整合型载体敲除方法的建立 | 第28-33页 |
| ·果聚糖蔗糖酶活性检测质粒的构建及其活性检测 | 第28-30页 |
| ·敲除质粒pDXW-3-LRaceE 的构建和应用 | 第30-33页 |
| ·同源重组-特异位点重组敲除系统的构建 | 第33-44页 |
| ·pDTW109 的构建 | 第34-39页 |
| ·pDTW201/pDTW202 的构建 | 第39-40页 |
| ·敲除质粒pDTW301 和pDTW302 的构建 | 第40-41页 |
| ·同源重组-特异位点重组敲除系统的的应用 | 第41-44页 |
| ·主要结论 | 第44-45页 |
| ·展望 | 第45-46页 |
| 致谢 | 第46-47页 |
| 参考文献 | 第47-52页 |
| 附录：作者在攻读硕士学位期间发表的论文 | 第52页 |