| 中文摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-13页 |
| 前言 | 第13-16页 |
| 第一篇 文献综述 | 第16-27页 |
| 第一章 H5N1亚型禽流感疫苗的研究进展 | 第16-20页 |
| 1 全病毒灭活疫苗 | 第16-17页 |
| 2 亚单位疫苗 | 第17-18页 |
| 3 基因疫苗 | 第18-19页 |
| 4 基因重组活病毒载体疫苗 | 第19-20页 |
| 第二章 犬腺病毒载体的研究进展 | 第20-27页 |
| 1 腺病毒分子生物学特征 | 第20-22页 |
| 2 腺病毒载体的研究进展 | 第22-27页 |
| ·腺病毒载体的优点 | 第22页 |
| ·腺病毒载体的构建 | 第22-23页 |
| ·犬腺病毒载体 | 第23-27页 |
| ·外源基因插入位点 | 第23-24页 |
| ·构方法与策略 | 第24-27页 |
| 第二篇 研究内容 | 第27-51页 |
| 第一章 虎源H5N1亚型禽流感病毒NP基因的克隆、测序及其真核表达载体的构建 | 第27-39页 |
| 1 材料与方法 | 第27-32页 |
| ·材料 | 第27-28页 |
| ·实验方法 | 第28-32页 |
| ·感受态菌的制备(CaCl_2转化法) | 第28页 |
| ·连接物的转化 | 第28页 |
| ·质粒DNA的大量制备(碱裂解法) | 第28-29页 |
| ·DNA琼脂糖凝胶电泳 | 第29页 |
| ·H5N1 NP基因的扩增、克隆及测序 | 第29-30页 |
| ·NP基因真核表达载体的构建 | 第30-31页 |
| ·pVAX-NP在真核细胞中的表达及检测 | 第31-32页 |
| 2 结果 | 第32-36页 |
| ·H5N1 NP基因的扩增、克隆及测序 | 第32-34页 |
| ·H5N1 NP基因真核表达载体的构建及鉴定 | 第34-35页 |
| ·pVAX-NP在BHK-21细胞中的表达和检测 | 第35-36页 |
| 3 讨论 | 第36-38页 |
| ·目的基因的选择 | 第36-37页 |
| ·真核表达载体的选择 | 第37页 |
| ·H5N1 NP基因的PCR扩增、克隆和测序分析 | 第37页 |
| ·pVAX-NP在哺乳动物细胞的表达与检测 | 第37-38页 |
| 4 小结 | 第38-39页 |
| 第二章 表达虎源H5N1亚型禽流感病毒NP蛋白重组犬2型腺病毒的构建与鉴定 | 第39-51页 |
| 1 材料与方法 | 第39-43页 |
| ·材料 | 第39页 |
| ·实验方法 | 第39-43页 |
| ·DNA片段末端平滑化 | 第39-40页 |
| ·线性化质粒DNA片段5′末端去磷酸化 | 第40页 |
| ·H5N1 NP表达盒转移载体的构建 | 第40页 |
| ·含H5N1 NP表达盒CAV-2基因组重组质粒的构建 | 第40-41页 |
| ·重组CAV-2-NP基因组转染DK细胞 | 第41-42页 |
| ·CAV-2-NP的鉴定 | 第42-43页 |
| 2 结果 | 第43-48页 |
| ·H5N1 NP表达盒转移载体的构建 | 第43-44页 |
| ·含H5N1 NP表达盒CAV-2基因组重组质粒的构建 | 第44页 |
| ·重组pCAV-2-NP基因组转染DK细胞 | 第44-45页 |
| ·CAV-2-NP的鉴定 | 第45-48页 |
| 3 讨论 | 第48-50页 |
| ·CAV-2载体的选择 | 第48-49页 |
| ·E3区缺失载体及H5N1NP表达盒转移载体的构建 | 第49页 |
| ·CAV-2-NP重组病毒的鉴定 | 第49页 |
| ·CAV-2-NP中H5N1 NP表达盒的克隆测序 | 第49-50页 |
| ·H5N1 NP基因的转录与表达 | 第50页 |
| ·CAV-2-NP生长特性 | 第50页 |
| ·CAV-2-NP的遗传稳定性 | 第50页 |
| 4 小结 | 第50-51页 |
| 结论 | 第51-52页 |
| 参考文献 | 第52-58页 |
| 致谢 | 第58-59页 |
| 攻读学位期间发表的学术论文 | 第59页 |
