摘要 | 第1-7页 |
Abstract | 第7-9页 |
缩略语表(Abbreviation) | 第9-11页 |
第1章 文献综述 | 第11-21页 |
·猪繁殖与呼吸综合征 | 第11页 |
·PRRSV病原特征 | 第11页 |
·PRRSV的免疫学反应 | 第11-12页 |
·趋化因子(chemokines) | 第12-14页 |
·趋化因子的分类 | 第13页 |
·趋化因子的生物学活性 | 第13页 |
·趋化因子与疾病 | 第13-14页 |
·激活RANTES产生的相关信号通路 | 第14-19页 |
·NF-κB信号转导途径 | 第15-16页 |
·MAPK信号转导途径 | 第16-17页 |
·TLRs信号转导途径 | 第17-18页 |
·RIG-Ⅰ/MDA-5信号通路 | 第18-19页 |
·反式报告系统 | 第19-21页 |
第2章 研究目的与意义 | 第21-22页 |
第3章 材料与方法 | 第22-32页 |
·试验材料 | 第22-24页 |
·毒株、细胞与菌种 | 第22页 |
·载体与质粒 | 第22-23页 |
·工具酶和试剂 | 第23页 |
·抑制剂及其配制 | 第23页 |
·培养基与抗生素及其配制 | 第23-24页 |
·缓冲液 | 第24页 |
·试验方法 | 第24-32页 |
·PRRSV的扩增和紫外灭火 | 第24-25页 |
·半数细胞培养物感染量(TCID_(50))的测定 | 第25页 |
·大肠杆菌感受态细胞的制备(氯化钙法) | 第25页 |
·连接产物的转化 | 第25-26页 |
·质粒的制备与鉴定 | 第26-28页 |
·质粒转染 | 第28页 |
·细胞、感染病毒的细胞样品总RNA的提取 | 第28-29页 |
·cDNA的合成 | 第29-30页 |
·SYBR Green Ⅰ实时定量PCR | 第30页 |
·相对mRNA表达水平的计算 | 第30页 |
·双荧光素酶检测实验 | 第30-31页 |
·统计学分析 | 第31-32页 |
第4章 结果与分析 | 第32-40页 |
·PRRSV感染激活RANTES的转录 | 第32-34页 |
·Real-time PCR检测PRRSV感染激活RANTES的转录 | 第32页 |
·荧光素酶报告系统检测PRRSV感染激活RANTES的产生 | 第32-33页 |
·PRRSV感染激活RANTES与病毒的感染剂量相关 | 第33-34页 |
·PRRSV感染激活RANTES产生的转录因子的确定 | 第34-35页 |
·参与调控RANTES基因转录的启动子区域的分析 | 第34页 |
·IRF与PRRSV感染诱导RANTES的转录无关 | 第34-35页 |
·PRRSV感染激活RANTES产生的相关信号通路 | 第35-40页 |
·PRRSV感染激活RANTES的产生与NF-κB通路有关 | 第35-37页 |
·PRRSV感染Marc-145细胞激活MAPK信号通路 | 第37页 |
·PRRSV感染激活RANTES的产生与ERK1/2通路有关 | 第37-40页 |
第5章 讨论与结论 | 第40-45页 |
·讨论 | 第40-44页 |
·PRRSV感染激活RANTES的产生 | 第40页 |
·参与调控RANTES产生的转录因子 | 第40-42页 |
·PRRSV感染激活RANTES产生的上游信号通路 | 第42-44页 |
·结论 | 第44-45页 |
参考文献 | 第45-51页 |
致谢 | 第51页 |