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集胞藻PCC6803染色体上毒素—抗毒素基因ssr1114/slr0664和ssl2920/ssl2921的研究

摘要第1-7页
ABSTRACT第7-11页
第一章 文献综述第11-28页
   ·细菌"毒素-抗毒素系统"第11-13页
     ·细菌"毒素-抗毒素系统"的种类第11页
     ·位于质粒上的Ⅱ类毒素-抗毒素系统第11-13页
     ·位于染色体上的Ⅱ类"毒素-抗毒素系统"第13页
   ·细菌染色体上TAS生理功能第13-16页
   ·细菌染色体上Ⅱ类TA系统的作用机制第16-17页
   ·细菌毒素抗毒素系统的分布及起源第17-18页
   ·细菌依赖ATP的蛋白酶系统第18-24页
     ·Lon蛋白酶第19-20页
     ·C1pP蛋白酶第20页
     ·依赖ATP蛋白的作用靶标第20-21页
     ·蓝藻中的C1pP蛋白酶系统第21-24页
   ·集胞藻PCC6803及其染色体上的II类TA系统和依赖ATP的蛋白酶第24-26页
     ·集胞藻PCC6803全基因组测序以及其遗传操作系统第25-26页
     ·集胞藻PCC6803基因组中的"毒素-抗毒素系统"和依赖ATP的蛋白酶第26页
   ·本研究的目的和总体设计第26-28页
第二章 毒素-抗毒素系统基因ssr1114/slr0664,ssl2920/ssl292l对集胞藻PCC6803细胞的毒性和抗毒性作用第28-39页
   ·材料和实验方法第28-32页
     ·菌株、培养条件第28-30页
     ·分子生物学操作方法第30页
     ·集胞藻PCC6803染色体的提取第30-31页
     ·集胞藻PCC6803的转化及转化子的筛选第31页
     ·诱导表达突变株诱导方法及表型分析第31-32页
   ·结果第32-37页
     ·诱导毒素基因ssl2921表达整合性重组质粒的构建第32-33页
     ·铜离子诱导表达调控突变株的构建第33-34页
     ·铜离子诱导表达调控突变株细胞的生长特性分析第34-37页
   ·讨论第37-39页
第三章 集胞藻PCC6803染色体上的两对毒素抗毒素蛋白的相互作用第39-51页
   ·材料和方法第39-42页
     ·菌株、质粒和培养条件第39-40页
     ·分子生物学操作第40页
     ·重组蛋白的诱导表达与检测第40-41页
     ·重组蛋白的纯化与检测第41页
     ·重组蛋白的肽谱分析第41-42页
   ·结果第42-49页
     ·诱导表达抗毒素蛋白Ssr1114,Ss12920重组质粒第42-44页
     ·重组蛋白H6-Ssr1114的诱导表达及纯化第44-45页
     ·Ssr1114/slr0664共表达和Ss12920/ssl2921共表达重组质粒的构建第45-46页
     ·Ssr1114/slr0664和Ss12920/ss12921共表达及共纯化第46-48页
     ·肽谱分析第48-49页
   ·讨论第49-51页
第四章 集胞藻PCC6803中降解抗毒素蛋白Ssr1114和Ss12920的蛋白酶第51-66页
   ·材料和方法第52-54页
     ·菌株、质粒及培养条件第52-53页
     ·分子生物学操作方法第53页
     ·诱导调控表达菌株的诱导第53-54页
     ·重组蛋白多克隆抗体的制备第54页
     ·蛋白Dot blot及Western blot分析第54页
   ·结果与分析第54-64页
     ·含蛋白酶基因和TA系统基因的双诱导调控质粒第54-56页
     ·双诱导调控重组菌株的细胞生长分析第56-57页
     ·Ssr1114、Ss12920、S1r0664、Ss12921、Lons和C1pP2s的表达和纯化第57-59页
     ·Ssr1114、Ss12920、S1r0664、Ss12921、Lons和C1pP2s多克隆抗体的检测第59-60页
     ·蛋白酶降解抗毒素蛋白的Western blot检测第60-64页
   ·讨论第64-66页
第五章 主要结论与展望第66-68页
   ·主要结论第66页
   ·研究展望第66-68页
参考文献第68-77页
附录Ⅰ 缩略语表第77-78页
附录Ⅱ 主要实验仪器第78-79页
附录Ⅲ 主要试剂及配制第79-82页
附录Ⅳ 主要试剂第82-83页
致谢第83-84页
攻读硕士学位期间发表的论文第84页

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