| 缩写词表 | 第1-8页 |
| 中文摘要 | 第8-10页 |
| 英文摘要 | 第10-13页 |
| 前言 | 第13-17页 |
| 材料方法 | 第17-29页 |
| (一) 试剂和材料 | 第17-18页 |
| (二) 菌株、细胞株、质粒 | 第18-19页 |
| (三) 主要实验方法 | 第19-29页 |
| 1. 限制性内切酶的酶切反应 | 第19页 |
| 2. 从琼脂糖凝胶中回收DNA片段 | 第19页 |
| 3. DNA片段的连接 | 第19页 |
| 4. 感受态大肠杆菌的制备与质粒DNA的转化 | 第19-20页 |
| 5. SDS碱裂解法小量制备质粒DNA | 第20页 |
| 6. SDS碱裂解法大量制备质粒DNA | 第20页 |
| 7. 细胞培养 | 第20-21页 |
| 8. 质粒转染细胞 | 第21页 |
| 9. Western免疫印迹分析 | 第21-23页 |
| 10. 流式细胞检测样品准备 | 第23页 |
| 11. 细胞总RNA的制备 | 第23页 |
| 12. PCR扩增 | 第23页 |
| 13. 琼脂糖凝胶电泳 | 第23-24页 |
| 14. Real-time RT-PCR | 第24页 |
| 15. 免疫共沉淀(Co-Immunoprecipitation) | 第24页 |
| 16. 染色质免疫沉淀(chromatin immunoprecipitation,ChIP) | 第24-26页 |
| 17. 基因组DNA的提取 | 第26页 |
| 18. pRS-SirT7shRNA质粒的构建 | 第26页 |
| 19. Tandem Affinity Purificaion(TAP) | 第26-27页 |
| 20. 原核蛋白纯化 | 第27页 |
| 21. GST-pull down | 第27-28页 |
| 22. 5’-RACE | 第28-29页 |
| 结果 | 第29-44页 |
| (一) RA诱导小鼠胚胎瘤P19细胞神经分化模型的建立 | 第29-30页 |
| (二) RA诱导P19分化过程中SirT7表达变化 | 第30-31页 |
| (三) SirT7两个选择性剪切体的鉴定 | 第31-33页 |
| (四) RA诱导过程中两个SirT7转录本表达变化 | 第33-34页 |
| (五) SirT7的细胞定位 | 第34页 |
| (六) SirT7 V2对Ngn1和Mash1表达的影响 | 第34-37页 |
| (七) SirT7 V2在Notchl启动子区的ChIP试验 | 第37-40页 |
| (八) SirT7 V2可促进Akt-pT308位点的磷酸化 | 第40-41页 |
| (九) SirT7 V2与PPlc的相互作用 | 第41-42页 |
| (十) SirT7 V2影响PPlc对Akt-pT308位点的去磷酸化 | 第42-44页 |
| 讨论 | 第44-51页 |
| (一) RA诱导胚胎瘤P19细胞分化模型模拟了神经细胞分化的过程 | 第47页 |
| (二) SirT7两种选择性剪切体的鉴定 | 第47-48页 |
| (三) SirT7 V2对Mash1表达的影响 | 第48页 |
| (四) SirT7 V2在Notch1信号通路中作用的研究 | 第48-49页 |
| (五) SirT7 V2明显促进Akt-pT308位点的磷酸化 | 第49-50页 |
| (六) SirT7 V2与PPlc相互作用,影响Akt-pT308位点的磷酸化水平 | 第50页 |
| (七) SirT7 V2可抑制PPlc对Akt-pT308位点的去磷酸化 | 第50-51页 |
| 小结 | 第51-52页 |
| 参考文献 | 第52-56页 |
| 其它相关工作 | 第56-62页 |
| 稳定表达SirT7 P19细胞系的建立和SirT7对细胞增殖的抑制作用 | 第56-62页 |
| 文献综述 | 第62-70页 |
| 哺乳动物Sir2家族蛋白的功能研究进展 | 第62-70页 |
| 致谢 | 第70-71页 |
| 个人介绍 | 第71-72页 |
