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牛膝多糖对仔猪各肠段微生物多样性影响的研究

摘要第1-7页
Abstract第7-9页
英文缩略语第9-14页
第一章 绪论第14-20页
 1 研究目的与意义第14页
 2 国内外研究进展第14-19页
   ·牛膝多糖国内外研究进展第14-16页
   ·测定D-木糖吸收率评定肠道吸收能力方法的研究进展第16页
   ·大肠杆菌脂多糖(PLS)建立应激模型的研究进展第16-17页
   ·PCR-变性梯度电泳法研究肠道微生物多样性的研究进展第17-18页
   ·荧光定量PCR法测定特定细菌的研究进展第18-19页
 3 研究内容和方法第19-20页
第二章 牛膝多糖对断奶仔猪肠道吸收功能的影响第20-26页
 1 材料与方法第20-23页
   ·试验材料第20-21页
     ·试验动物与场地第20页
     ·试剂及仪器第20-21页
   ·试验分组设计与日粮配方第21-22页
   ·试验猪的饲养管理第22页
   ·样品采集与指标测定第22-23页
   ·数据统计分析第23页
 2 结果与分析第23-24页
   ·注射脂多糖后的症状第23页
   ·各组间血液中D-木糖含量的比较第23-24页
 3 讨论第24-25页
   ·LPS刺激对断奶仔猪血浆D-木糖含量的影响第24-25页
   ·添加牛膝多糖对LPS刺激断奶仔猪血浆D-木糖含量的影响第25页
 4 本章小结第25-26页
第三章 用PCR-变性梯度电泳法检测牛膝多糖对断奶仔猪肠道微生物多样性的影响第26-39页
 1 方法与材料第26-29页
   ·试验材料第26-27页
   ·实验设计与饲养管理第27页
   ·试验所用试剂及仪器第27-29页
     ·试验所用试剂第27-28页
     ·试验所用主要仪器第28-29页
 2 试验操作步骤第29-32页
   ·样品的采集第29页
   ·总DNA的提取第29-30页
   ·样品中细菌总DNA的检侧第30页
   ·PCR反应最佳体系和最佳反应条件的确立第30页
     ·PCR反应体系的优化第30页
     ·PCR反应条件的优化第30页
   ·各肠道菌群的PCR扩增第30页
   ·DNA片段的纯化和变性梯度凝胶电泳检测第30-31页
   ·回收条带DNA片段序列的分析第31页
   ·变性梯度电泳的条件优化第31-32页
     ·凝胶变性梯度范围和电压的确定第31页
     ·变性梯度电泳上样样品的确定第31页
     ·确定凝胶中丙烯酰胺的浓度第31页
     ·变性梯度电泳时间的确定第31-32页
   ·数据统计---变性梯度电泳图谱分析第32页
 3 试验结果第32-37页
   ·样品总DNA提取结果第32页
   ·样品DNA的PCR扩增结果第32-35页
     ·PCR反应体系及反应条件优化结果第32-34页
     ·样品DNA的PCR扩增的结果第34-35页
   ·变性梯度电泳分析结果第35-37页
     ·注射LPS 3h后,断奶仔猪相应肠道内容物变性梯度电泳分析第35-36页
     ·注射LPS24h后,断奶仔猪相应肠道内容物变性梯度电泳分析第36-37页
 4 讨论第37-38页
 5 本章小结第38-39页
第四章 利用荧光定量PCR反应对几种细菌进行定量研究第39-52页
 1 试验材料第39-41页
   ·主要试剂与仪器第40页
     ·主要试剂第40页
     ·主要仪器第40页
   ·特异性引物序列及退火温度第40-41页
 2 试验方法第41-42页
   ·动物饲养试验第41页
   ·采样与样品处理、DNA提取第41页
   ·荧光定量PCR分析第41页
   ·数据统计与分析第41-42页
 3. 实验结果第42-50页
   ·三种菌体标准曲线第42-47页
   ·样品中细菌定量结果第47-50页
 4 讨论第50-51页
 5 本章小结第51-52页
第五章 总结第52-54页
 1 各章所得结论第52页
 2 试验创新之处第52-54页
参考文献第54-59页
致谢第59-60页
作者简介第60页

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