摘要 | 第1-7页 |
Abstract | 第7-9页 |
英文缩略语 | 第9-14页 |
第一章 绪论 | 第14-20页 |
1 研究目的与意义 | 第14页 |
2 国内外研究进展 | 第14-19页 |
·牛膝多糖国内外研究进展 | 第14-16页 |
·测定D-木糖吸收率评定肠道吸收能力方法的研究进展 | 第16页 |
·大肠杆菌脂多糖(PLS)建立应激模型的研究进展 | 第16-17页 |
·PCR-变性梯度电泳法研究肠道微生物多样性的研究进展 | 第17-18页 |
·荧光定量PCR法测定特定细菌的研究进展 | 第18-19页 |
3 研究内容和方法 | 第19-20页 |
第二章 牛膝多糖对断奶仔猪肠道吸收功能的影响 | 第20-26页 |
1 材料与方法 | 第20-23页 |
·试验材料 | 第20-21页 |
·试验动物与场地 | 第20页 |
·试剂及仪器 | 第20-21页 |
·试验分组设计与日粮配方 | 第21-22页 |
·试验猪的饲养管理 | 第22页 |
·样品采集与指标测定 | 第22-23页 |
·数据统计分析 | 第23页 |
2 结果与分析 | 第23-24页 |
·注射脂多糖后的症状 | 第23页 |
·各组间血液中D-木糖含量的比较 | 第23-24页 |
3 讨论 | 第24-25页 |
·LPS刺激对断奶仔猪血浆D-木糖含量的影响 | 第24-25页 |
·添加牛膝多糖对LPS刺激断奶仔猪血浆D-木糖含量的影响 | 第25页 |
4 本章小结 | 第25-26页 |
第三章 用PCR-变性梯度电泳法检测牛膝多糖对断奶仔猪肠道微生物多样性的影响 | 第26-39页 |
1 方法与材料 | 第26-29页 |
·试验材料 | 第26-27页 |
·实验设计与饲养管理 | 第27页 |
·试验所用试剂及仪器 | 第27-29页 |
·试验所用试剂 | 第27-28页 |
·试验所用主要仪器 | 第28-29页 |
2 试验操作步骤 | 第29-32页 |
·样品的采集 | 第29页 |
·总DNA的提取 | 第29-30页 |
·样品中细菌总DNA的检侧 | 第30页 |
·PCR反应最佳体系和最佳反应条件的确立 | 第30页 |
·PCR反应体系的优化 | 第30页 |
·PCR反应条件的优化 | 第30页 |
·各肠道菌群的PCR扩增 | 第30页 |
·DNA片段的纯化和变性梯度凝胶电泳检测 | 第30-31页 |
·回收条带DNA片段序列的分析 | 第31页 |
·变性梯度电泳的条件优化 | 第31-32页 |
·凝胶变性梯度范围和电压的确定 | 第31页 |
·变性梯度电泳上样样品的确定 | 第31页 |
·确定凝胶中丙烯酰胺的浓度 | 第31页 |
·变性梯度电泳时间的确定 | 第31-32页 |
·数据统计---变性梯度电泳图谱分析 | 第32页 |
3 试验结果 | 第32-37页 |
·样品总DNA提取结果 | 第32页 |
·样品DNA的PCR扩增结果 | 第32-35页 |
·PCR反应体系及反应条件优化结果 | 第32-34页 |
·样品DNA的PCR扩增的结果 | 第34-35页 |
·变性梯度电泳分析结果 | 第35-37页 |
·注射LPS 3h后,断奶仔猪相应肠道内容物变性梯度电泳分析 | 第35-36页 |
·注射LPS24h后,断奶仔猪相应肠道内容物变性梯度电泳分析 | 第36-37页 |
4 讨论 | 第37-38页 |
5 本章小结 | 第38-39页 |
第四章 利用荧光定量PCR反应对几种细菌进行定量研究 | 第39-52页 |
1 试验材料 | 第39-41页 |
·主要试剂与仪器 | 第40页 |
·主要试剂 | 第40页 |
·主要仪器 | 第40页 |
·特异性引物序列及退火温度 | 第40-41页 |
2 试验方法 | 第41-42页 |
·动物饲养试验 | 第41页 |
·采样与样品处理、DNA提取 | 第41页 |
·荧光定量PCR分析 | 第41页 |
·数据统计与分析 | 第41-42页 |
3. 实验结果 | 第42-50页 |
·三种菌体标准曲线 | 第42-47页 |
·样品中细菌定量结果 | 第47-50页 |
4 讨论 | 第50-51页 |
5 本章小结 | 第51-52页 |
第五章 总结 | 第52-54页 |
1 各章所得结论 | 第52页 |
2 试验创新之处 | 第52-54页 |
参考文献 | 第54-59页 |
致谢 | 第59-60页 |
作者简介 | 第60页 |