拟南芥中响应草酸胁迫的若干基因的克隆及其菌核病抗性分析
| 摘要 | 第1-8页 |
| ABSTRACT | 第8-9页 |
| 第一部分 引言 | 第9-13页 |
| 1 模式植物拟南芥的优点及研究策略 | 第9-10页 |
| 2 菌核病的发生规律及致病过程 | 第10-12页 |
| 3 研究意义 | 第12-13页 |
| 第二部分 材料与方法 | 第13-25页 |
| 1 材料 | 第13-15页 |
| ·植物材料 | 第13页 |
| ·培养基配方 | 第13-14页 |
| ·克隆载体及转化菌株 | 第14-15页 |
| ·生化试剂 | 第15页 |
| 2 实验方法与步骤 | 第15-25页 |
| ·拟南芥的培养 | 第15页 |
| ·候选基因过表达载体的构建 | 第15-23页 |
| ·拟南芥浸花转化及转基因阳性植株的筛选 | 第23页 |
| ·转基因阳性植株的过表达检测-半定量PCR | 第23-24页 |
| ·核盘菌的接种方法 | 第24-25页 |
| 第三部分 结果与分析 | 第25-48页 |
| 1 过表达载体的构建 | 第25-31页 |
| ·At1g07890 过表达载体的构建 | 第25-26页 |
| ·At1g64160 过表达载体的构建 | 第26-27页 |
| ·At2g39350 过表达载体的构建 | 第27-28页 |
| ·At2g45570 过表达载体的构建 | 第28-29页 |
| ·At3g08970 过表达载体的构建 | 第29-30页 |
| ·At3g20310 过表达载体的构建 | 第30-31页 |
| 2 过表达载体 bar 基因的验证 | 第31-32页 |
| 3 拟南芥转基因阳性植株的获得 | 第32-33页 |
| 4 克隆基因的表达检测分析 | 第33-35页 |
| ·克隆基因的时空表达分析 | 第33-34页 |
| ·克隆基因的芯片结果验证 | 第34-35页 |
| ·突变体的过表达分析 | 第35页 |
| 5 转基因植株的菌核病抗性分析 | 第35-48页 |
| ·转At1g07890 基因植株的菌核病抗性分析 | 第36-38页 |
| ·转At1g64160 基因植株的菌核病抗性分析 | 第38-40页 |
| ·转At2g39350 基因植株的菌核病抗性分析 | 第40-41页 |
| ·转At2g45570 基因植株的菌核病抗性分析 | 第41-44页 |
| ·转At3g08970 基因植株的菌核病抗性分析 | 第44-45页 |
| ·转At3g20310 基因植株的菌核病抗性分析 | 第45-48页 |
| 第四部分 小结与讨论 | 第48-52页 |
| 1 实验小结 | 第48页 |
| 2 讨论 | 第48-52页 |
| ·下一步工作 | 第48页 |
| ·实验中存在的问题 | 第48-49页 |
| ·相关基因的功能讨论 | 第49-52页 |
| 参考文献 | 第52-57页 |
| 附录 | 第57-69页 |
| 致谢 | 第69页 |
