| 摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-8页 |
| 符号说明 | 第8-9页 |
| 1 前言 | 第9-23页 |
| ·microRNA 的发现 | 第9-10页 |
| ·microRNA 的合成及作用机制 | 第10-13页 |
| ·microRNA 的生物合成 | 第10-11页 |
| ·microRNA 的作用机制 | 第11-12页 |
| ·microRNA 与siRNA | 第12-13页 |
| ·microRNA 的生物学功能 | 第13-18页 |
| ·microRNA 在动物及人类中的功能 | 第13-14页 |
| ·microRNA 在植物中的功能 | 第14-18页 |
| ·microRNA 参与调控植物器官的形态建成 | 第14页 |
| ·microRNA 参与生物胁迫与非生物胁迫 | 第14-15页 |
| ·miRNA 参与植物激素的信号转导 | 第15-16页 |
| ·microRNA 参与了ta-siRNA 的形成 | 第16-17页 |
| ·microRNA 参与自身代谢的反馈调节 | 第17-18页 |
| ·研究microRNA 的一些方法 | 第18-19页 |
| ·microRNA 的鉴定 | 第18页 |
| ·microRNA 靶基因的确定 | 第18-19页 |
| ·microRNA 与靶基因互作的验证 | 第19页 |
| ·microRNA 功能的研究方法 | 第19页 |
| ·本研究所涉及的10 个水稻microRNAs 及本实验的目的和意义 | 第19-23页 |
| 2 材料与方法 | 第23-35页 |
| ·材料 | 第23-25页 |
| ·植物材料与培养基 | 第23页 |
| ·菌种、表达载体及试剂 | 第23-24页 |
| ·本研究所用引物 | 第24-25页 |
| ·方法 | 第25-35页 |
| ·表达载体的构建 | 第25-29页 |
| ·水稻总DNA 的提取和目的基因的克隆 | 第25-26页 |
| ·回收目的片段 | 第26页 |
| ·目的基因连接到pMD~(TM)-18T Simple Vector | 第26页 |
| ·大肠杆菌（E.coli）DH5α感受态细胞的制备及转化 | 第26-27页 |
| ·pMD~(TM)-18T Simple Vector-miRNA 质粒的提取 | 第27-28页 |
| ·植物表达载体pCAMBIA1301-miRNA 的构建 | 第28-29页 |
| ·农杆菌介导的遗传转化及过表达植株再生 | 第29-31页 |
| ·农杆菌EHA105 感受态的制备及转化 | 第30页 |
| ·根癌农杆菌介导的遗传转化和抗性愈伤的筛选及其再生 | 第30-31页 |
| ·抗性植株培养 | 第31页 |
| ·转基因水稻的GUS 组织化学活性检测 | 第31页 |
| ·Northern blot | 第31-33页 |
| ·胁迫处理 | 第33-35页 |
| ·非生物胁迫处理 | 第33页 |
| ·生物胁迫及乙烯处理 | 第33-35页 |
| 3 结果与分析 | 第35-50页 |
| ·4 个水稻microRNA 前体基因表达载体的PCR 鉴定 | 第35-36页 |
| ·10 个microRNA 前体基因所形成的茎环结构预测 | 第36-37页 |
| ·水稻愈伤的培养 | 第37-38页 |
| ·农杆菌介导的遗传转化及植株再生 | 第38-39页 |
| ·转基因水稻GUS 活性的组织化学检测 | 第39-40页 |
| ·水稻miRNA 的功能分析：以Os-miR398 为例 | 第40-50页 |
| ·水稻中miR398 及其靶基因的表达模式 | 第40-41页 |
| ·非生物胁迫对Os-miR398 及其靶基因表达的影响 | 第41-43页 |
| ·非生物胁迫对水稻细胞内H_2O_2 和O_2~(·-)生成率的影响 | 第43-44页 |
| ·生物胁迫对Os-miR398 及其靶基因表达的影响 | 第44-45页 |
| ·乙烯对Os-miR398 及其靶基因表达的影响 | 第45页 |
| ·过表达Os-miR398 T_0 代转基因水稻的表型分析 | 第45-46页 |
| ·铜胁迫对过表达Os-miR398 转化水稻T1 代幼苗的影响 | 第46-47页 |
| ·盐胁迫对过表达抗Os-miR398 的CSD2 转化水稻的影响 | 第47-50页 |
| 4 讨论 | 第50-53页 |
| 1. 研究方法的改进 | 第50页 |
| 2.miR398 功能的讨论 | 第50-53页 |
| 参考文献 | 第53-61页 |
| 附录 | 第61-67页 |
| 1. 过表达Os-miR397 转化水稻的分析 | 第61页 |
| 2. 过表达Os-miR390 的转化水稻 | 第61-62页 |
| 3. 过表达Os-miR394 转化水稻的分析 | 第62页 |
| 4. 过表达Os-miR441 转化水稻的分析 | 第62-63页 |
| 5. 过表达Os-miR435 转化水稻的分析 | 第63页 |
| 6. 过表达Os-miR396 T1 代转化水稻的分析 | 第63-64页 |
| 7.Os -CSD2 的基因序列（来源于NCBI） | 第64-65页 |
| 8.H_2O_2 和O_2~(·-)的测定方法 | 第65页 |
| 9. 水稻总RNA 的提取 | 第65-67页 |
| 致谢 | 第67页 |
