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家蝇天蚕素与人溶菌酶融合基因(Mdc-hly)构建、表达及其抗菌活性的实验研究

中文摘要第1-10页
Abstract第10-15页
第一章 序言第15-21页
   ·研究背景第15-19页
   ·研究思路第19-21页
第二章 家蝇天蚕素(Mdc)和人溶菌酶(Hly)基因的克隆第21-35页
   ·实验材料第21-24页
     ·家蝇和人胎盘组织第21页
     ·菌株和质粒第21页
     ·主要试剂第21页
     ·引物第21-22页
     ·主要培养基和溶液配制第22-23页
     ·主要仪器设备第23-24页
   ·实验方法第24-30页
     ·家蝇幼虫免疫诱导第24页
     ·家蝇三龄幼虫总RNA 的提取第24页
     ·人胎盘组织总RNA 的提取第24-25页
     ·反转录合成Mdc 和Hly 单链cDNA第25-26页
     ·重组质粒Mdc/pMD20-T 的构建第26-29页
     ·重组质粒Hly/pMD20-T 的构建第29-30页
   ·实验结果第30-34页
     ·目的基因Mdc 的RT-PCR 扩增第30-31页
     ·重组质粒Mdc/pMD20-T 的鉴定第31页
     ·目的基因Hly 的RT-PCR 扩增第31-33页
     ·重组质粒Hly/pMD20-T 的鉴定第33-34页
   ·讨论第34-35页
第三章 融合基因Mdc-hly 的构建及生物信息学分析第35-48页
   ·实验材料第35-36页
     ·菌株和质粒第35页
     ·主要试剂第35页
     ·引物第35页
     ·主要培养基和溶液配制第35页
     ·主要仪器设备第35-36页
   ·实验方法第36-41页
     ·SOE-PCR 技术重组融合基因Mdc-hly第36-38页
     ·重组质粒Mdc-hly/pMD20-T 的构建第38-40页
     ·融合基因Mdc-hly 的生物信息学分析第40-41页
   ·实验结果第41-46页
     ·融合基因Mdc-hly 的重组第41页
     ·重组质粒Mdc-hly/pMD20-T 的鉴定第41-42页
     ·融合基因Mdc-hly 的生物信息学分析第42-46页
   ·讨论第46-48页
第四章 融合基因Mdc-hly 的原核表达、纯化和鉴定第48-72页
   ·实验材料第48-51页
     ·菌株和质粒第48页
     ·主要试剂第48页
     ·主要培养基和溶液配制第48-50页
     ·引物第50-51页
     ·主要仪器设备第51页
   ·实验方法第51-60页
     ·融合基因Mdc-hly 原核表达重组质粒的构建第51-53页
     ·目的基因的诱导表达及其表达产物的鉴定第53-55页
     ·诱导表达条件的优化第55-56页
     ·目的蛋白Trx-6His-Mdc-hly 的纯化第56-59页
     ·目的蛋白Trx-6His-Mdc-hly 的酶切第59页
     ·融合蛋白Mdc-hly 的冻干浓缩第59-60页
   ·实验结果第60-68页
     ·融合基因Mdc-hly 原核表达重组质粒的构建第60-61页
     ·目的基因的诱导表达及其表达产物的鉴定第61-62页
     ·诱导表达条件的优化第62-66页
     ·目的蛋白Trx-6His-Mdc-hly 的纯化第66-67页
     ·获得融合蛋白Mdc-hly第67-68页
   ·讨论第68-72页
第五章 融合蛋白Mdc-hly 抗菌活性及其作用机制初步研究第72-82页
   ·实验材料第72页
     ·菌株第72页
     ·主要试剂第72页
     ·主要仪器设备第72页
   ·实验方法第72-75页
     ·抗菌活性测定第72-73页
     ·作用机制第73-75页
   ·实验结果第75-80页
     ·抗菌活性测定第75-76页
     ·作用机制第76-80页
   ·讨论第80-82页
第六章 总结和展望第82-84页
参考文献第84-92页
文献综述第92-99页
攻读学位期间科研情况及所受奖励第99-100页
附录Ⅰ:缩写词中英文对照第100-101页
附录Ⅱ:载体图谱第101-102页
附录Ⅲ:测序图第102-106页
致谢第106-107页

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