| 英文缩略词表 | 第1-9页 |
| 摘要 | 第9-11页 |
| Abstract | 第11-13页 |
| 引言 | 第13-25页 |
| 1 分解角蛋白质的微生物资源 | 第13-16页 |
| ·微生物对角蛋白质的降解 | 第13-14页 |
| ·产角蛋白酶的微生物资源研究 | 第14-16页 |
| 2 角蛋白酶的作用机理 | 第16-18页 |
| ·变性作用 | 第16页 |
| ·水解作用 | 第16页 |
| ·转氨基作用 | 第16-18页 |
| 3 角蛋白酶及基因的克隆与表达 | 第18-22页 |
| ·角蛋白酶概述 | 第18页 |
| ·角蛋白酶的理化性质 | 第18-20页 |
| ·角蛋白酶基因克隆与表达 | 第20-22页 |
| 4 角蛋白酶的应用研究进展 | 第22-23页 |
| ·饲料和饲料添加剂 | 第22页 |
| ·生物农药 | 第22页 |
| ·医药和化妆品 | 第22-23页 |
| ·角蛋白酶与疯牛病 | 第23页 |
| ·其它方面 | 第23页 |
| 5 本项目研究的目的和意义 | 第23-25页 |
| 试验一 羽毛角蛋白质降解菌株的分离、鉴定与系统发育分析 | 第25-54页 |
| 1. 材料与方法 | 第26-35页 |
| ·材料 | 第26-27页 |
| ·样品来源 | 第26页 |
| ·菌株和质粒 | 第26页 |
| ·羽毛粉 | 第26页 |
| ·仪器与设备 | 第26页 |
| ·试剂与工具酶 | 第26-27页 |
| ·培养基和溶液 | 第27页 |
| ·方法 | 第27-35页 |
| ·菌株分离、纯化 | 第27-28页 |
| ·常规分类鉴定 | 第28页 |
| ·16S rDNA 分子鉴定 | 第28-34页 |
| ·角蛋白酶酶活测定 | 第34-35页 |
| 2. 结果与分析 | 第35-52页 |
| ·羽毛角蛋白质降解菌的分离 | 第35-36页 |
| ·羽毛降解菌A1 菌株的鉴定 | 第36-45页 |
| ·A1 菌株的分子鉴定 | 第36-42页 |
| ·菌株A1 的形态观察及生理生化鉴定 | 第42-45页 |
| ·菌株S. maltophilia YHYJ-1 发酵液角蛋白酶酶活测定 | 第45页 |
| ·菌株A2、A3、A4 的分子鉴定 | 第45-52页 |
| ·菌株A2 的分子鉴定结果 | 第45-48页 |
| ·菌株A3 的分子鉴定结果 | 第48-50页 |
| ·菌株A4 的分子鉴定结果 | 第50-52页 |
| 3. 讨论 | 第52-54页 |
| 试验二 嗜麦芽窄食单胞菌（S. maltophilia YHYJ-1）角蛋白酶基因的原核表达 | 第54-76页 |
| 1. 材料与方法 | 第54-63页 |
| ·材料 | 第54-56页 |
| ·菌株与质粒 | 第54页 |
| ·工具酶与试剂 | 第54-55页 |
| ·仪器与设备 | 第55页 |
| ·主要溶液配方 | 第55-56页 |
| ·引物设计 | 第56页 |
| ·方法 | 第56-63页 |
| ·DNA 操作技术 | 第56页 |
| ·kerD 基因的PCR 扩增 | 第56-57页 |
| ·重组克隆质粒的构建 | 第57-58页 |
| ·序列测定与分析 | 第58-59页 |
| ·原核表达载体的构建 | 第59-61页 |
| ·kerD 基因在大肠杆菌中的诱导表达及酶活测定 | 第61-62页 |
| ·工程菌蛋白的SDS-PAGE 电泳 | 第62页 |
| ·重组角蛋白酶的酶学性质研究 | 第62-63页 |
| 2. 结果与分析 | 第63-74页 |
| ·kerD 基因的克隆 | 第63-64页 |
| ·序列测定与分析 | 第64-66页 |
| ·kerD 蛋白的生物信息学分析 | 第66-68页 |
| ·kerD 基因推测氨基酸序列信号肽的预测 | 第67-68页 |
| ·kerD 角蛋白酶氨基酸保守区预测 | 第68页 |
| ·原核表达重组质粒的构建与鉴定 | 第68-71页 |
| ·kerD 的诱导表达 | 第71-72页 |
| ·酶活测定 | 第72-73页 |
| ·酶学性质分析 | 第73-74页 |
| ·最适反应温度的测定 | 第73-74页 |
| ·最适反应pH 值的测定 | 第74页 |
| 3. 讨论 | 第74-76页 |
| 全文总结 | 第76-78页 |
| 参考文献 | 第78-87页 |
| 附录 | 第87-89页 |
| 致谢 | 第89-90页 |
| 研究生期间发表论文 | 第90页 |
