摘要 | 第1-7页 |
ABSTRACT | 第7-12页 |
第一章 绪论 | 第12-34页 |
·细小病毒的研究 | 第12-16页 |
·细小病毒的特征及分类 | 第12-14页 |
·细小病毒的基因组特征 | 第14页 |
·细小病毒的复制 | 第14-16页 |
·浓核病毒的研究 | 第16-21页 |
·浓核病毒的特征 | 第16-17页 |
·浓核病毒的感染特性 | 第17页 |
·浓核病毒的基因组结构 | 第17-19页 |
·家蚕浓核病毒的特征 | 第19-21页 |
·家蚕细小病毒样病毒的研究 | 第21-27页 |
·家蚕细小病毒样病毒山梨株的研究 | 第21-23页 |
·家蚕细小病毒样病毒中国株的研究 | 第23-25页 |
·家蚕细小病毒样病毒VD1-ORF4编码DNA聚合酶的分析 | 第25-26页 |
·家蚕细小病毒样病毒复制机制的推测 | 第26-27页 |
·DNA聚合酶B家族的特征 | 第27-29页 |
·外源基因表达系统 | 第29-31页 |
·pET原核表达系统 | 第29-30页 |
·杆状病毒表达系统 | 第30-31页 |
·立题的目的意义 | 第31页 |
·研究内容和技术路线 | 第31-34页 |
·研究内容 | 第31-33页 |
·技术路线 | 第33-34页 |
第二章 家蚕细小病毒样病毒中国株DNA聚合酶基因主要功能域的原核表达载体的构建 | 第34-45页 |
·实验材料 | 第34-36页 |
·病毒、菌株与载体 | 第34页 |
·主要实验仪器设备 | 第34页 |
·工具酶及主要生化试剂 | 第34-35页 |
·试剂的配制 | 第35-36页 |
·实验方法 | 第36-42页 |
·病毒基因组DNA的制备 | 第36-37页 |
·VD1-ORF4/2163的克隆和鉴定 | 第37-41页 |
·VD1-ORF4/2163原核表达载体的构建 | 第41-42页 |
·结果 | 第42-44页 |
·VD1-ORF4/2163的PCR扩增 | 第42-43页 |
·重组克隆质粒的鉴定 | 第43-44页 |
·重组表达质粒的鉴定 | 第44页 |
·讨论与总结 | 第44-45页 |
第三章 家蚕细小病毒样病毒中国株DNA聚合酶基因主要功能域的原核表达及抗体制备 | 第45-56页 |
·实验材料 | 第45-47页 |
·菌株 | 第45页 |
·主要实验仪器设备 | 第45页 |
·主要实验试剂 | 第45-46页 |
·试剂的配制 | 第46-47页 |
·实验方法 | 第47-52页 |
·VD1-ORF4/2163基因片段在大肠杆菌中的表达及表达产物的鉴定 | 第47-50页 |
·重组蛋白的纯化及多克隆抗体的制备 | 第50-52页 |
·结果 | 第52-54页 |
·表达产物的SDS-PAGE分析与Western blot检测 | 第52页 |
·表达产物的质谱鉴定 | 第52-53页 |
·多克隆抗体的制备与纯化 | 第53-54页 |
·讨论与总结 | 第54-56页 |
第四章 家蚕细小病毒样病毒中国株DNA聚合酶基因的真核表达 | 第56-64页 |
·实验材料 | 第56页 |
·质粒、菌株与细胞 | 第56页 |
·主要实验试剂和药品 | 第56页 |
·实验方法 | 第56-60页 |
·VD1-ORF4的克隆 | 第56-57页 |
·pFastBacHTb-VD1-ORF4转移载体的构建 | 第57-58页 |
·重组Bacmid穿梭载体的构建 | 第58页 |
·重组Bacmid的提取 | 第58-59页 |
·重组Bacmid的PCR鉴定 | 第59页 |
·重组杆状病毒的获得 | 第59-60页 |
·重组蛋白的表达与鉴定 | 第60页 |
·结果 | 第60-63页 |
·VD1-ORF4的克隆与鉴定 | 第60-61页 |
·重组杆状病毒转移载体pFastBacHTb-VD1-ORF4的鉴定 | 第61-62页 |
·重组穿梭载体Bacmid-VD1-ORF4的PCR鉴定 | 第62页 |
·表达产物的SDS-PAGE及Western blot分析 | 第62-63页 |
·讨论与总结 | 第63-64页 |
第五章 总结与展望 | 第64-66页 |
·主要工作总结 | 第64页 |
·工作展望 | 第64-66页 |
参考文献 | 第66-71页 |
硕士期间发表的论文 | 第71-72页 |
致谢 | 第72页 |