| 目录 | 第1-8页 |
| 摘要 | 第8-9页 |
| Abstract | 第9-11页 |
| 一 文献综述 | 第11-25页 |
| 1 双生病毒的发生与危害 | 第11页 |
| 2 双生病毒的分类、寄主及传播 | 第11-13页 |
| 3 双生病毒的基因组结构与功能 | 第13-15页 |
| 4 伴随双生病毒的亚病毒分子 | 第15-17页 |
| 5 双生病毒的侵染过程 | 第17-19页 |
| ·双生病毒的复制 | 第17-18页 |
| ·双生病毒的转录 | 第18页 |
| ·双生病毒的移动 | 第18-19页 |
| ·包壳和传毒 | 第19页 |
| 6 双生病毒基因组的变异与进化 | 第19-22页 |
| ·双生病毒基因组的变异 | 第19-20页 |
| ·突变 | 第19页 |
| ·重组 | 第19-20页 |
| ·属间重组 | 第20页 |
| ·属内重组 | 第20页 |
| ·双生病毒的复合侵染 | 第20-21页 |
| ·双生病毒的进化 | 第21-22页 |
| 7 双生病毒侵染性克隆及其应用 | 第22-23页 |
| 8 本研究的目的和意义 | 第23-25页 |
| 二 材料与方法 | 第25-39页 |
| 1 材料 | 第25-31页 |
| ·病毒 | 第25-26页 |
| ·植物材料 | 第26页 |
| ·菌株和载体 | 第26页 |
| ·抗生素 | 第26页 |
| ·引物及序列 | 第26-28页 |
| ·用于DNA-A测序和克隆的引物及序列 | 第26-27页 |
| ·用于构建FE01-DNA-A的侵染性克隆的引物及序列 | 第27-28页 |
| ·用来构建系统进化树的序列 | 第28-31页 |
| ·用来构建系统进化树的1000bp序列和1700bp序列 | 第28-29页 |
| ·用于DNA-A序列比较和进化分析的病毒 | 第29-31页 |
| ·试剂与仪器 | 第31页 |
| 2 方法 | 第31-39页 |
| ·植物总DNA提取(CTAB法) | 第31页 |
| ·普通PCR技术 | 第31-32页 |
| ·DNA纯化 | 第32-33页 |
| ·DNA克隆技术 | 第33-34页 |
| ·连接 | 第33页 |
| ·感受态细胞的制备方法:CaCl_2制备法 | 第33-34页 |
| ·转化 | 第34页 |
| ·重组克隆的初步筛选 | 第34页 |
| ·提取重组质粒和重组鉴定 | 第34-35页 |
| ·碱裂解法提取质粒 | 第34-35页 |
| ·酶切鉴定重组质粒 | 第35页 |
| ·质粒PCR鉴定 | 第35页 |
| ·序列测定及分析 | 第35页 |
| ·农杆菌的感受态细胞制备方法及侵染性克隆的转化 | 第35-36页 |
| ·农杆菌感受态细胞的制备方法 | 第35页 |
| ·侵染性克隆的转化 | 第35-36页 |
| ·农杆菌介导的植株接种 | 第36页 |
| ·Southern blot分析 | 第36-39页 |
| ·电泳和胶处理 | 第36页 |
| ·转膜 | 第36-37页 |
| ·探针标记 | 第37页 |
| ·预杂交和杂交以及显色 | 第37-39页 |
| 三 结果与分析 | 第39-64页 |
| 1 福建省一品红上双生病毒的分子鉴定 | 第39-57页 |
| ·FZ06,FZ07,FZ08植物总DNA的PCR结果及分析 | 第39-48页 |
| ·FZ06-DNA的PCR结果及分析 | 第39-43页 |
| ·FZ07-DNA的PCR结果及分析 | 第43-45页 |
| ·FZ08-DNA的PCR结果及分析 | 第45-46页 |
| ·三个样品中各个分离物的同源性分析 | 第46-48页 |
| ·侵染一品红的FE01分离物基因组DNA-A结构及其与其他双生病毒的比较 | 第48-49页 |
| ·FE01分离物基因组DNA-A结构分析 | 第48页 |
| ·FE01与其他双生病毒的比较 | 第48-49页 |
| ·侵染一品红的FE02分离物基因组DNA-A结构及其与其他双生病毒的比较 | 第49-51页 |
| ·FE02分离物基因组DNA-A结构分析 | 第49-50页 |
| ·FE02与其他双生病毒的比较 | 第50-51页 |
| ·侵染一品红的FE03分离物基因组DNA-A结构分析与其他双生病毒的比较 | 第51-53页 |
| ·FE03分离物基因组DNA-A结构分析 | 第51-52页 |
| ·FE03与其他双生病毒的比较 | 第52-53页 |
| ·系统进化树的构建 | 第53-55页 |
| ·环状小分子E-Sat-DNA的序列及其结构分析 | 第55-57页 |
| 2 一品红曲叶病毒的致病性测定 | 第57-64页 |
| ·病毒分离物DNA-A侵染性克隆的构建 | 第57-61页 |
| ·农杆菌介导的植物接种及病毒DNA的检测 | 第61-64页 |
| 四 问题与讨论 | 第64-68页 |
| 参考文献 | 第68-75页 |
| 致谢 | 第75页 |
