| 摘要 | 第1-13页 |
| ABSTRACT | 第13-17页 |
| 引言 | 第17-39页 |
| 1 辣椒疫病的研究进展 | 第17-22页 |
| ·辣椒疫病的危害及主要症状 | 第17-18页 |
| ·辣椒疫病的病原学研究 | 第18-19页 |
| ·传播途径及发病规律 | 第19-20页 |
| ·辣椒疫霉病害防治 | 第20-22页 |
| 2 植物真菌致病基因的研究进展 | 第22-26页 |
| ·与侵染结构产生有关的基因 | 第22页 |
| ·与细胞壁降解有关的基因 | 第22-23页 |
| ·与寄主反应代谢物有关的基因 | 第23页 |
| ·毒素基因 | 第23-25页 |
| ·与信号传导有关的基因 | 第25-26页 |
| 3 果胶裂解酶研究进展 | 第26-28页 |
| ·果胶 | 第26-27页 |
| ·果胶酶 | 第27-28页 |
| 4 果胶酶的应用性研究 | 第28-29页 |
| ·利用果胶酶瓦解植物细胞的细胞壁 | 第28-29页 |
| ·部分分解细胞间质中的果胶物质 | 第29页 |
| ·利用果胶酶生产果胶低聚糖 | 第29页 |
| 5 果胶裂解酶的研究进展 | 第29-35页 |
| ·果胶裂解酶（PEL）的存在与来源 | 第30页 |
| ·果胶裂解酶的分子量及分子组成 | 第30页 |
| ·对果胶裂解酶结构的研究 | 第30-31页 |
| ·果胶裂解酶的性质与作用机理 | 第31-32页 |
| ·果胶裂解酶分子生物学研究 | 第32-35页 |
| 6 利用酵母体系表达外源蛋白的研究进展 | 第35-38页 |
| ·毕赤酵母表达体系 | 第35页 |
| ·巴斯德毕赤酵母的生物学特性 | 第35-36页 |
| ·毕赤酵母宿主菌和表达载体的类型 | 第36-37页 |
| ·表达载体在毕赤酵母中的整合 | 第37-38页 |
| 7 实验目的及意义 | 第38-39页 |
| 第一章 辣椒疫霉果胶裂解酶基因克隆与序列分析 | 第39-82页 |
| 1 材料与方法 | 第39-51页 |
| ·材料 | 第39-43页 |
| ·实验方法 | 第43-51页 |
| 2 结果与分析 | 第51-75页 |
| ·辣椒疫霉果胶裂解酶基因克隆结果 | 第51-52页 |
| ·RACE 扩增结果分析 | 第52-53页 |
| ·TAIL-PCR 扩增结果分析 | 第53-54页 |
| ·测序结果 | 第54-72页 |
| ·辣椒疫霉10 个果胶裂解酶基因的比较 | 第72-73页 |
| ·辣椒疫霉果胶裂解酶基因在自然界中的进化分析 | 第73-75页 |
| 3 讨论 | 第75-82页 |
| ·PCR 常见问题及解决方案 | 第75页 |
| ·利用基因组文库筛选基因 | 第75-76页 |
| ·RNA 的提取 | 第76-77页 |
| ·RACE 技术 | 第77-78页 |
| ·DNA 的提取 | 第78页 |
| ·TAIL-PCR 技术 | 第78-81页 |
| ·果胶裂解酶基因的结构分析 | 第81-82页 |
| 第二章 辣椒疫霉菌果胶裂解酶 pcpel1 的真核表达 | 第82-106页 |
| 1 pcpel1 基因的真核表达 | 第82-93页 |
| ·材料 | 第82-84页 |
| ·实验方法 | 第84-93页 |
| 2 结果与分析 | 第93-99页 |
| ·pcpel1 成熟肽基因序列的分离 | 第93-94页 |
| ·酵母表达载体的构建和鉴定 | 第94-95页 |
| ·酵母转化子筛选与鉴定 | 第95-98页 |
| ·重组蛋白的诱导表达和SDS-PAGE 分析 | 第98-99页 |
| 3 讨论 | 第99-106页 |
| ·表达系统的选择 | 第99-100页 |
| ·外源基因在Pichia pastoris 中的分泌表达的必要性 | 第100-101页 |
| ·影响外源基因表达量的因素 | 第101-105页 |
| ·表达果胶裂解酶PEL1 的活性 | 第105-106页 |
| 第三章 辣椒疫霉果胶裂解酶 pcpel1 基因功能的初步研究 | 第106-114页 |
| 1 材料与方法 | 第106-110页 |
| ·材料 | 第106-107页 |
| ·方法 | 第107-110页 |
| 2 结果分析 | 第110-112页 |
| ·Western Blot 检测结果 | 第110-111页 |
| ·RT-PCR 结果 | 第111-112页 |
| 3 讨论 | 第112-114页 |
| ·Western Blot 技术 | 第112-113页 |
| ·RT-PCR 技术 | 第113-114页 |
| 结论与建议 | 第114-116页 |
| 1. 结论 | 第114-115页 |
| 2. 建议 | 第115-116页 |
| 参考文献 | 第116-128页 |
| 致谢 | 第128-129页 |
| 攻读学位期间发表论文情况 | 第129页 |
