| 摘要 | 第6-7页 |
| abstract | 第7-8页 |
| 第一章 引言 | 第13-22页 |
| 1.1 伪狂犬病病毒分子病原学特征 | 第13-17页 |
| 1.1.1 伪狂犬病病毒的分类 | 第13页 |
| 1.1.2 伪狂犬病病毒基因组分子特点和病毒形态特征 | 第13-14页 |
| 1.1.3 伪狂犬病病毒的复制周期和感染特性 | 第14-16页 |
| 1.1.4 伪狂犬病病毒的流行病学研究进展 | 第16-17页 |
| 1.2 伪狂犬病病毒基因转录调控蛋白功能概述 | 第17-18页 |
| 1.3 细胞基因转录调控概述 | 第18-20页 |
| 1.4 疱疹病毒毒力基因UL23 相关研究 | 第20页 |
| 1.5 研究目的与意义 | 第20-22页 |
| 第二章 伪狂犬病病毒UL23 基因转录调控研究 | 第22-40页 |
| 2.1 材料和方法 | 第22-31页 |
| 2.1.1 主要细胞和病毒 | 第22页 |
| 2.1.2 质粒和主要试剂 | 第22-23页 |
| 2.1.3 主要设备仪器 | 第23页 |
| 2.1.4 细胞总RNA的提取 | 第23页 |
| 2.1.5 UL23 基因5’RACE基本操作 | 第23-26页 |
| 2.1.6 病毒基因组的提取 | 第26-27页 |
| 2.1.7 引物设计 | 第27-28页 |
| 2.1.8 重组质粒和突变质粒的构建 | 第28-30页 |
| 2.1.9 双荧光素酶报告系统检测启动子活性 | 第30页 |
| 2.1.10 重组质粒的表达鉴定和Co-IP互作验证 | 第30-31页 |
| 2.1.11 PRV反式激活因子和细胞转录因子的Co-IP互作验证 | 第31页 |
| 2.2 结果 | 第31-38页 |
| 2.2.1 UL23 基因转录起始位点的确定 | 第31-32页 |
| 2.2.2 UL23 启动子区域的确定 | 第32-33页 |
| 2.2.3 UL23 基因核心启动子元件的鉴定 | 第33-35页 |
| 2.2.4 PRV反式激活因子和细胞转录因子真核表达的鉴定 | 第35页 |
| 2.2.5 PRV反式激活因子对UL23 TSS1和TSS2 的影响 | 第35-36页 |
| 2.2.6 过表达细胞转录因子对UL23 TSS1和TSS2 的影响 | 第36-37页 |
| 2.2.7 PRV反式激活因子与细胞转录因子的互作验证 | 第37-38页 |
| 2.3 讨论 | 第38-40页 |
| 第三章 UL23 基因启动子缺失病毒的构建及多克隆抗体的制备 | 第40-49页 |
| 3.1 材料和方法 | 第40-45页 |
| 3.1.1 毒株、细胞和实验动物 | 第40页 |
| 3.1.2 载体、试剂和菌株 | 第40页 |
| 3.1.3 仪器设备 | 第40页 |
| 3.1.4 相关引物设计 | 第40-41页 |
| 3.1.5 PRV JS-2012 环状基因组的提取 | 第41-42页 |
| 3.1.6 pCRISPR-sgRNA载体的构建 | 第42-43页 |
| 3.1.7 UL23-ΔTSS1 启动子缺失病毒的构建 | 第43页 |
| 3.1.8 pCAGGS-UL23 真核表达质粒的构建 | 第43-44页 |
| 3.1.9 pCAGGS-UL23 细胞免疫荧光的表达鉴定 | 第44-45页 |
| 3.1.10 小鼠免疫 | 第45页 |
| 3.1.11 小鼠免疫后抗体效价的检测 | 第45页 |
| 3.1.12 TSS1 启动子缺失之后UL23 基因表达的鉴定 | 第45页 |
| 3.2 结果 | 第45-48页 |
| 3.2.1 UL23-ΔTSS1 缺失病毒的获得 | 第45-46页 |
| 3.2.2 pCAGGS-UL23 表达鉴定 | 第46页 |
| 3.2.3 小鼠血清的免疫效价测定 | 第46-47页 |
| 3.2.4 UL23-ΔTSS1 缺失病毒UL23 基因的表达情况 | 第47-48页 |
| 3.3 讨论 | 第48-49页 |
| 第四章 全文结论 | 第49-50页 |
| 参考文献 | 第50-58页 |
| 附录 | 第58-61页 |
| 致谢 | 第61-62页 |
| 作者简历 | 第62页 |
