猪发酵床养殖中芽孢杆菌菌株的筛选、鉴定及产蛋白酶条件的优化
| 中文摘要 | 第1-4页 |
| Abstract | 第4-6页 |
| 目录 | 第6-9页 |
| 第一部分 选题背景 | 第9-10页 |
| 第二部分 文献综述 | 第10-20页 |
| 1 益生菌研究现状 | 第10-12页 |
| ·益生菌的定义 | 第10页 |
| ·益生菌的分类 | 第10-11页 |
| ·益生菌的作用机理 | 第11-12页 |
| 2 芽孢杆菌的研究 | 第12-16页 |
| ·芽孢杆菌概述 | 第12页 |
| ·益生芽孢杆菌的应用现状 | 第12-15页 |
| ·芽孢杆菌在动物生产中的应用 | 第13页 |
| ·芽孢杆菌制剂在单胃动物上的应用 | 第13-15页 |
| ·芽孢杆菌在水产养殖上的应用 | 第15页 |
| ·芽孢杆菌益生素的应用优势 | 第15-16页 |
| 3 目前畜禽粪污的处理技术的研究 | 第16-17页 |
| ·沼气发酵 | 第16页 |
| ·固液分离,堆腐晾晒 | 第16-17页 |
| ·机械搅拌,高温堆肥 | 第17页 |
| ·塔式发酵 | 第17页 |
| 4 生物发酵床养猪技术概述 | 第17-20页 |
| ·概念 | 第18页 |
| ·分类 | 第18页 |
| ·生物发酵床养猪技术原理 | 第18-19页 |
| ·技术优势 | 第19-20页 |
| ·三省 | 第19页 |
| ·两提 | 第19-20页 |
| ·一增(增加养殖效益) | 第20页 |
| ·零排放(无污染,实现粪污零排放) | 第20页 |
| 5 研究的目的和意义 | 第20页 |
| 第三部分 试验研究 | 第20-46页 |
| 1 材料 | 第20-22页 |
| ·样品 | 第21页 |
| ·仪器与试剂 | 第21页 |
| ·主要培养基 | 第21-22页 |
| ·菌株 | 第22页 |
| ·试验动物 | 第22页 |
| ·分子生物学所需试剂 | 第22页 |
| 2 方法 | 第22-30页 |
| ·芽孢杆菌的分离 | 第22-23页 |
| ·芽孢杆菌蛋白酶活力测定 | 第23-24页 |
| ·初选 | 第23页 |
| ·复选—Folin试剂显色法 | 第23-24页 |
| ·纤维素酶活力测定 | 第24-26页 |
| ·初选 | 第24-25页 |
| ·复选—CMC糖花力法 | 第25-26页 |
| ·淀粉酶活性测定 | 第26-27页 |
| ·初选 | 第26页 |
| ·复选—3,5二硝基水杨酸显色法 | 第26-27页 |
| ·芽孢杆菌抑菌试验 | 第27页 |
| ·备选芽孢杆菌菌株的生物学特性的研究 | 第27-28页 |
| ·耐酸试验 | 第27页 |
| ·耐胆盐试验 | 第27页 |
| ·耐抗生素试验 | 第27-28页 |
| ·急性毒性试验 | 第28页 |
| ·备选芽孢杆菌菌株的测序鉴定 | 第28-29页 |
| ·提取备选芽孢杆菌菌株的DNA | 第28页 |
| ·PCR扩增备选菌株的16S rDNA基因序列 | 第28页 |
| ·备选菌株的16S rRNA基因序列测定 | 第28-29页 |
| ·系统进化树的构建 | 第29页 |
| ·备选芽孢杆菌菌株产蛋白酶条件的优化 | 第29-30页 |
| ·发酵培养基底物比例的影响 | 第29页 |
| ·培养时间的影响 | 第29页 |
| ·起始pH值的影响 | 第29-30页 |
| ·接种量的影响 | 第30页 |
| ·培养温度的影响 | 第30页 |
| ·芽孢杆菌产酶正交实验 | 第30页 |
| 3 结果与分析 | 第30-45页 |
| ·芽孢杆菌的分离 | 第30页 |
| ·芽孢杆菌分泌胞外酶活力的筛选 | 第30-33页 |
| ·产蛋白酶芽孢杆菌菌株的筛选 | 第30-31页 |
| ·产淀粉酶芽孢杆菌菌株的筛选 | 第31-32页 |
| ·产纤维素酶芽孢杆菌菌株的筛选 | 第32-33页 |
| ·抑菌试验 | 第33页 |
| ·芽孢杆菌的生物学特性 | 第33-34页 |
| ·耐酸性试验 | 第33页 |
| ·耐胆盐试验 | 第33-34页 |
| ·药敏试验 | 第34页 |
| ·安全性试验 | 第34页 |
| ·分子生物学鉴定 | 第34-36页 |
| ·菌落及细菌形态特征 | 第34页 |
| ·生理生化特征 | 第34-35页 |
| ·芽孢杆菌DNA的提取 | 第35页 |
| ·16S rRNA测序结果 | 第35页 |
| ·序列比对结果 | 第35-36页 |
| ·Yb17芽孢杆菌菌株产蛋白酶条件的优化 | 第36-40页 |
| ·发酵条件对蛋白酶活力的影响 | 第36-39页 |
| ·影响蛋白酶活性因素正交实验 | 第39-40页 |
| ·讨论 | 第40-45页 |
| ·芽孢杆菌益生素的应用优势 | 第40页 |
| ·酶活的筛选 | 第40-42页 |
| ·芽孢杆菌抑菌试验 | 第42页 |
| ·芽孢杆菌的生物学特性 | 第42-43页 |
| ·芽孢杆菌的鉴定 | 第43页 |
| ·芽孢杆菌产酶条件及微生物发酵 | 第43-45页 |
| 全文结论 | 第45-46页 |
| 参考文献 | 第46-50页 |
| 致谢 | 第50页 |
