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不同年龄雷公藤根际微生物与土壤酶活性的研究

摘要第1-8页
Abstract第8-10页
1.文献综述第10-20页
   ·植物根际研究第10-11页
     ·植物根际土壤微生物研究进展第10页
     ·植物非根际微生物研究进展第10-11页
     ·植物根际与非根际微生物比较第11页
   ·植物土壤酶研究进展第11-13页
     ·根际土壤酶研究第11-12页
     ·非根际土壤酶研究第12页
     ·根际与非根际土壤酶比较第12-13页
   ·土壤酶和微生物相关性第13-14页
     ·植物根际土壤酶和微生物相关性研究进展第13-14页
     ·植物非根际土壤酶和微生物相关性研究进展第14页
   ·微生物培养第14-18页
     ·传统的微生物培养法第14-15页
     ·生物标记法(biomarker)第15页
     ·BIOLOG 鉴定系统第15页
     ·分子生物学方法第15-18页
       ·荧光原位杂交技术(fluorescence in situ hybridization,FISH)第16页
       ·单链构象多态性(Single-Stranded-Conformation Polymorphism,第16-17页
       ·随机扩增片段多态性DNA(Randomly amplified polymorphic DNA,第17页
       ·变性梯度凝胶电泳(DGGE)和温度梯度凝胶电泳(TGGE)第17-18页
   ·DGGE 方法第18-19页
     ·PCR-DGGE 原理第18页
     ·PCR-DGGE 应用第18-19页
     ·PCR-DGGE 技术的优缺点第19页
   ·论文研究的意义及国内外研究现状第19-20页
2. 材料和方法第20-29页
   ·研究区域概况和研究方法第20-21页
     ·研究区概况第20页
     ·试验材料和仪器第20-21页
   ·研究方法第21-22页
     ·土壤的采集第21页
     ·根际土壤真菌的分离第21页
     ·土壤贮藏第21页
     ·土壤酶测定第21页
     ·土壤酶活性分析方法第21-22页
   ·土壤微生物总DNA分析方法第22-23页
     ·土壤总DNA 的提取(SDS-based 法)第22页
     ·土壤 DNA 的纯化第22-23页
   ·细菌DNA分析方法第23-25页
     ·对土壤总DNA 进行细菌16S rDNA 基因的套式PCR 扩增第23页
     ·16S rDNA 第一套PCR 扩增第23-24页
     ·16S rDNA 第二套PCR 扩增第24-25页
     ·细菌PCR 反应产物的变性梯度凝胶电泳(DGGE)第25页
   ·真菌DNA分析方法第25-27页
     ·对土壤总DNA 进行真菌ITS 基因的PCR 扩增第25-26页
     ·真菌PCR反应产物的变性梯度凝胶电泳(DGGE)第26-27页
   ·克隆第27-29页
     ·大肠杆菌DH5a 感受态细胞的制备第27页
     ·连接反应第27-28页
     ·转化第28页
     ·克隆检测与测序第28-29页
3.结果与分析第29-51页
   ·不同年龄雷公藤根际土壤酶活性第29-33页
     ·土壤脲酶活性的变化第29-30页
     ·过氧化氢酶活性的变化第30-31页
     ·土壤转化酶活性的变化第31-32页
     ·土壤磷酸化酶活性的变化第32-33页
   ·土壤DNA 提取结果第33-35页
     ·土壤总DNA 的提取(SDS-based 法)第33-34页
     ·土壤DNA 纯化第34-35页
   ·细菌研究结果第35-43页
     ·细菌16S rDNA 基因的PCR 扩增第35-36页
     ·细菌PCR 反应产物的变性梯度凝胶电泳(DGGE)第36-37页
     ·细菌变性梯度凝胶电泳谱带的回收测序第37-38页
     ·细菌测序比对结果第38-43页
   ·真菌研究结果第43-50页
     ·真菌ITS 基因片段的PCR 扩增第43-44页
     ·真菌PCR 反应产物的变性梯度凝胶电泳(DGGE)第44-45页
     ·真菌变性梯度凝胶电泳谱带的回收测序第45-50页
   ·细菌和真菌的分离和计数第50-51页
4. 讨论第51-54页
   ·真菌和细菌的DGGE 分析第51-52页
   ·真菌和细菌的数量、丰富度和土壤酶的联系第52页
   ·PCR-DGGE 的相关技术探讨第52-54页
     ·首先要取得高质量的土壤总DNA第52-53页
     ·PCR 引物的选择第53页
     ·影响PCR-DGGE 的其他因素第53-54页
5. 结语第54-55页
参考文献第55-63页
致谢第63页

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