中文摘要 | 第1-10页 |
Abstract | 第10-15页 |
第一章 序言 | 第15-21页 |
·研究背景 | 第15-19页 |
·研究思路 | 第19-21页 |
第二章 家蝇天蚕素(Mdc)和人溶菌酶(Hly)基因的克隆 | 第21-35页 |
·实验材料 | 第21-24页 |
·家蝇和人胎盘组织 | 第21页 |
·菌株和质粒 | 第21页 |
·主要试剂 | 第21页 |
·引物 | 第21-22页 |
·主要培养基和溶液配制 | 第22-23页 |
·主要仪器设备 | 第23-24页 |
·实验方法 | 第24-30页 |
·家蝇幼虫免疫诱导 | 第24页 |
·家蝇三龄幼虫总RNA 的提取 | 第24页 |
·人胎盘组织总RNA 的提取 | 第24-25页 |
·反转录合成Mdc 和Hly 单链cDNA | 第25-26页 |
·重组质粒Mdc/pMD20-T 的构建 | 第26-29页 |
·重组质粒Hly/pMD20-T 的构建 | 第29-30页 |
·实验结果 | 第30-34页 |
·目的基因Mdc 的RT-PCR 扩增 | 第30-31页 |
·重组质粒Mdc/pMD20-T 的鉴定 | 第31页 |
·目的基因Hly 的RT-PCR 扩增 | 第31-33页 |
·重组质粒Hly/pMD20-T 的鉴定 | 第33-34页 |
·讨论 | 第34-35页 |
第三章 融合基因Mdc-hly 的构建及生物信息学分析 | 第35-48页 |
·实验材料 | 第35-36页 |
·菌株和质粒 | 第35页 |
·主要试剂 | 第35页 |
·引物 | 第35页 |
·主要培养基和溶液配制 | 第35页 |
·主要仪器设备 | 第35-36页 |
·实验方法 | 第36-41页 |
·SOE-PCR 技术重组融合基因Mdc-hly | 第36-38页 |
·重组质粒Mdc-hly/pMD20-T 的构建 | 第38-40页 |
·融合基因Mdc-hly 的生物信息学分析 | 第40-41页 |
·实验结果 | 第41-46页 |
·融合基因Mdc-hly 的重组 | 第41页 |
·重组质粒Mdc-hly/pMD20-T 的鉴定 | 第41-42页 |
·融合基因Mdc-hly 的生物信息学分析 | 第42-46页 |
·讨论 | 第46-48页 |
第四章 融合基因Mdc-hly 的原核表达、纯化和鉴定 | 第48-72页 |
·实验材料 | 第48-51页 |
·菌株和质粒 | 第48页 |
·主要试剂 | 第48页 |
·主要培养基和溶液配制 | 第48-50页 |
·引物 | 第50-51页 |
·主要仪器设备 | 第51页 |
·实验方法 | 第51-60页 |
·融合基因Mdc-hly 原核表达重组质粒的构建 | 第51-53页 |
·目的基因的诱导表达及其表达产物的鉴定 | 第53-55页 |
·诱导表达条件的优化 | 第55-56页 |
·目的蛋白Trx-6His-Mdc-hly 的纯化 | 第56-59页 |
·目的蛋白Trx-6His-Mdc-hly 的酶切 | 第59页 |
·融合蛋白Mdc-hly 的冻干浓缩 | 第59-60页 |
·实验结果 | 第60-68页 |
·融合基因Mdc-hly 原核表达重组质粒的构建 | 第60-61页 |
·目的基因的诱导表达及其表达产物的鉴定 | 第61-62页 |
·诱导表达条件的优化 | 第62-66页 |
·目的蛋白Trx-6His-Mdc-hly 的纯化 | 第66-67页 |
·获得融合蛋白Mdc-hly | 第67-68页 |
·讨论 | 第68-72页 |
第五章 融合蛋白Mdc-hly 抗菌活性及其作用机制初步研究 | 第72-82页 |
·实验材料 | 第72页 |
·菌株 | 第72页 |
·主要试剂 | 第72页 |
·主要仪器设备 | 第72页 |
·实验方法 | 第72-75页 |
·抗菌活性测定 | 第72-73页 |
·作用机制 | 第73-75页 |
·实验结果 | 第75-80页 |
·抗菌活性测定 | 第75-76页 |
·作用机制 | 第76-80页 |
·讨论 | 第80-82页 |
第六章 总结和展望 | 第82-84页 |
参考文献 | 第84-92页 |
文献综述 | 第92-99页 |
攻读学位期间科研情况及所受奖励 | 第99-100页 |
附录Ⅰ:缩写词中英文对照 | 第100-101页 |
附录Ⅱ:载体图谱 | 第101-102页 |
附录Ⅲ:测序图 | 第102-106页 |
致谢 | 第106-107页 |