| 摘要 | 第5-7页 |
| ABSTRACT | 第7-8页 |
| 第一章 绪论 | 第12-35页 |
| 1.1 肺癌的研究现状 | 第12-20页 |
| 1.1.1 肺癌的概述 | 第12-15页 |
| 1.1.2 肺癌的致病因素 | 第15-17页 |
| 1.1.3 肺癌的治疗现状 | 第17-20页 |
| 1.2 PDX小鼠模型研究进展 | 第20-28页 |
| 1.2.1 PDX小鼠模型引言 | 第20-21页 |
| 1.2.2 免疫缺陷小鼠的发展历史 | 第21-26页 |
| 1.2.3 PDX小鼠模型的应用 | 第26-28页 |
| 1.2.4 PDX小鼠模型研究面临的挑战 | 第28页 |
| 1.3 CAR T细胞免疫疗法 | 第28-34页 |
| 1.3.1 CAR的分子结构 | 第29-31页 |
| 1.3.2 CAR T细胞的制备以及临床应用 | 第31-33页 |
| 1.3.3 肿瘤抗原的选择 | 第33-34页 |
| 1.4 结语 | 第34-35页 |
| 第二章 实验材料和方法 | 第35-52页 |
| 2.1 实验材料 | 第35-36页 |
| 2.1.1 实验动物 | 第35页 |
| 2.1.2 细胞系 | 第35页 |
| 2.1.3 肺癌样本 | 第35页 |
| 2.1.4 脐血样本 | 第35-36页 |
| 2.1.5 质粒 | 第36页 |
| 2.1.6 引物 | 第36页 |
| 2.2 实验试剂与耗材 | 第36-38页 |
| 2.2.1 实验试剂 | 第36-38页 |
| 2.2.2 实验耗材 | 第38页 |
| 2.3 实验设备及器具 | 第38-39页 |
| 2.4 实验方法 | 第39-52页 |
| 2.4.1 CAR-PSCA28z和CAR-MUC128z慢病毒载体的构建 | 第39-40页 |
| 2.4.2 细胞培养 | 第40-41页 |
| 2.4.3 慢病毒包装 | 第41-42页 |
| 2.4.4 慢病毒滴度测量 | 第42页 |
| 2.4.5 人脐带血的单个核细胞的分离和制备 | 第42页 |
| 2.4.6 T细胞的分选与刺激 | 第42-43页 |
| 2.4.7 慢病毒转染T细胞 | 第43-44页 |
| 2.4.8 T细胞的扩增与冻存 | 第44页 |
| 2.4.9 RT-PCR检测CAR分子的表达 | 第44-45页 |
| 2.4.10 流式细胞术检测CAR的表达 | 第45-46页 |
| 2.4.11 荧光素酶法检测CAR T细胞对靶细胞的杀伤效率 | 第46页 |
| 2.4.12 ELISA法检测细胞因子 | 第46-47页 |
| 2.4.13 肺癌PDX模型的构建 | 第47-48页 |
| 2.4.14 H&E染色 | 第48-49页 |
| 2.4.15 免疫组化 | 第49页 |
| 2.4.16 肺癌皮下CDX模型的构建 | 第49-50页 |
| 2.4.17 CAR T在非小细胞肺癌CDX小鼠模型体内的评估 | 第50页 |
| 2.4.18 CART在非小细胞肺癌PDX小鼠模型体内的评估 | 第50-51页 |
| 2.4.19 统计学分析 | 第51-52页 |
| 第三章 实验结果 | 第52-80页 |
| 3.1 非小细胞肺癌PDX模型的构建与鉴定 | 第52-59页 |
| 3.1.1 非小细胞肺癌PDX模型的成瘤率以及病人信息 | 第52页 |
| 3.1.2 非小细胞肺癌PDX模型中的肿瘤的病理形态学的相似性 | 第52-54页 |
| 3.1.3 非小细胞肺癌PDX模型不同代数之间保持了相同的分子学特点 | 第54-56页 |
| 3.1.4 抗原PSCA和MUC1在PDX模型中的表达情况 | 第56-59页 |
| 3.2 CAR分子载体的成功构建 | 第59-60页 |
| 3.3 CAR-PSCA和CAR-MUC1 T细胞的制备 | 第60-61页 |
| 3.4 PCR结果表明CAR-PSCA和CAR-MUC1片段在T细胞内正常表达 | 第61-62页 |
| 3.5 CAR-PSCAT细胞在体外特异性杀伤PSCA阳性的肺癌细胞系 | 第62-66页 |
| 3.6 CAR-MUC1 T细胞在体外特异性杀伤MUC1阳性的肺癌细胞系 | 第66-68页 |
| 3.7 CAR-PSCA和CAR-MUC1 T细胞在体外体内抑制A549细胞的生长 | 第68-73页 |
| 3.8 CAR-PSCAT细胞在体内有效地抑制原代肺癌的生长 | 第73-76页 |
| 3.9 CAR-MUC1T细胞在体内有效地抑制原代肺癌的生长 | 第76-77页 |
| 3.10 CAR-PSCA和CAR-MUC1 T细胞协同抑制原代肺癌的生长 | 第77-80页 |
| 第四章 讨论 | 第80-89页 |
| 4.1 构建肺癌的PDX模型的意义 | 第80-81页 |
| 4.2 新型免疫缺陷小鼠的构建 | 第81-84页 |
| 4.3 CAR T细胞在实体瘤治疗中存在的难题以及解决方法 | 第84-86页 |
| 4.4 CAR T细胞靶点的选择问题 | 第86-87页 |
| 4.5 总结与展望 | 第87-89页 |
| 参考文献 | 第89-105页 |
| 附录文中缩写 | 第105-106页 |
| 致谢 | 第106-108页 |
| 攻读博士学位期间的主要研究成果 | 第108-109页 |
