摘要 | 第5-7页 |
abstract | 第7-9页 |
第一章 绪论 | 第12-25页 |
1.1 杆状病毒 | 第12-15页 |
1.1.1 杆状病毒简述 | 第12-13页 |
1.1.2 杆状病毒应用 | 第13-14页 |
1.1.3 家蚕核型多角体病毒BmNPV及多角体基因简述 | 第14-15页 |
1.2 细胞自噬 | 第15-18页 |
1.2.1 自噬分类 | 第15-16页 |
1.2.2 自噬发生过程及分子机制 | 第16-17页 |
1.2.3 自噬的功能 | 第17-18页 |
1.3 ATG8家族蛋白 | 第18-21页 |
1.3.1 ATG8家族蛋白简述 | 第18-20页 |
1.3.2 自噬受体蛋白的AIM(LIR/GIM)基序 | 第20-21页 |
1.4 病毒和自噬 | 第21-22页 |
1.5 研究目的和意义 | 第22-23页 |
1.6 主要研究内容和技术路线 | 第23-25页 |
1.6.1 研究内容 | 第23-24页 |
1.6.2 技术路线 | 第24-25页 |
第二章 昆虫中ATG8蛋白生物信息学分析 | 第25-50页 |
2.1 材料与方法 | 第25-28页 |
2.1.1 atg8s基因的搜索和多重序列比对 | 第25页 |
2.1.2 系统发育和基因结构分析 | 第25-26页 |
2.1.3 家蚕细胞品系,病毒和菌株 | 第26页 |
2.1.4 试剂和抗体 | 第26-27页 |
2.1.5 试剂的配制 | 第27-28页 |
2.1.6 实验仪器 | 第28页 |
2.2 实验方法 | 第28-36页 |
2.2.1 目的片段的TA克隆 | 第29-31页 |
2.2.2 BmGABARAP和BmLC3D的定点突变 | 第31-32页 |
2.2.3 重组转移载体的构建 | 第32-33页 |
2.2.4 重组杆粒及病毒的获取 | 第33-35页 |
2.2.5 eGFP-BmGABARAP/eGFP-BmLC3D细胞系的构建 | 第35页 |
2.2.6 激光共聚焦实验 | 第35页 |
2.2.7 Westernblot分析 | 第35-36页 |
2.3 结果与分析 | 第36-49页 |
2.3.1 家蚕ATG8家族蛋白BmGABARAP、BmLC3D的系统发育及基因结构分析 | 第36-44页 |
2.3.2 BmATG8及其切割位点验证 | 第44-49页 |
2.4 讨论与总结 | 第49-50页 |
第三章 BmNPV感染Bm细胞后的自噬分析 | 第50-58页 |
3.1 .材料与方法 | 第50页 |
3.1.1 家蚕细胞品系,病毒和菌株 | 第50页 |
3.1.2 试剂和抗体 | 第50页 |
3.1.3 试剂配制 | 第50页 |
3.1.4 实验仪器 | 第50页 |
3.2 实验方法 | 第50页 |
3.3 结果与分析 | 第50-56页 |
3.4 讨论与总结 | 第56-58页 |
第四章 多角体蛋白LIR基序的研究 | 第58-69页 |
4.1 材料试剂 | 第58-59页 |
4.1.1 细胞系,病毒,质粒和菌株 | 第58页 |
4.1.2 试剂与抗体 | 第58页 |
4.1.3 试剂的配制 | 第58-59页 |
4.1.4 实验仪器 | 第59页 |
4.2 实验方法 | 第59-65页 |
4.2.1 目的片段的TA克隆 | 第60页 |
4.2.2 Bmpoly的定点突变 | 第60页 |
4.2.3 重组质粒、杆粒及病毒的获取 | 第60-63页 |
4.2.4 多角体蛋白和BmLC3D的互作分析 | 第63-64页 |
4.2.5 Bmpoly的LIR分析 | 第64页 |
4.2.6 Westernblot分析 | 第64-65页 |
4.3 结果与分析 | 第65-67页 |
4.3.1 多角体蛋白AIM基序的确认 | 第65-67页 |
4.4 讨论与总结 | 第67-69页 |
第五章 结论与展望 | 第69-72页 |
5.1 结论 | 第69-70页 |
5.2 展望 | 第70-72页 |
参考文献 | 第72-77页 |
致谢 | 第77-78页 |
在校期间的学术成果及参与的项目 | 第78页 |
在学期间发表的学术论文 | 第78页 |
参与的项目 | 第78页 |